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PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒
| 產品名稱 | 英(yīng)文名稱(chēng) | 貨(huò)號(hào) |
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拉蒂諾(nuò)病毒(dú)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒 |
Latino virus(LATV)RTPCR |
YS-P014361 |
分(fēn)類:PCR檢測試(shì)劑盒(hé)
儲存條件:-20℃避(bì)光(guāng)保存,避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
運(yùn)輸:低(dī)溫,避光(guāng)。
有(yǒu)效期:一年
貨期:現(xiàn)貨(huò)PCR試劑盒的有效(xiào)期一般(bān)為1年(nián),這是指(zhǐ)在(zài)適當的儲存(cún)溫度(dù)下。核酸擴增部分的試(shì)劑(jì)一(yī)般(bān)要貯存於-20℃下,產(chǎn)物檢測(cè)部分試劑(jì)則(zé)貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量避免反復凍融(róng)。
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定:將(jiāng)閾值綫設定在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超過正常陰性質控品(pǐn)擴增曲綫(xiàn)的最高(gāo)點(diǎn)。
2. 陽性質(zhì)控品(pǐn)的檢測結(jié)果(guǒ)應為陽性(xìng),有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指數擴增期(qī),Ct值應小於等於35;
3. 以上要(yào)求(qiú)需(xū)在(zài)一次實驗中同時滿足(zú),否則該次實(shí)驗視(shì)為無效(xiào)。
2.可(kě)疑:有(yǒu)明(míng)顯的指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期(qī),且(qiě)38≤Ct<40,此時樣本(běn)為(wéi)可疑(yí)樣(yàng)本(běn);對(duì)於可(kě)疑樣本(běn)建議復(fù)核一(yī)次,若復核(hé)結果Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī),則(zé)判定為(wéi)陽性(xìng),否(fǒu)則(zé)判定為(wéi)陰(yīn)性;
3. 陰性:無(wú)指數擴增期,Ct=40或無Ct值(zhí)均判定(dìng)為陰(yīn)性樣本(běn)。
【對檢驗結(jié)果(guǒ)的解釋】
1. 實驗室(shì)環境(jìng)汙染(rǎn),試(shì)劑(jì)汙(wū)染(rǎn),樣品(pǐn)交叉汙(wū)染會出(chū)現假(jiǎ)陽性結果;
2. 試劑運輸,保(bǎo)存不當或試(shì)劑(jì)配製不準確(què)引起(qǐ)的試劑檢測效能下降,可(kě)能會(huì)導致(zhì)出現(xiàn)假陰性(xìng)結(jié)果。
②鹼基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性;
④靶基因(yīn)的特異(yì)性(xìng)與保守性。
拉蒂諾(nuò)病毒PCR檢測試劑盒其(qí)中引(yǐn)物與模板的正(zhèng)確(què)結(jié)合是關鍵。引物(wù)與模(mó)板的結(jié)合及引(yǐn)物(wù)鏈的延伸是遵(zūn)循鹼基(jī)配對(duì)原則的。聚合酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫(wēn)性,使反應中(zhōng)模板(bǎn)與引物的結合(復(fù)性(xìng))可以在較(jiào)高的溫度下進行(háng),結(jié)合(hé)的特異性大(dà)大增(zēng)加,被擴(kuò)增的(dí)靶(bǎ)基(jī)因片段也(yě)就(jiù)能(néng)保(bǎo)持(chí)很(hěn)高(gāo)的(dí)正(zhèng)確度。再通過選(xuǎn)擇(zé)特異(yì)性和保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)高的靶基因(yīn)區(qū),其(qí)特(tè)異性(xìng)程(chéng)度就更高。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產物(wù)的生(shēng)成量是以指數(shù)方式增加的,能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級的起始待(dài)測模板(bǎn)擴(kuò)增到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬(wàn)個細胞中檢(jiǎn)出(chū)一個(gè)靶細胞;在(zài)病(bìng)毒(dú)的檢(jiǎn)測中,PCR的靈敏度(dù)可達3個RFU(空斑(bān)形成單位);在細菌學中zui小檢(jiǎn)出(chū)率(shuài)為(wéi)3個(gè)細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便,快速(sù)
PCR反應用耐高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi),一次性地將(jiāng)反應液(yè)加(jiā)好後,即在(zài)DNA擴(kuò)增(zēng)液和水浴鍋(guō)上(shàng)進行變(biàn)性(xìng)-退火-延伸反應,一般在(zài)2~4 小時完(wán)成擴(kuò)增(zēng)反應。擴增產(chǎn)物一般(bān)用(yòng)電(diàn)泳分析(xī),不一定(dìng)要用(yòng)同(tóng)位素,無(wú)放(fàng)射性(xìng)汙染(rǎn),易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本(běn)的純(chún)度要(yào)求(qiú)低(dī)
不需要(yào)分(fēn)離(lí)病毒(dú)或細菌(jūn)及培養(yǎng)細胞,DNA 粗(cū)製(zhì)品及(jí)總(zǒng)RNA均可作為(wéi)擴(kuò)增(zēng)模板(bǎn)。可直(zhí)接用臨床標本如血液,體腔(qiāng)液,洗嗽(sòu)液,毛發,細胞(bāo),活PCR技術概論(lùn)。
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