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PCR檢測試劑盒(hé)
商品屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱(chēng) | 英(yīng)文(wén)名稱 | 貨號 |
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七星(xīng)庫(kù)道蟲(chóng)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒 |
Kudoa septempunctataPCR |
YS-P014355 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
儲存條件(jiàn)：-20℃避光保(bǎo)存(cún)，避免(miǎn)反復凍(dòng)融。
運(yùn)輸(shū)：低溫，避光(guāng)。
有效期(qī)：一(yī)年
貨(huò)期(qī)：現貨(huò)PCR試(shì)劑盒的有效期一(yī)般為1年，這是(shì)指(zhǐ)在適(shì)當的儲(chǔ)存(cún)溫(wēn)度(dù)下。核酸擴(kuò)增部(bù)分(fēn)的試(shì)劑一般要(yào)貯(zhù)存於-20℃下，產物檢測部分(fēn)試(shì)劑(jì)則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡量避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
【結(jié)果分(fēn)析條件設(shè)定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設定：將閾(yù)值(zhí)綫設(shè)定在剛好(hǎo)超過正(zhèng)常陰性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增曲(qū)綫的最高點。
【質控(kòng)標準】
2. 陽性(xìng)質控品的檢(jiǎn)測(cè)結果應(yīng)為陽性(xìng)，有(yǒu)明顯的指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期(qī)，Ct值應小於(yú)等於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求需(xū)在(zài)一次實驗中同(tóng)時滿足(zú)，否則該次實驗視(shì)為無(wú)效(xiào)。
【結(jié)果判(pàn)斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指數擴增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣本為可(kě)疑樣(yàng)本；對於(yú)可疑(yí)樣(yàng)本(běn)建議復(fù)核(hé)一次，若復(fù)核結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期(qī)，則判定為陽(yáng)性(xìng)，否(fǒu)則(zé)判定為(wéi)陰(yīn)性；
3. 陰性：無指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或無Ct值均判定(dìng)為陰性樣(yàng)本(běn)。
【對檢驗結(jié)果的解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室(shì)環(huán)境汙(wū)染(rǎn)，試劑汙(wū)染，樣(yàng)品(pǐn)交(jiāo)叉(chā)汙染會出現假陽(yáng)性結果；
2. 試劑運(yùn)輸，保(bǎo)存不(bù)當(dāng)或試劑(jì)配(pèi)製不準(zhǔn)確(què)引起的(dí)試劑檢測(cè)效(xiào)能下降(jiàng)，可能(néng)會導致出(chū)現假陰性(xìng)結(jié)果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應(yīng)的特異(yì)性：
②鹼基(jī)配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成(chéng)反應的忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶基因的(dí)特異(yì)性與保守性。
七(qī)星(xīng)庫(kù)道(dào)蟲(chóng)PCR檢測試劑盒(hé)其中(zhōng)引物(wù)與模板的正(zhèng)確結(jié)合(hé)是關鍵。引(yǐn)物與(yǔ)模板(bǎn)的(dí)結合(hé)及引物鏈的延(yán)伸(shēn)是(shì)遵(zūn)循鹼基配對原則(zé)的(dí)。聚(jù)合酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐高溫性(xìng)，使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中模(mó)板(bǎn)與(yǔ)引物(wù)的結合(復(fù)性)可以在較(jiào)高的溫度(dù)下進(jìn)行，結合(hé)的特異性(xìng)大(dà)大(dà)增(zēng)加，被擴(kuò)增的(dí)靶(bǎ)基因片段也就(jiù)能(néng)保持很高的正確度。再通過選擇(zé)特異(yì)性(xìng)和保守(shǒu)性高的靶(bǎ)基因(yīn)區(qū)，其特異性程(chéng)度就(jiù)更高。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物的生成(chéng)量(liáng)是(shì)以(yǐ)指數方式增加(jiā)的，能將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的起(qǐ)始待測模(mó)板(bǎn)擴增(zēng)到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一(yī)個靶細(xì)胞；在病毒的(dí)檢(jiǎn)測(cè)中，PCR的(dí)靈(líng)敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成(chéng)單位)；在細菌(jūn)學中zui小檢出(chū)率為(wéi)3個(gè)細菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一(yī)次(cì)性(xìng)地(dì)將反應液(yè)加好(hǎo)後，即在DNA擴(kuò)增(zēng)液和(hé)水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上進(jìn)行變(biàn)性-退火-延伸反應，一(yī)般在2～4 小時完成(chéng)擴增反應。擴(kuò)增產物一般(bān)用電泳分析(xī)，不(bù)一定要用同位素，無放射(shè)性汙(wū)染(rǎn)，易(yì)推廣。
(4) 對標本的純(chún)度要求低
不(bù)需要分離病(bìng)毒(dú)或細菌(jūn)及培養細胞，DNA 粗製品(pǐn)及(jí)總(zǒng)RNA均(jūn)可(kě)作(zuò)為擴增模板。可(kě)直接(jiē)用(yòng)臨床標(biāo)本如血(xiě)液(yè)，體腔(qiāng)液(yè)，洗嗽(sòu)液，毛發(fā)，細(xì)胞(bāo)，活(huó)PCR技術(shù)概論(lùn)。
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