產品(pǐn)中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測(cè)試劑盒
| 產品名稱 | 英文名(míng)稱(chēng) | 貨號 |
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龜分(fēn)枝杆(gān)菌PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒 |
Mycobacterium cheloeiPCR |
YS-P014453 |
分(fēn)類(lèi):PCR檢測試劑盒
儲存條件(jiàn):-20℃避(bì)光保(bǎo)存(cún),避免(miǎn)反復(fù)凍融。
運輸:低溫,避(bì)光(guāng)。
有(yǒu)效(xiào)期(qī):一(yī)年
貨(huò)期:現貨PCR試(shì)劑(jì)盒的有(yǒu)效期一(yī)般(bān)為(wéi)1年,這是(shì)指在(zài)適(shì)當(dāng)的儲(chǔ)存溫度下。核酸(suān)擴增部分(fēn)的試劑(jì)一般要貯存於(yú)-20℃下(xià),產(chǎn)物檢(jiǎn)測部分(fēn)試劑(jì)則貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡量避免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融。
u 閾(yù)值(Threshold)設定:將閾(yù)值(zhí)綫設(shè)定(dìng)在剛(gāng)好超過正(zhèng)常陰性質(zhì)控品(pǐn)擴(kuò)增曲綫的(dí)最高(gāo)點。
2. 陽性質控品的(dí)檢測結果應(yīng)為(wéi)陽性,有明顯的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期(qī),Ct值(zhí)應小於(yú)等於35;
3. 以上(shàng)要求需(xū)在(zài)一次實驗中(zhōng)同時滿(mǎn)足,否則(zé)該次實(shí)驗(yàn)視為無(wú)效。
2.可疑:有明(míng)顯的(dí)指數擴增期(qī),且38≤Ct<40,此(cǐ)時樣(yàng)本(běn)為可疑樣本;對於可疑樣本建議復核一次,若(ruò)復核結果Ct<40且有指數擴增(zēng)期(qī),則判定為(wéi)陽性(xìng),否則判定(dìng)為陰(yīn)性(xìng);
3. 陰性(xìng):無指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期,Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均(jūn)判(pàn)定為陰(yīn)性樣本。
【對檢(jiǎn)驗結果的解釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環境汙(wū)染,試劑(jì)汙染(rǎn),樣品(pǐn)交叉(chā)汙(wū)染會出現(xiàn)假(jiǎ)陽性(xìng)結果;
2. 試(shì)劑運(yùn)輸(shū),保(bǎo)存(cún)不當(dāng)或試劑(jì)配製不(bù)準確(què)引起(qǐ)的(dí)試劑(jì)檢測效能(néng)下降,可能會導致(zhì)出現假(jiǎ)陰(yīn)性結果。
②鹼(jiǎn)基配對原則(zé);
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的(dí)忠實性(xìng);
④靶(bǎ)基(jī)因(yīn)的(dí)特異性與(yǔ)保(bǎo)守性。
龜(guī)分枝杆(gān)菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒其中引物(wù)與模(mó)板的(dí)正確結(jié)合是(shì)關(guān)鍵。引物(wù)與(yǔ)模板的(dí)結合及引(yǐn)物(wù)鏈(liàn)的(dí)延伸是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則(zé)的。聚合(hé)酶合成(chéng)反應的(dí)忠實(shí)性及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐(nài)高(gāo)溫性,使反(fǎn)應中模(mó)板(bǎn)與(yǔ)引物(wù)的結(jié)合(復(fù)性)可以(yǐ)在較(jiào)高的溫(wēn)度下進行,結合(hé)的特異(yì)性大(dà)大增(zēng)加(jiā),被(bèi)擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基因片段也(yě)就(jiù)能保持很(hěn)高(gāo)的正(zhèng)確度。再通過(guò)選擇特異(yì)性和(hé)保守性(xìng)高的靶(bǎ)基因(yīn)區(qū),其特異性程度就(jiù)更高。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高
PCR產物的生(shēng)成(chéng)量是以指數方式增(zēng)加(jiā)的(dí),能將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的起始待(dài)測模板擴(kuò)增(zēng)到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬(wàn)個細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒(dú)的檢測(cè)中,PCR的靈敏度(dù)可(kě)達3個(gè)RFU(空斑(bān)形成單位(wèi));在細菌(jūn)學中zui小檢(jiǎn)出(chū)率(shuài)為(wéi)3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便,快速(sù)
PCR反(fǎn)應用耐高溫的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi),一(yī)次性地將反應(yīng)液加(jiā)好後,即在DNA擴(kuò)增液和(hé)水浴鍋上進行變(biàn)性(xìng)-退火(huǒ)-延伸反(fǎn)應,一般在2~4 小(xiǎo)時完成(chéng)擴(kuò)增反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增(zēng)產(chǎn)物一(yī)般用電(diàn)泳分(fēn)析,不一定(dìng)要用(yòng)同位(wèi)素,無放射性(xìng)汙染(rǎn),易(yì)推廣。
(4) 對標本的純度要求(qiú)低
不需要(yào)分(fēn)離(lí)病(bìng)毒或細(xì)菌及培養細胞,DNA 粗(cū)製品及(jí)總RNA均(jūn)可(kě)作為(wéi)擴增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可(kě)直接用(yòng)臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本如(rú)血液,體(tǐ)腔液(yè),洗(xǐ)嗽(sòu)液,毛發,細胞,活PCR技術概(gài)論(lùn)。
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