產(chǎn)品中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒
商(shāng)品屬性(xìng)
| 產品(pǐn)名稱 | 英(yīng)文名稱 | 貨號(hào) |
|
傳染(rǎn)性脾腎壞死病病毒(dú)PCR檢測試(shì)劑盒 |
Infectious Spleen and Kidney Necrosis Virus(ISKNV )PCR |
YS-P014334 |
分類：PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)
儲(chǔ)存(cún)條件：-20℃避光保(bǎo)存(cún)，避免反復(fù)凍融。
運輸：低溫(wēn)，避(bì)光。
有(yǒu)效(xiào)期(qī)：一年(nián)
貨期：現貨(huò)PCR試劑盒的有(yǒu)效期一(yī)般(bān)為1年(nián)，這(zhè)是(shì)指在適當的儲(chǔ)存(cún)溫度下(xià)。核酸擴(kuò)增部分的試劑一(yī)般要(yào)貯(zhù)存(cún)於-20℃下，產物檢測(cè)部分試劑則貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避免反(fǎn)復凍(dòng)融。
【結(jié)果分(fēn)析條(tiáo)件(jiàn)設定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定：將閾值(zhí)綫設(shè)定(dìng)在剛好超過正常(cháng)陰性質控(kòng)品擴增(zēng)曲綫的最高點。
【質(zhì)控標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)的(dí)檢測(cè)結(jié)果(guǒ)應為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，有(yǒu)明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，Ct值應小於等(děng)於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要求(qiú)需在一(yī)次(cì)實驗(yàn)中同時(shí)滿足，否則該次(cì)實驗(yàn)視為(wéi)無效。
【結果判斷】
2.可疑(yí)：有明顯的指數擴(kuò)增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本(běn)為(wéi)可疑樣本(běn)；對(duì)於可(kě)疑樣(yàng)本建議復核一(yī)次，若(ruò)復(fù)核結果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數擴增(zēng)期，則(zé)判定(dìng)為(wéi)陽性，否則判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性；
3. 陰性(xìng)：無指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct=40或無Ct值(zhí)均判定(dìng)為陰(yīn)性樣(yàng)本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果的(dí)解釋(shì)】
1. 實(shí)驗室環(huán)境汙染，試(shì)劑(jì)汙染，樣品交叉汙(wū)染會出現(xiàn)假陽性(xìng)結果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運輸，保存(cún)不當或(huò)試(shì)劑配製不準確(què)引(yǐn)起(qǐ)的試劑檢測效能(néng)下降(jiàng)，可能會導(dǎo)致出(chū)現假(jiǎ)陰(yīn)性(xìng)結(jié)果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的(dí)特(tè)異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成反應的(dí)忠實性(xìng)；
④靶基因的特異性與保守性。
傳染(rǎn)性脾腎(shèn)壞死(sǐ)病病(bìng)毒PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒其(qí)中引(yǐn)物與(yǔ)模板的(dí)正(zhèng)確結合(hé)是(shì)關鍵(jiàn)。引(yǐn)物(wù)與模板(bǎn)的(dí)結合及引物(wù)鏈(liàn)的(dí)延伸是遵循鹼基配(pèi)對原(yuán)則(zé)的。聚(jù)合(hé)酶(méi)合成反(fǎn)應的忠實性及Taq DNA聚合酶(méi)耐高溫(wēn)性(xìng)，使(shǐ)反應中(zhōng)模板與引(yǐn)物(wù)的結(jié)合(hé)(復性)可(kě)以在(zài)較高(gāo)的溫(wēn)度(dù)下進(jìn)行(háng)，結(jié)合的(dí)特(tè)異性大(dà)大(dà)增(zēng)加，被(bèi)擴增(zēng)的(dí)靶基因片段(duàn)也就(jiù)能(néng)保持(chí)很高的正確度。再通過選擇(zé)特(tè)異(yì)性(xìng)和(hé)保守性(xìng)高(gāo)的靶基因區(qū)，其(qí)特(tè)異(yì)性程(chéng)度就更高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高
PCR產物(wù)的生(shēng)成(chéng)量是以指(zhǐ)數(shù)方式(shì)增加(jiā)的，能將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級的(dí)起始待(dài)測模(mó)板(bǎn)擴增到(dào)微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從(cóng)100萬個(gè)細胞中檢(jiǎn)出(chū)一個靶(bǎ)細胞；在病(bìng)毒的檢測中，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可(kě)達3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成(chéng)單(dān)位(wèi))；在(zài)細菌學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出(chū)率(shuài)為3個細菌。
(3) 簡便，快(kuài)速
PCR反應(yīng)用耐高溫的(dí)Taq DNA聚合酶(méi)，一次(cì)性地將(jiāng)反應液加(jiā)好後，即在(zài)DNA擴增液(yè)和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延(yán)伸反(fǎn)應，一(yī)般(bān)在2～4 小時完(wán)成擴增反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增(zēng)產物(wù)一般用(yòng)電(diàn)泳分析，不(bù)一定要用(yòng)同位(wèi)素，無(wú)放射性(xìng)汙染，易推(tuī)廣。
(4) 對標(biāo)本的純(chún)度(dù)要求低(dī)
不(bù)需(xū)要(yào)分離病(bìng)毒或(huò)細(xì)菌及(jí)培養(yǎng)細胞，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可作為擴增模(mó)板。可(kě)直(zhí)接用臨床標(biāo)本(běn)如血(xiě)液，體(tǐ)腔液(yè)，洗嗽液(yè)，毛(máo)發(fā)，細胞(bāo)，活(huó)PCR技(jì)術概(gài)論(lùn)。
