產(chǎn)品中心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
商品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產品(pǐn)名稱 | 英文名(míng)稱 | 貨(huò)號(hào) |
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甲型流(liú)感病毒(dú)亞型(xíng)PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒 |
Influenza Virus AM2RTPCR |
YS-P014335 |
分類：PCR檢測(cè)試劑盒
儲存(cún)條件：-20℃避(bì)光保存(cún)，避(bì)免反(fǎn)復凍(dòng)融。
運輸：低(dī)溫(wēn)，避光。
有(yǒu)效期(qī)：一年(nián)
貨期：現(xiàn)貨(huò)PCR試(shì)劑盒(hé)的(dí)有效期一般為(wéi)1年，這是指(zhǐ)在適當的儲(chǔ)存(cún)溫(wēn)度(dù)下。核(hé)酸(suān)擴增部分的(dí)試劑一(yī)般要貯存於-20℃下，產物檢(jiǎn)測(cè)部(bù)分試劑則(zé)貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡量(liáng)避免反復凍融。
【結果(guǒ)分析(xī)條件(jiàn)設定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾值綫(xiàn)設定在(zài)剛好超過正常(cháng)陰性質(zhì)控品擴(kuò)增(zēng)曲綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高點。
【質控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)的檢測結果(guǒ)應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性，有明(míng)顯的指數擴增期(qī)，Ct值應(yīng)小於(yú)等(děng)於35；
3. 以上(shàng)要(yào)求(qiú)需在一(yī)次(cì)實驗中同時滿足(zú)，否(fǒu)則(zé)該(gāi)次(cì)實(shí)驗視為無(wú)效(xiào)。
【結果判(pàn)斷】
2.可(kě)疑：有(yǒu)明顯的指數擴(kuò)增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣本為(wéi)可疑樣本；對於(yú)可疑樣本(běn)建議(yì)復核一次，若(ruò)復核(hé)結(jié)果Ct<40且(qiě)有指數(shù)擴增期，則判定為陽性，否則(zé)判定為陰(yīn)性；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指數擴增期(qī)，Ct=40或無Ct值(zhí)均(jūn)判(pàn)定為陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本。
【對檢(jiǎn)驗結果的解釋】
1. 實(shí)驗室(shì)環境(jìng)汙染(rǎn)，試劑(jì)汙(wū)染(rǎn)，樣(yàng)品(pǐn)交(jiāo)叉汙染會出現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑運輸(shū)，保(bǎo)存不(bù)當(dāng)或(huò)試劑(jì)配製不準(zhǔn)確引起(qǐ)的試劑(jì)檢測效(xiào)能下降(jiàng)，可(kě)能會導(dǎo)致(zhì)出現假(jiǎ)陰(yīn)性(xìng)結果。
PCR反(fǎn)應(yīng)的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原則；
③Taq DNA聚(jù)合酶合成反應的忠(zhōng)實(shí)性(xìng)；
④靶(bǎ)基(jī)因(yīn)的特(tè)異性(xìng)與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)。
甲型流感病(bìng)毒亞型PCR檢測(cè)試劑(jì)盒其(qí)中引物與(yǔ)模(mó)板的(dí)正(zhèng)確結(jié)合是(shì)關(guān)鍵(jiàn)。引物與模(mó)板的結合及引(yǐn)物鏈(liàn)的延伸是(shì)遵循鹼(jiǎn)基(jī)配對原則(zé)的。聚合酶(méi)合(hé)成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠實性及(jí)Taq DNA聚合酶耐(nài)高(gāo)溫性(xìng)，使(shǐ)反(fǎn)應中模板(bǎn)與引物的結合(復(fù)性(xìng))可以在較高的(dí)溫(wēn)度下進行，結(jié)合(hé)的(dí)特(tè)異性大大增加，被(bèi)擴(kuò)增(zēng)的靶基因(yīn)片段(duàn)也(yě)就(jiù)能保持(chí)很高(gāo)的正確(què)度(dù)。再通過(guò)選(xuǎn)擇特異(yì)性和保守(shǒu)性高的靶(bǎ)基因(yīn)區，其(qí)特異(yì)性(xìng)程(chéng)度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產物的(dí)生成量是以指數(shù)方式增加的，能將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測(cè)模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到(dào)微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從100萬個細胞(bāo)中檢(jiǎn)出一個靶細胞；在病(bìng)毒的檢(jiǎn)測(cè)中，PCR的靈敏(mǐn)度(dù)可達3個(gè)RFU(空斑形成單(dān)位)；在(zài)細菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出率(shuài)為(wéi)3個細(xì)菌。
(3) 簡便，快(kuài)速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐(nài)高溫的Taq DNA聚合酶，一(yī)次性(xìng)地將反(fǎn)應液加(jiā)好後，即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增液和(hé)水(shuǐ)浴鍋(guō)上進(jìn)行(háng)變性-退火-延伸反(fǎn)應(yīng)，一般在2～4 小(xiǎo)時(shí)完成擴增反應(yīng)。擴(kuò)增(zēng)產(chǎn)物(wù)一(yī)般用電泳分析，不一(yī)定(dìng)要用(yòng)同位素，無放射(shè)性汙染，易推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標(biāo)本(běn)的純(chún)度要求低(dī)
不(bù)需要(yào)分(fēn)離(lí)病毒或(huò)細(xì)菌及培(péi)養細胞，DNA 粗製品(pǐn)及(jí)總RNA均可作為擴(kuò)增模(mó)板(bǎn)。可直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨(lín)床(chuáng)標本(běn)如血(xiě)液，體腔液，洗嗽液(yè)，毛發，細(xì)胞，活PCR技(jì)術概論。
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