產品中(zhōng)心
PCR檢測試(shì)劑盒(hé)
商(shāng)品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品名(míng)稱 | 英(yīng)文(wén)名(míng)稱 | 貨號 |
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乳酸杆菌屬通(tōng)用(yòng)PCR檢測試(shì)劑盒(hé) |
Lactococcus spp. PCR |
YS-P014359 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測試劑盒
儲(chǔ)存(cún)條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避(bì)光(guāng)保存，避免反復(fù)凍(dòng)融。
運(yùn)輸：低溫，避光。
有(yǒu)效期：一年
貨期：現貨PCR試(shì)劑盒的有效期一(yī)般為1年(nián)，這是(shì)指(zhǐ)在(zài)適當的(dí)儲存溫度下。核酸(suān)擴增部(bù)分的試劑一(yī)般要貯存(cún)於(yú)-20℃下，產物(wù)檢(jiǎn)測部分(fēn)試劑(jì)則(zé)貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融(róng)。
【結果分析(xī)條(tiáo)件(jiàn)設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將閾值(zhí)綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在(zài)剛好超過正(zhèng)常(cháng)陰性質控品擴(kuò)增(zēng)曲綫(xiàn)的最高點。
【質(zhì)控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)的檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果應為陽(yáng)性，有明顯的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，Ct值應(yīng)小於(yú)等(děng)於35；
3. 以上要求(qiú)需在一次(cì)實驗(yàn)中同時(shí)滿(mǎn)足(zú)，否(fǒu)則(zé)該次實驗(yàn)視(shì)為(wéi)無效。
【結果判斷】
2.可(kě)疑(yí)：有明顯(xiǎn)的指數(shù)擴增期，且38≤Ct<40，此時樣本(běn)為可疑樣本；對於可疑樣(yàng)本(běn)建議(yì)復核(hé)一(yī)次，若(ruò)復核(hé)結(jié)果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數擴增期，則(zé)判(pàn)定為陽性，否則判定為陰性；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無(wú)指數(shù)擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性樣(yàng)本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結果的解釋】
1. 實驗室環境汙(wū)染(rǎn)，試劑汙染，樣(yàng)品交叉汙(wū)染(rǎn)會(huì)出現假(jiǎ)陽性(xìng)結果；
2. 試(shì)劑(jì)運(yùn)輸，保存(cún)不(bù)當或試劑配(pèi)製不(bù)準確引起(qǐ)的(dí)試劑檢測效(xiào)能下(xià)降，可能(néng)會導致出現假陰性(xìng)結果。
PCR反應的(dí)特異性：
②鹼基配對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實性；
④靶基因(yīn)的特異性與保(bǎo)守(shǒu)性。
乳(rǔ)酸(suān)杆菌(jūn)屬(shǔ)通(tōng)用PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)其(qí)中引(yǐn)物與(yǔ)模板的(dí)正確(què)結合是關鍵。引(yǐn)物與模板(bǎn)的結合(hé)及引(yǐn)物鏈(liàn)的(dí)延伸(shēn)是遵(zūn)循鹼基配對(duì)原則的。聚合(hé)酶合成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐(nài)高溫(wēn)性，使反應中模(mó)板(bǎn)與(yǔ)引物(wù)的(dí)結合(hé)(復性(xìng))可以在(zài)較(jiào)高的溫度下進行，結(jié)合(hé)的(dí)特(tè)異(yì)性大(dà)大增加(jiā)，被擴(kuò)增的靶基因片(piàn)段(duàn)也就(jiù)能保持(chí)很高的(dí)正(zhèng)確度。再通過(guò)選擇(zé)特異性(xìng)和保(bǎo)守性高的靶(bǎ)基(jī)因(yīn)區，其特異性(xìng)程(chéng)度就(jiù)更高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高
PCR產(chǎn)物的生(shēng)成量是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數方(fāng)式(shì)增加的，能將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測(cè)模板(bǎn)擴增到微克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從100萬個(gè)細胞中檢(jiǎn)出(chū)一個靶(bǎ)細(xì)胞；在病毒(dú)的(dí)檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成單位)；在(zài)細(xì)菌學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率(shuài)為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡便，快速
PCR反應用耐高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶，一次性(xìng)地將(jiāng)反(fǎn)應液加(jiā)好(hǎo)後，即(jí)在DNA擴增液和(hé)水浴鍋(guō)上進(jìn)行變性(xìng)-退(tuì)火-延(yán)伸反應(yīng)，一(yī)般(bān)在2～4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成(chéng)擴增(zēng)反應(yīng)。擴增產(chǎn)物(wù)一般用(yòng)電泳分(fēn)析，不一(yī)定要用同位素，無(wú)放射性汙染，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本的(dí)純(chún)度要求(qiú)低
不(bù)需要(yào)分離病(bìng)毒(dú)或細菌(jūn)及(jí)培養細胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及(jí)總(zǒng)RNA均可作(zuò)為擴(kuò)增模(mó)板(bǎn)。可(kě)直接(jiē)用(yòng)臨(lín)床標本如血液，體(tǐ)腔(qiāng)液(yè)，洗嗽液，毛(máo)發(fā)，細胞，活PCR技(jì)術概(gài)論。
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