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PCR檢測(cè)試劑盒
商(shāng)品屬性(xìng)
| 產品名稱 | 規格 | 貨號 |
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誌賀(hè)菌(jūn)ipaH 基因(yīn)(bp)常(cháng)規PCR檢測試(shì)劑(jì)盒 |
50T |
YS-P015324 |
儲(chǔ)存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光保(bǎo)存，避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
運(yùn)輸：低(dī)溫，避光。
有效(xiào)期：一年
貨期(qī)：現貨PCR試(shì)劑(jì)盒(hé)的有效期(qī)一般(bān)為(wéi)1年，這(zhè)是(shì)指(zhǐ)在適當的儲存溫度(dù)下(xià)。核(hé)酸擴增部分(fēn)的試劑一般(bān)要貯(zhù)存(cún)於-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測部分試(shì)劑(jì)則(zé)貯存(cún)於2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
【結(jié)果(guǒ)分(fēn)析(xī)條件設(shè)定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設(shè)定(dìng)：將(jiāng)閾(yù)值(zhí)綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在(zài)剛好(hǎo)超過(guò)正常陰性質控品擴增曲(qū)綫(xiàn)的最高點(diǎn)。
【質(zhì)控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽性質控(kòng)品(pǐn)的(dí)檢測結果(guǒ)應為(wéi)陽性，有明(míng)顯的指數擴增(zēng)期(qī)，Ct值(zhí)應小(xiǎo)於(yú)等於35；
3. 以上(shàng)要求(qiú)需(xū)在一(yī)次實驗(yàn)中(zhōng)同(tóng)時滿足，否(fǒu)則該(gāi)次實驗視為(wéi)無效。
【結果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有明顯的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣(yàng)本(běn)為可(kě)疑樣(yàng)本；對於(yú)可疑(yí)樣(yàng)本(běn)建議(yì)復核(hé)一(yī)次(cì)，若復核結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指數(shù)擴增(zēng)期，則判定為陽(yáng)性，否(fǒu)則(zé)判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或(huò)無Ct值均判定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)樣本(běn)。
【對(duì)檢驗(yàn)結果的解釋】
1. 實驗室環境(jìng)汙(wū)染(rǎn)，試劑汙(wū)染(rǎn)，樣品交叉汙染(rǎn)會出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性(xìng)結果；
2. 試劑(jì)運輸，保(bǎo)存(cún)不當或試劑(jì)配製(zhì)不(bù)準確引起(qǐ)的試劑檢(jiǎn)測(cè)效能(néng)下(xià)降(jiàng)，可能(néng)會導致(zhì)出現假陰性結(jié)果。
PCR反應的特異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶(bǎ)基因的特(tè)異性與保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)。
誌賀菌ipaH 基(jī)因(yīn)(bp)常規PCR檢(jiǎn)測試劑盒其(qí)中引物與(yǔ)模板(bǎn)的(dí)正確結合(hé)是關(guān)鍵。引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板的(dí)結(jié)合及(jí)引物鏈(liàn)的(dí)延伸是遵(zūn)循鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則的。聚(jù)合(hé)酶(méi)合(hé)成反應的忠實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高溫(wēn)性，使(shǐ)反應中模板(bǎn)與引(yǐn)物(wù)的(dí)結合(復性)可(kě)以在較高的溫度(dù)下進行(háng)，結合的(dí)特異性大(dà)大增加(jiā)，被擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶基因(yīn)片(piàn)段(duàn)也(yě)就(jiù)能保持(chí)很高的(dí)正確(què)度。再通(tōng)過選(xuǎn)擇特異性(xìng)和(hé)保(bǎo)守性(xìng)高的(dí)靶基(jī)因(yīn)區(qū)，其特異性(xìng)程度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產(chǎn)物的(dí)生(shēng)成量是以(yǐ)指(zhǐ)數方式增加(jiā)的，能將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級的起始(shǐ)待(dài)測模(mó)板擴(kuò)增到微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細胞中檢(jiǎn)出一(yī)個靶(bǎ)細胞；在(zài)病毒(dú)的(dí)檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形(xíng)成單(dān)位)；在細菌學中zui小檢出率(shuài)為3個細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快(kuài)速
PCR反應用(yòng)耐(nài)高(gāo)溫的Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一次性(xìng)地將反應(yīng)液加(jiā)好後(hòu)，即在DNA擴(kuò)增液(yè)和水浴鍋(guō)上(shàng)進行(háng)變性-退火(huǒ)-延(yán)伸(shēn)反應，一(yī)般在(zài)2～4 小(xiǎo)時完(wán)成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反應(yīng)。擴(kuò)增(zēng)產(chǎn)物一般用電泳(yǒng)分(fēn)析，不一(yī)定要用同位素，無放(fàng)射性(xìng)汙染，易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本(běn)的純度要(yào)求低
不(bù)需(xū)要(yào)分離病(bìng)毒或細菌(jūn)及培(péi)養細(xì)胞，DNA 粗製(zhì)品及總RNA均可(kě)作為(wéi)擴增(zēng)模板(bǎn)。可(kě)直接(jiē)用臨床(chuáng)標(biāo)本(běn)如血液，體(tǐ)腔液，洗嗽液，毛(máo)發，細胞(bāo)，活PCR技術概(gài)論。
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