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PCR檢測試(shì)劑盒(hé)
商品(pǐn)屬(shǔ)性(xìng)
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱 | 英(yīng)文(wén)名(míng)稱(chēng) | 貨號 |
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亨德(dé)拉病毒(dú)PCR檢測(cè)試(shì)劑盒 |
Hendra VirusRTPCR |
YS-P014276 |
分類(lèi)：PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)
儲(chǔ)存(cún)條件：-20℃避(bì)光(guāng)保存，避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
運(yùn)輸：低(dī)溫(wēn)，避(bì)光(guāng)。
有效期(qī)：一年
貨(huò)期(qī)：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑盒(hé)的(dí)有效期(qī)一(yī)般(bān)為(wéi)1年，這(zhè)是(shì)指(zhǐ)在(zài)適(shì)當的(dí)儲存溫(wēn)度(dù)下(xià)。核酸(suān)擴(kuò)增(zēng)部分的(dí)試(shì)劑(jì)一般要貯存於(yú)-20℃下，產物(wù)檢(jiǎn)測部分試劑則貯(zhù)存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免反復(fù)凍融。
【結果分析(xī)條(tiáo)件設(shè)定(dìng)】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定：將閾值綫設(shè)定(dìng)在(zài)剛(gāng)好超過正(zhèng)常陰性質(zhì)控品(pǐn)擴增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)的最(zuì)高點(diǎn)。
【質(zhì)控標準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控品的(dí)檢測結(jié)果應為陽(yáng)性，有明(míng)顯的(dí)指數擴(kuò)增期(qī)，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於(yú)等於(yú)35；
3. 以上要求(qiú)需在(zài)一次實(shí)驗中同(tóng)時滿(mǎn)足(zú)，否則(zé)該次實(shí)驗視(shì)為(wéi)無效。
【結果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可疑：有(yǒu)明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本(běn)為(wéi)可(kě)疑樣本；對於可疑樣本建議(yì)復核(hé)一次，若(ruò)復(fù)核結果Ct<40且有(yǒu)指數擴增期(qī)，則(zé)判定為陽性，否則判定為陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或無(wú)Ct值均判定為(wéi)陰性(xìng)樣本。
【對檢驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實驗室環境汙染，試(shì)劑汙(wū)染，樣(yàng)品交(jiāo)叉汙染會(huì)出(chū)現假陽(yáng)性結果；
2. 試(shì)劑(jì)運(yùn)輸，保存(cún)不(bù)當(dāng)或試劑配製(zhì)不準(zhǔn)確引起的試(shì)劑(jì)檢測效能下(xià)降，可(kě)能會導致(zhì)出現假(jiǎ)陰性(xìng)結果。
PCR反應(yīng)的特異(yì)性：
②鹼基(jī)配對原則；
③Taq DNA聚合酶(méi)合成反(fǎn)應的忠實性(xìng)；
④靶(bǎ)基因的特異(yì)性與(yǔ)保守性(xìng)。
亨德拉病(bìng)毒(dú)PCR檢測試劑(jì)盒(hé)其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物(wù)與模(mó)板的(dí)正(zhèng)確結合是關(guān)鍵(jiàn)。引物(wù)與(yǔ)模板的(dí)結合及(jí)引(yǐn)物(wù)鏈的延(yán)伸(shēn)是(shì)遵循(xún)鹼基配對(duì)原則的。聚合(hé)酶(méi)合成反應的(dí)忠實(shí)性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性(xìng)，使反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模板與(yǔ)引(yǐn)物的(dí)結合(復(fù)性)可以在較高(gāo)的(dí)溫度下進行，結合的特異性(xìng)大大(dà)增加，被(bèi)擴(kuò)增的(dí)靶基因片(piàn)段也就(jiù)能保持很高的正確度(dù)。再(zài)通過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特異(yì)性和保守性(xìng)高(gāo)的靶基(jī)因(yīn)區，其(qí)特異(yì)性程(chéng)度(dù)就(jiù)更高。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產物的(dí)生(shēng)成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始待測(cè)模板擴(kuò)增(zēng)到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從100萬個(gè)細胞(bāo)中檢出(chū)一個靶(bǎ)細(xì)胞；在(zài)病(bìng)毒的(dí)檢測(cè)中，PCR的(dí)靈(líng)敏度可(kě)達3個RFU(空(kōng)斑(bān)形(xíng)成單(dān)位)；在細菌學(xué)中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率(shuài)為3個細菌。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速
PCR反應用(yòng)耐高溫的Taq DNA聚合酶(méi)，一(yī)次(cì)性地將反應(yīng)液加好後(hòu)，即在DNA擴增(zēng)液和(hé)水浴(yù)鍋(guō)上進行(háng)變(biàn)性-退火-延(yán)伸(shēn)反(fǎn)應，一般在(zài)2～4 小時完(wán)成(chéng)擴增反應(yīng)。擴(kuò)增(zēng)產物(wù)一般用(yòng)電泳(yǒng)分(fēn)析，不(bù)一(yī)定(dìng)要用同位素，無放(fàng)射性汙(wū)染(rǎn)，易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標本(běn)的(dí)純度要求低
不需要分離(lí)病(bìng)毒或細(xì)菌及培(péi)養(yǎng)細胞，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及(jí)總RNA均(jūn)可(kě)作為(wéi)擴(kuò)增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可(kě)直接(jiē)用臨(lín)床標本(běn)如(rú)血液，體腔液，洗(xǐ)嗽液(yè)，毛(máo)發(fā)，細胞，活PCR技(jì)術(shù)概(gài)論。
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