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產(chǎn)品中心(xīn)
PCR檢測試劑盒(hé)
商品(pǐn)屬性
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 英(yīng)文名稱 | 貨(huò)號 |
|
睡眠(mián)嗜血杆菌PCR檢測(cè)試(shì)劑盒 |
Haemophilus somnusPCR |
YS-P014258 |
分類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒
儲存(cún)條(tiáo)件：-20℃避光保(bǎo)存，避免反復(fù)凍(dòng)融。
運(yùn)輸：低溫，避(bì)光(guāng)。
有效期：一(yī)年
貨(huò)期：現貨(huò)PCR試(shì)劑盒的有(yǒu)效期(qī)一(yī)般為1年(nián)，這是指在(zài)適(shì)當的儲存溫度下。核酸(suān)擴(kuò)增(zēng)部分(fēn)的試劑一般要(yào)貯存於-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢測部(bù)分(fēn)試(shì)劑則(zé)貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免反(fǎn)復凍融。
【結(jié)果分析條(tiáo)件設定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設定：將閾(yù)值綫設定在剛好超(chāo)過(guò)正常陰性(xìng)質控品擴(kuò)增(zēng)曲(qū)綫的(dí)最(zuì)高(gāo)點(diǎn)。
【質控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽性質(zhì)控品(pǐn)的檢測結果應為陽(yáng)性(xìng)，有(yǒu)明(míng)顯的(dí)指數擴增期(qī)，Ct值應小於等於(yú)35；
3. 以上(shàng)要求需在一(yī)次實(shí)驗中同時(shí)滿足(zú)，否(fǒu)則(zé)該次(cì)實驗(yàn)視(shì)為(wéi)無效(xiào)。
【結(jié)果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可(kě)疑(yí)：有明(míng)顯的指數擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本為(wéi)可(kě)疑樣(yàng)本；對於(yú)可(kě)疑樣本(běn)建議(yì)復核(hé)一(yī)次，若復核(hé)結果Ct<40且有(yǒu)指數擴(kuò)增期，則判定(dìng)為陽性，否則(zé)判定(dìng)為陰性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無指數(shù)擴(kuò)增期，Ct=40或無(wú)Ct值均判(pàn)定(dìng)為陰性樣(yàng)本。
【對(duì)檢驗結果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗(yàn)室環境汙(wū)染(rǎn)，試劑(jì)汙染，樣(yàng)品交叉汙(wū)染會(huì)出現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性(xìng)結果；
2. 試(shì)劑(jì)運輸，保存不當(dāng)或試劑(jì)配製(zhì)不準確引起的(dí)試(shì)劑檢測(cè)效能下(xià)降，可(kě)能會(huì)導致出現假(jiǎ)陰性結(jié)果。
PCR反應(yīng)的特異(yì)性：
②鹼基(jī)配對原則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)合(hé)成(chéng)反應的忠實性(xìng)；
④靶基(jī)因(yīn)的特異性與(yǔ)保守性(xìng)。
睡眠嗜(shì)血(xiě)杆菌PCR檢測試劑(jì)盒(hé)其中引物與(yǔ)模(mó)板的正確結合是(shì)關鍵。引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的結合(hé)及引(yǐn)物鏈的延伸是(shì)遵(zūn)循鹼基配對(duì)原(yuán)則(zé)的(dí)。聚合(hé)酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實(shí)性及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐(nài)高(gāo)溫性，使反應中模板(bǎn)與引(yǐn)物的結合(復性)可(kě)以在(zài)較高的(dí)溫度(dù)下進行，結合的特異性大大增加，被(bèi)擴增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基因片段(duàn)也就(jiù)能保持很高的正確(què)度(dù)。再(zài)通過選擇特(tè)異性(xìng)和(hé)保(bǎo)守性(xìng)高(gāo)的靶基(jī)因區(qū)，其特異性(xìng)程度就更高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高
PCR產物的生(shēng)成量是以指數方式增加的(dí)，能(néng)將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測(cè)模板(bǎn)擴增(zēng)到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個靶(bǎ)細胞；在(zài)病(bìng)毒的檢(jiǎn)測中，PCR的(dí)靈(líng)敏度(dù)可(kě)達3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成單位(wèi))；在細(xì)菌(jūn)學中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率(shuài)為(wéi)3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐(nài)高溫的Taq DNA聚合酶(méi)，一次性(xìng)地將(jiāng)反應液(yè)加(jiā)好後(hòu)，即(jí)在(zài)DNA擴增(zēng)液和水(shuǐ)浴鍋(guō)上進行變性(xìng)-退(tuì)火(huǒ)-延(yán)伸(shēn)反(fǎn)應，一般(bān)在(zài)2～4 小時(shí)完成擴增(zēng)反應。擴(kuò)增產物(wù)一般用電泳分析(xī)，不(bù)一定要用同位(wèi)素，無(wú)放(fàng)射性汙(wū)染，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對標(biāo)本的(dí)純(chún)度(dù)要(yào)求低
不需(xū)要(yào)分離病(bìng)毒或細菌及培(péi)養細胞，DNA 粗製品及總RNA均(jūn)可(kě)作為擴增(zēng)模板。可(kě)直(zhí)接(jiē)用臨床(chuáng)標(biāo)本(běn)如血液，體腔液，洗(xǐ)嗽液，毛發，細(xì)胞，活PCR技術概論(lùn)。
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