產(chǎn)品中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
商品屬性
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 英(yīng)文(wén)名(míng)稱(chēng) | 貨(huò)號 |
|
眼蜱通用(yòng)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒 |
Hyaloma spp.PCR |
YS-P014320 |
分類：PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)
儲(chǔ)存(cún)條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光保存(cún)，避免反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
運(yùn)輸：低(dī)溫，避光。
有效期：一(yī)年
貨(huò)期(qī)：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑(jì)盒的有(yǒu)效(xiào)期(qī)一(yī)般為(wéi)1年，這是(shì)指在適當的儲存(cún)溫(wēn)度(dù)下(xià)。核(hé)酸擴增部分的(dí)試(shì)劑(jì)一般(bān)要貯存於-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測部分試(shì)劑(jì)則貯存(cún)於2-8℃。盡量避免反復凍融。
【結(jié)果(guǒ)分析(xī)條件(jiàn)設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設定：將閾值(zhí)綫設定在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過(guò)正常陰性(xìng)質控品(pǐn)擴增曲綫(xiàn)的(dí)最高點(diǎn)。
【質(zhì)控標準】
2. 陽(yáng)性質控(kòng)品的(dí)檢(jiǎn)測結(jié)果(guǒ)應為陽性(xìng)，有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct值應小於(yú)等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要求需在一(yī)次(cì)實(shí)驗(yàn)中(zhōng)同時滿(mǎn)足，否則該次實驗視(shì)為無效。
【結(jié)果判(pàn)斷】
2.可疑(yí)：有明顯(xiǎn)的指數擴增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本為(wéi)可(kě)疑樣本；對於(yú)可疑樣本建(jiàn)議復(fù)核一(yī)次(cì)，若(ruò)復核(hé)結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數擴增期(qī)，則(zé)判定為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，否則(zé)判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指數擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或無Ct值均判定(dìng)為陰性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢驗結果的解釋(shì)】
1. 實驗室環境(jìng)汙(wū)染(rǎn)，試劑汙染，樣品(pǐn)交叉汙染會出現(xiàn)假陽(yáng)性(xìng)結果；
2. 試(shì)劑(jì)運輸，保存不(bù)當或試劑配製不(bù)準確(què)引(yǐn)起(qǐ)的試劑檢測(cè)效能下降，可能會導致出(chū)現(xiàn)假陰性(xìng)結(jié)果(guǒ)。
PCR反應的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對(duì)原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反應的(dí)忠實性；
④靶(bǎ)基(jī)因的特異(yì)性與保(bǎo)守(shǒu)性。
眼蜱通(tōng)用PCR檢(jiǎn)測試劑盒其(qí)中引(yǐn)物與(yǔ)模板的正確(què)結(jié)合是關鍵。引(yǐn)物與(yǔ)模板的結(jié)合及引(yǐn)物鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸是遵循(xún)鹼基配(pèi)對原(yuán)則的(dí)。聚(jù)合(hé)酶合成(chéng)反應的(dí)忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶耐高(gāo)溫(wēn)性，使反應(yīng)中(zhōng)模板(bǎn)與(yǔ)引物的結(jié)合(hé)(復(fù)性(xìng))可以(yǐ)在(zài)較高的溫度(dù)下進行，結(jié)合(hé)的特異性大(dà)大增(zēng)加(jiā)，被(bèi)擴(kuò)增的靶基因片段(duàn)也就(jiù)能(néng)保持(chí)很高的正確(què)度。再(zài)通(tōng)過選擇特異性(xìng)和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基(jī)因(yīn)區(qū)，其特(tè)異(yì)性(xìng)程(chéng)度就更高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度(dù)高
PCR產物的(dí)生(shēng)成(chéng)量是以指(zhǐ)數方式(shì)增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始待測模板擴增(zēng)到微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細胞中檢(jiǎn)出一(yī)個(gè)靶細(xì)胞；在病毒(dú)的檢測中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度(dù)可達3個RFU(空斑形成單位(wèi))；在細菌學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率(shuài)為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快(kuài)速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用(yòng)耐高溫的Taq DNA聚(jù)合酶，一(yī)次性地(dì)將(jiāng)反應液加好後，即在DNA擴增液(yè)和水(shuǐ)浴鍋上進行變(biàn)性-退火(huǒ)-延伸(shēn)反應，一(yī)般(bān)在2～4 小時完成(chéng)擴增反應。擴增(zēng)產(chǎn)物(wù)一(yī)般(bān)用電(diàn)泳分析，不一定要(yào)用同位素(sù)，無放(fàng)射性(xìng)汙染(rǎn)，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對標本的純度要(yào)求(qiú)低
不(bù)需要(yào)分離(lí)病毒(dú)或(huò)細(xì)菌及(jí)培(péi)養(yǎng)細胞，DNA 粗製品(pǐn)及總RNA均可作(zuò)為擴增模(mó)板(bǎn)。可直接用臨床標(biāo)本如血(xiě)液，體腔(qiāng)液，洗嗽(sòu)液，毛發(fā)，細胞(bāo)，活PCR技術(shù)概(gài)論(lùn)。
