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PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒
嗜血(xiě)杆(gān)菌(jūn)通(tōng)用PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)
商(shāng)品屬性(xìng)
| 產品名稱 | 英(yīng)文名稱(chēng) | 貨號 |
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嗜血(xiě)杆菌通用PCR檢測試(shì)劑盒 |
Haemophilus spp.PCR |
YS-P014259 |
分類(lèi)：PCR檢測試(shì)劑盒(hé)
儲(chǔ)存條件(jiàn)：-20℃避光保(bǎo)存，避免反(fǎn)復凍融(róng)。
運輸：低溫(wēn)，避光。
有效(xiào)期：一(yī)年(nián)
貨期：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑盒(hé)的有(yǒu)效(xiào)期一般為1年，這是指在適(shì)當的(dí)儲(chǔ)存(cún)溫(wēn)度下。核酸擴(kuò)增部分的(dí)試劑一(yī)般要貯存於(yú)-20℃下，產物(wù)檢測部分試(shì)劑(jì)則(zé)貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡量避免(miǎn)反復凍融。
【結(jié)果(guǒ)分(fēn)析(xī)條(tiáo)件設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾值綫設定(dìng)在剛好超(chāo)過正(zhèng)常(cháng)陰性質控品擴增(zēng)曲綫(xiàn)的最高(gāo)點(diǎn)。
【質(zhì)控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)的(dí)檢測(cè)結果應為(wéi)陽(yáng)性，有明顯的指(zhǐ)數擴增(zēng)期，Ct值(zhí)應小於(yú)等(děng)於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求(qiú)需在一次實(shí)驗(yàn)中同時滿足，否(fǒu)則該(gāi)次(cì)實驗視(shì)為無效(xiào)。
【結(jié)果判(pàn)斷(duàn)】
2.可疑：有明顯的指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本(běn)為可疑樣本；對於(yú)可疑樣本(běn)建議復核一(yī)次(cì)，若復(fù)核結果(guǒ)Ct<40且有指數擴增(zēng)期(qī)，則判定為(wéi)陽(yáng)性，否則判定為陰(yīn)性；
3. 陰性：無指數擴增(zēng)期，Ct=40或(huò)無Ct值均(jūn)判(pàn)定為陰(yīn)性樣本。
【對(duì)檢驗結果的(dí)解釋(shì)】
1. 實(shí)驗室環(huán)境汙(wū)染，試(shì)劑汙染(rǎn)，樣(yàng)品交(jiāo)叉(chā)汙染(rǎn)會(huì)出(chū)現假陽(yáng)性結(jié)果；
2. 試劑(jì)運輸(shū)，保(bǎo)存(cún)不(bù)當或試(shì)劑配製不(bù)準確引(yǐn)起(qǐ)的試劑(jì)檢測(cè)效能(néng)下降，可能(néng)會導(dǎo)致出現(xiàn)假陰(yīn)性(xìng)結果。
PCR反應的特異性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對(duì)原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶(bǎ)基因的(dí)特異(yì)性(xìng)與保(bǎo)守(shǒu)性。
嗜(shì)血杆菌(jūn)通用PCR檢測試(shì)劑(jì)盒其中引(yǐn)物與模板(bǎn)的正確結合是關(guān)鍵。引物(wù)與(yǔ)模板的結合及引物(wù)鏈(liàn)的(dí)延伸(shēn)是遵(zūn)循鹼基配對原(yuán)則(zé)的(dí)。聚合酶(méi)合成反(fǎn)應的(dí)忠實(shí)性及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高溫(wēn)性，使反應中(zhōng)模(mó)板與引物的結(jié)合(復性)可以(yǐ)在較(jiào)高(gāo)的(dí)溫度下進(jìn)行(háng)，結合的(dí)特異(yì)性(xìng)大大增加，被擴增的靶基(jī)因片段也就(jiù)能(néng)保持(chí)很高(gāo)的正(zhèng)確度(dù)。再通過選擇特異(yì)性(xìng)和(hé)保守性高的靶(bǎ)基(jī)因區，其(qí)特異性程(chéng)度就(jiù)更高。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產物(wù)的生成量是以指(zhǐ)數方(fāng)式(shì)增加的，能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起始待測模板擴增到(dào)微克(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從100萬個細(xì)胞中(zhōng)檢(jiǎn)出一個靶細胞(bāo)；在病毒的檢(jiǎn)測(cè)中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可(kě)達(dá)3個RFU(空(kōng)斑(bān)形(xíng)成單(dān)位)；在細菌(jūn)學中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出(chū)率為3個(gè)細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐(nài)高(gāo)溫的Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一(yī)次性(xìng)地(dì)將反(fǎn)應液(yè)加好後，即(jí)在DNA擴增液和水(shuǐ)浴鍋上進行變(biàn)性(xìng)-退火-延伸反(fǎn)應，一(yī)般在(zài)2～4 小時完成擴增反應。擴(kuò)增產物(wù)一(yī)般用(yòng)電泳分析，不一定要用同(tóng)位素(sù)，無(wú)放(fàng)射(shè)性(xìng)汙染(rǎn)，易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本(běn)的(dí)純度要求低(dī)
不需要(yào)分離病(bìng)毒(dú)或細(xì)菌及培(péi)養細(xì)胞，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及(jí)總RNA均可作為擴增模(mó)板(bǎn)。可(kě)直接用臨床(chuáng)標(biāo)本(běn)如血液(yè)，體腔液，洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè)，毛發，細(xì)胞(bāo)，活(huó)PCR技術概(gài)論。
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