產品中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒
商品(pǐn)屬性(xìng)
| 產品名稱 | 英文(wén)名稱(chēng) | 貨號 |
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問(wèn)號鉤(gōu)端(duān)螺旋體(tǐ)PCR檢測試劑(jì)盒 |
Leptospira interrogansPCR |
YS-P014373 |
分類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒
儲存條(tiáo)件：-20℃避(bì)光(guāng)保(bǎo)存，避(bì)免反復凍融。
運輸：低溫，避光(guāng)。
有(yǒu)效期：一年
貨期：現貨(huò)PCR試(shì)劑盒的(dí)有效(xiào)期一(yī)般為(wéi)1年(nián)，這是(shì)指在適(shì)當的(dí)儲(chǔ)存溫(wēn)度下。核(hé)酸擴增部分(fēn)的(dí)試(shì)劑一般要貯存於-20℃下，產物檢(jiǎn)測(cè)部(bù)分試劑則貯(zhù)存於2-8℃。盡量(liáng)避免(miǎn)反復(fù)凍融(róng)。
【結果分析(xī)條件設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾值綫設定(dìng)在剛(gāng)好(hǎo)超過(guò)正常陰(yīn)性質控品(pǐn)擴(kuò)增曲綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高點。
【質控標(biāo)準】
2. 陽性質(zhì)控(kòng)品的檢(jiǎn)測(cè)結果應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性，有明顯的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期，Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於(yú)等於(yú)35；
3. 以上(shàng)要(yào)求(qiú)需在(zài)一次實(shí)驗(yàn)中(zhōng)同時滿足，否(fǒu)則該次實驗視為無(wú)效。
【結果判斷】
2.可疑(yí)：有明(míng)顯的指數(shù)擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時樣本(běn)為可疑樣本；對於可(kě)疑(yí)樣(yàng)本建議(yì)復(fù)核(hé)一次，若復(fù)核結(jié)果Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，則判(pàn)定為陽(yáng)性，否(fǒu)則判定(dìng)為陰性；
3. 陰(yīn)性：無指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或無Ct值(zhí)均(jūn)判定(dìng)為(wéi)陰性樣本。
【對檢驗結(jié)果的(dí)解釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室(shì)環(huán)境(jìng)汙(wū)染，試劑(jì)汙(wū)染(rǎn)，樣品交叉汙(wū)染會(huì)出現假(jiǎ)陽(yáng)性結果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸，保(bǎo)存不當或(huò)試劑配製不準(zhǔn)確引(yǐn)起的試劑檢測效能(néng)下降(jiàng)，可能會(huì)導致(zhì)出現(xiàn)假陰(yīn)性結果。
PCR反應(yīng)的(dí)特(tè)異性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原則；
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合成反(fǎn)應的忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶基(jī)因的特(tè)異性與(yǔ)保(bǎo)守性(xìng)。
問號鉤端(duān)螺旋(xuán)體PCR檢測(cè)試劑盒其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物與(yǔ)模(mó)板的(dí)正確結合是(shì)關鍵。引物與模板的結合(hé)及引(yǐn)物鏈的(dí)延伸是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原則(zé)的。聚(jù)合(hé)酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應的(dí)忠實性及Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高溫(wēn)性(xìng)，使反應中(zhōng)模(mó)板(bǎn)與引物(wù)的結(jié)合(hé)(復性(xìng))可以在較高的溫度下(xià)進行，結(jié)合(hé)的(dí)特(tè)異(yì)性大大(dà)增加，被擴(kuò)增(zēng)的靶(bǎ)基(jī)因片段也就能保(bǎo)持(chí)很高(gāo)的(dí)正確(què)度(dù)。再(zài)通(tōng)過(guò)選擇(zé)特異性(xìng)和保守性(xìng)高的(dí)靶(bǎ)基因區(qū)，其特異(yì)性程度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產(chǎn)物(wù)的生成量(liáng)是以指數方(fāng)式增(zēng)加的(dí)，能將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測(cè)模(mó)板擴(kuò)增到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從100萬個細胞中檢(jiǎn)出一(yī)個靶細胞；在病毒(dú)的(dí)檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可達3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形(xíng)成(chéng)單位(wèi))；在細菌(jūn)學(xué)中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速
PCR反應用(yòng)耐高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合酶，一(yī)次(cì)性(xìng)地將反應(yīng)液(yè)加(jiā)好後(hòu)，即在DNA擴增液和(hé)水浴(yù)鍋(guō)上進(jìn)行變性-退火-延(yán)伸反(fǎn)應(yīng)，一般在2～4 小時完成(chéng)擴增反應(yīng)。擴增(zēng)產(chǎn)物一般用(yòng)電泳分析(xī)，不(bù)一(yī)定(dìng)要用(yòng)同(tóng)位素，無放射(shè)性汙染(rǎn)，易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本(běn)的純(chún)度要(yào)求(qiú)低
不需要(yào)分(fēn)離病(bìng)毒或(huò)細菌及培養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製品及總(zǒng)RNA均(jūn)可(kě)作(zuò)為擴增(zēng)模板。可直接用(yòng)臨床標本如血液，體腔液，洗嗽液，毛發，細(xì)胞，活PCR技(jì)術概(gài)論。
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