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PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé)
商(shāng)品屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品名(míng)稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
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豬霍亂病(bìng)毒即PCR檢測試劑(jì)盒(hé) |
Hog Cholera Virus(CSFV)RTPCR |
YS-P014298 |
分(fēn)類：PCR檢測試劑(jì)盒
儲存(cún)條件(jiàn)：-20℃避光保存，避免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融。
運(yùn)輸(shū)：低溫，避光。
有效期：一(yī)年
貨期：現貨PCR試劑(jì)盒的有效(xiào)期一(yī)般為(wéi)1年，這是指(zhǐ)在適當的儲存溫(wēn)度下(xià)。核酸(suān)擴增(zēng)部(bù)分的(dí)試(shì)劑一般(bān)要(yào)貯存(cún)於-20℃下(xià)，產物檢測部分試劑(jì)則貯(zhù)存於2-8℃。盡量避免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
【結果(guǒ)分析(xī)條件設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定：將(jiāng)閾值綫設定在剛好超過(guò)正(zhèng)常(cháng)陰性(xìng)質控品擴(kuò)增曲(qū)綫(xiàn)的最高(gāo)點。
【質(zhì)控標(biāo)準】
2. 陽性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)的(dí)檢測結(jié)果(guǒ)應為(wéi)陽(yáng)性，有(yǒu)明(míng)顯的指數(shù)擴(kuò)增期(qī)，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於(yú)等(děng)於(yú)35；
3. 以上(shàng)要求需在(zài)一次(cì)實(shí)驗中(zhōng)同(tóng)時滿足，否(fǒu)則該(gāi)次(cì)實驗視為無效。
【結(jié)果判(pàn)斷】
2.可(kě)疑：有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本為可(kě)疑(yí)樣本(běn)；對(duì)於可疑樣本(běn)建(jiàn)議復核(hé)一次，若(ruò)復核(hé)結(jié)果(guǒ)Ct<40且有指數(shù)擴增期，則(zé)判(pàn)定為陽(yáng)性(xìng)，否則判(pàn)定(dìng)為陰性；
3. 陰(yīn)性：無指數(shù)擴增(zēng)期，Ct=40或無Ct值(zhí)均(jūn)判定為陰性樣(yàng)本。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果的(dí)解釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環境汙染(rǎn)，試(shì)劑汙染，樣品交叉(chā)汙(wū)染(rǎn)會出現(xiàn)假(jiǎ)陽性結果(guǒ)；
2. 試劑(jì)運輸(shū)，保(bǎo)存(cún)不當或試(shì)劑(jì)配製不(bù)準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起的(dí)試劑檢測(cè)效(xiào)能(néng)下降，可能(néng)會(huì)導致(zhì)出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陰性結果。
PCR反(fǎn)應的(dí)特異性：
②鹼基配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶基因的(dí)特異性(xìng)與保(bǎo)守性(xìng)。
豬霍(huò)亂病(bìng)毒即PCR檢測試(shì)劑盒(hé)其(qí)中引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的(dí)正確結(jié)合是關鍵。引物(wù)與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的結合及引(yǐn)物鏈(liàn)的延伸是遵循鹼基(jī)配對(duì)原(yuán)則的。聚合酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚合酶(méi)耐(nài)高溫性，使反應中(zhōng)模板與引(yǐn)物(wù)的(dí)結合(hé)(復性)可(kě)以在較(jiào)高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大(dà)大(dà)增加，被擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基因片段也(yě)就能保持(chí)很高(gāo)的(dí)正確度。再通(tōng)過(guò)選擇特(tè)異性和(hé)保守(shǒu)性(xìng)高的(dí)靶基(jī)因區，其(qí)特(tè)異性(xìng)程(chéng)度(dù)就(jiù)更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生(shēng)成量是(shì)以指數(shù)方(fāng)式增(zēng)加的，能將皮克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的起始(shǐ)待測模(mó)板(bǎn)擴增(zēng)到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一個靶(bǎ)細胞(bāo)；在(zài)病毒(dú)的(dí)檢測中(zhōng)，PCR的靈敏(mǐn)度可(kě)達3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學中zui小(xiǎo)檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速
PCR反應用耐(nài)高溫的Taq DNA聚合酶，一次(cì)性(xìng)地將反(fǎn)應液(yè)加(jiā)好後(hòu)，即在DNA擴(kuò)增(zēng)液和水浴鍋上(shàng)進(jìn)行變(biàn)性-退火-延伸反應(yīng)，一(yī)般在2～4 小(xiǎo)時完(wán)成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反應(yīng)。擴增(zēng)產物一般(bān)用(yòng)電(diàn)泳分析，不(bù)一定(dìng)要用(yòng)同(tóng)位(wèi)素(sù)，無放(fàng)射性(xìng)汙染，易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本(běn)的純度要(yào)求(qiú)低(dī)
不需(xū)要(yào)分(fēn)離病(bìng)毒(dú)或細(xì)菌及培養細(xì)胞，DNA 粗製品及(jí)總RNA均可(kě)作為(wéi)擴增模(mó)板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接用臨床(chuáng)標本如(rú)血液，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽液(yè)，毛發，細(xì)胞(bāo)，活(huó)PCR技(jì)術概論。
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