產品中(zhōng)心
PCR檢測試劑盒
商品屬性(xìng)
| 產品名(míng)稱(chēng) | 英文(wén)名稱 | 貨(huò)號 |
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卡薩(sà)諾爾森林(lín)病(bìng)病(bìng)毒PCR檢測試劑(jì)盒 |
Kyasanur Forest Disease Virus(KFDV)RTPCR |
YS-P014356 |
分類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測試劑盒
儲存條件(jiàn)：-20℃避光保(bǎo)存，避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍融(róng)。
運輸：低(dī)溫(wēn)，避光。
有效期：一年(nián)
貨(huò)期：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑盒的有效(xiào)期(qī)一般(bān)為1年，這是(shì)指(zhǐ)在(zài)適(shì)當的儲存(cún)溫度(dù)下(xià)。核酸(suān)擴增部(bù)分的試(shì)劑一般要貯存於-20℃下(xià)，產物(wù)檢(jiǎn)測部(bù)分試(shì)劑(jì)則(zé)貯存(cún)於2-8℃。盡量避(bì)免反復(fù)凍融。
【結(jié)果(guǒ)分析(xī)條件(jiàn)設定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將閾(yù)值綫設定(dìng)在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超過正常陰性質控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增曲(qū)綫(xiàn)的最(zuì)高點。
【質(zhì)控標準(zhǔn)】
2. 陽性質控(kòng)品(pǐn)的檢(jiǎn)測結(jié)果(guǒ)應(yīng)為陽性(xìng)，有明顯的指數擴增期，Ct值(zhí)應小於(yú)等於(yú)35；
3. 以上要(yào)求(qiú)需(xū)在一次(cì)實(shí)驗(yàn)中(zhōng)同時滿足(zú)，否則(zé)該次實驗(yàn)視為無效。
【結(jié)果(guǒ)判斷】
2.可(kě)疑：有明顯的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增期，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣本為可(kě)疑(yí)樣本(běn)；對(duì)於(yú)可疑樣(yàng)本建議(yì)復核一次，若復核結果(guǒ)Ct<40且有指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，則判定為(wéi)陽性，否(fǒu)則判定為陰性；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無(wú)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均(jūn)判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性樣(yàng)本。
【對檢驗(yàn)結果(guǒ)的(dí)解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗室環境汙染，試劑汙(wū)染，樣品交叉(chā)汙染會出現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性(xìng)結果；
2. 試劑運(yùn)輸，保(bǎo)存不(bù)當(dāng)或(huò)試(shì)劑(jì)配(pèi)製不(bù)準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試(shì)劑檢測效能(néng)下降，可能會導(dǎo)致出(chū)現假陰(yīn)性結(jié)果。
PCR反應的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)：
②鹼基(jī)配對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚合酶(méi)合成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性；
④靶基(jī)因(yīn)的特異性與(yǔ)保守性(xìng)。
卡(qiǎ)薩諾爾森林(lín)病(bìng)病毒PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒其(qí)中引(yǐn)物與模(mó)板(bǎn)的(dí)正(zhèng)確結合(hé)是關(guān)鍵。引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的結合及(jí)引物鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸(shēn)是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼(jiǎn)基(jī)配對原則(zé)的。聚合酶合(hé)成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性，使反(fǎn)應(yīng)中模板(bǎn)與引(yǐn)物(wù)的(dí)結合(hé)(復性)可以在較高(gāo)的(dí)溫度下(xià)進行(háng)，結合的(dí)特異(yì)性(xìng)大大(dà)增加，被擴(kuò)增的靶基因(yīn)片段也(yě)就能保持很高(gāo)的(dí)正確度。再通過選(xuǎn)擇(zé)特異(yì)性和(hé)保守性高(gāo)的靶基(jī)因(yīn)區，其(qí)特異性程度就更(gēng)高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生(shēng)成量是以指數方式(shì)增(zēng)加(jiā)的(dí)，能將皮克(kè)(pg=10-12g)量級的起始(shǐ)待測模板(bǎn)擴增(zēng)到微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從100萬個(gè)細胞中(zhōng)檢出(chū)一個靶(bǎ)細胞；在病毒的檢測中，PCR的(dí)靈(líng)敏度可達(dá)3個RFU(空斑形(xíng)成(chéng)單位)；在細菌學中zui小檢出(chū)率為3個細菌(jūn)。
(3) 簡便，快速
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐高溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一次性(xìng)地將(jiāng)反(fǎn)應液加好後，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行(háng)變性-退火(huǒ)-延伸反(fǎn)應(yīng)，一般在(zài)2～4 小(xiǎo)時(shí)完成擴增反應。擴(kuò)增產物一般用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析，不一(yī)定(dìng)要(yào)用同位素(sù)，無放射性汙(wū)染(rǎn)，易(yì)推廣。
(4) 對標本(běn)的純(chún)度要(yào)求低(dī)
不需要分(fēn)離病(bìng)毒或細菌(jūn)及(jí)培養細胞，DNA 粗製品及總(zǒng)RNA均可作(zuò)為擴(kuò)增(zēng)模(mó)板。可(kě)直接用(yòng)臨床標本(běn)如(rú)血(xiě)液(yè)，體(tǐ)腔(qiāng)液(yè)，洗嗽液(yè)，毛發，細胞，活PCR技術(shù)概(gài)論。
