產品(pǐn)中心
PCR檢測試劑盒(hé)
商(shāng)品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產品名稱(chēng) | 英文名稱 | 貨號 |
|
無(wú)乳支原體PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒 |
Mycoplasma agalactiaePCR |
YS-P014470 |
分類：PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
儲存條件：-20℃避光保(bǎo)存(cún)，避(bì)免反(fǎn)復凍融。
運輸：低溫，避(bì)光。
有(yǒu)效(xiào)期(qī)：一年
貨(huò)期(qī)：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑(jì)盒的有效期(qī)一般為1年(nián)，這(zhè)是(shì)指(zhǐ)在(zài)適當的(dí)儲(chǔ)存(cún)溫度下(xià)。核酸擴(kuò)增部(bù)分的(dí)試(shì)劑一(yī)般要貯存(cún)於(yú)-20℃下，產物(wù)檢(jiǎn)測部(bù)分試劑(jì)則(zé)貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免(miǎn)反復凍(dòng)融(róng)。
【結果(guǒ)分析(xī)條件(jiàn)設定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾(yù)值綫設(shè)定(dìng)在剛好(hǎo)超(chāo)過正常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質控(kòng)品擴增曲綫(xiàn)的最高(gāo)點。
【質(zhì)控標(biāo)準】
2. 陽性質控品(pǐn)的檢測(cè)結果(guǒ)應為陽(yáng)性(xìng)，有(yǒu)明(míng)顯的(dí)指(zhǐ)數擴增(zēng)期，Ct值(zhí)應小於等(děng)於35；
3. 以上(shàng)要(yào)求(qiú)需(xū)在一次實驗中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿足，否則該(gāi)次實驗視為無效(xiào)。
【結果判斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴增期，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為可疑(yí)樣(yàng)本(běn)；對於可(kě)疑(yí)樣本建(jiàn)議(yì)復(fù)核一次(cì)，若(ruò)復(fù)核結果Ct<40且有(yǒu)指數擴增(zēng)期，則判(pàn)定(dìng)為陽(yáng)性，否則判定為陰(yīn)性；
3. 陰性：無指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值均判定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)樣本。
【對(duì)檢驗(yàn)結果的解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環境(jìng)汙染，試(shì)劑(jì)汙染，樣(yàng)品交叉汙(wū)染(rǎn)會出現假陽性結果(guǒ)；
2. 試劑運輸，保存(cún)不(bù)當(dāng)或試(shì)劑(jì)配製不(bù)準確引起的試(shì)劑(jì)檢測效(xiào)能下降，可能(néng)會(huì)導致(zhì)出現(xiàn)假(jiǎ)陰性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的特異(yì)性：
②鹼基配(pèi)對原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶(méi)合(hé)成反應(yīng)的(dí)忠實(shí)性；
④靶(bǎ)基因的特異性(xìng)與(yǔ)保守性(xìng)。
無(wú)乳支原(yuán)體(tǐ)PCR檢測試(shì)劑(jì)盒其(qí)中引物與模板的(dí)正(zhèng)確結合是關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的結合及(jí)引物(wù)鏈的延伸是(shì)遵(zūn)循鹼基(jī)配(pèi)對原則的(dí)。聚合(hé)酶(méi)合成反(fǎn)應的(dí)忠實性(xìng)及Taq DNA聚合酶耐高(gāo)溫性，使反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模板(bǎn)與引物的(dí)結(jié)合(復性(xìng))可以(yǐ)在(zài)較高的(dí)溫度(dù)下進(jìn)行，結合(hé)的特異性大(dà)大增(zēng)加，被(bèi)擴增的(dí)靶(bǎ)基因片段(duàn)也就能(néng)保(bǎo)持(chí)很高的(dí)正(zhèng)確度。再通過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特異(yì)性和(hé)保守(shǒu)性高(gāo)的靶(bǎ)基(jī)因區，其特異(yì)性程度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產(chǎn)物的生成(chéng)量是以指數方式(shì)增(zēng)加的，能(néng)將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的起(qǐ)始待(dài)測模板擴增到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能(néng)從100萬(wàn)個細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出一(yī)個靶細胞；在(zài)病(bìng)毒的檢測(cè)中，PCR的靈敏(mǐn)度(dù)可達(dá)3個RFU(空斑(bān)形成(chéng)單位(wèi))；在(zài)細菌(jūn)學(xué)中zui小(xiǎo)檢出率為3個(gè)細菌。
(3) 簡便，快速
PCR反應用耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚合(hé)酶，一(yī)次性地將反應(yīng)液加好(hǎo)後(hòu)，即在DNA擴增液和(hé)水浴鍋上進行(háng)變(biàn)性-退(tuì)火(huǒ)-延伸反(fǎn)應，一般在2～4 小(xiǎo)時完(wán)成擴增反應(yīng)。擴(kuò)增(zēng)產物(wù)一(yī)般用(yòng)電泳分(fēn)析(xī)，不(bù)一定要用同(tóng)位素，無(wú)放射(shè)性汙染(rǎn)，易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本(běn)的純度要求低
不需要(yào)分離(lí)病(bìng)毒或(huò)細菌(jūn)及(jí)培(péi)養細(xì)胞，DNA 粗製品(pǐn)及(jí)總RNA均可(kě)作為擴增(zēng)模(mó)板。可(kě)直接用(yòng)臨床標本如血液(yè)，體(tǐ)腔液，洗(xǐ)嗽液，毛發，細胞，活(huó)PCR技術(shù)概(gài)論(lùn)。
- 上一條(tiáo)：精(jīng)氨酸支原體(tǐ)PCR檢測試(shì)劑盒
- 下一條(tiáo)：蟾(chán)分(fēn)枝杆(gān)菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒
