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PCR檢測試(shì)劑盒
| 產品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 英文名稱 | 貨號(hào) |
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犬巨球(qiú)菌PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒 |
Macrococcus canisPCR |
YS-P014390 |
分(fēn)類:PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
儲(chǔ)存條件(jiàn):-20℃避光保(bǎo)存,避(bì)免反復凍(dòng)融(róng)。
運輸(shū):低溫(wēn),避光(guāng)。
有(yǒu)效(xiào)期:一年(nián)
貨期:現(xiàn)貨(huò)PCR試劑盒的(dí)有(yǒu)效期一般(bān)為(wéi)1年,這是(shì)指在適(shì)當(dāng)的(dí)儲存(cún)溫(wēn)度下。核酸擴增(zēng)部(bù)分的(dí)試(shì)劑(jì)一般(bān)要(yào)貯(zhù)存於(yú)-20℃下(xià),產(chǎn)物檢測部(bù)分(fēn)試劑(jì)則貯存於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免反(fǎn)復凍(dòng)融。
u 閾值(Threshold)設定(dìng):將(jiāng)閾值(zhí)綫(xiàn)設定(dìng)在剛好(hǎo)超(chāo)過正常陰性(xìng)質控品擴增曲(qū)綫的最(zuì)高(gāo)點(diǎn)。
2. 陽性(xìng)質控品的(dí)檢測(cè)結果應為(wéi)陽性(xìng),有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數擴增期,Ct值(zhí)應小於等於(yú)35;
3. 以上(shàng)要(yào)求(qiú)需(xū)在一次實(shí)驗(yàn)中(zhōng)同時(shí)滿足,否則該(gāi)次實驗視(shì)為無效。
2.可(kě)疑:有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期,且(qiě)38≤Ct<40,此時樣本(běn)為可疑(yí)樣(yàng)本(běn);對於可(kě)疑(yí)樣本建(jiàn)議(yì)復(fù)核一次(cì),若復(fù)核結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數擴增(zēng)期,則(zé)判定為(wéi)陽性,否(fǒu)則(zé)判定為陰性;
3. 陰(yīn)性:無(wú)指數擴增(zēng)期,Ct=40或無Ct值均(jūn)判定為(wéi)陰性樣本。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結果(guǒ)的(dí)解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環境(jìng)汙染(rǎn),試劑(jì)汙(wū)染(rǎn),樣品(pǐn)交叉汙(wū)染(rǎn)會(huì)出(chū)現(xiàn)假陽(yáng)性結果;
2. 試劑運輸(shū),保存(cún)不當或試(shì)劑配製(zhì)不準確(què)引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試劑檢測效能(néng)下降(jiàng),可能會導致(zhì)出現(xiàn)假陰(yīn)性結果。
②鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則;
③Taq DNA聚合酶(méi)合(hé)成反應的忠(zhōng)實性(xìng);
④靶(bǎ)基(jī)因的特(tè)異性與(yǔ)保守性。
犬巨(jù)球(qiú)菌(jūn)PCR檢測試劑(jì)盒其中引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板的正(zhèng)確(què)結(jié)合(hé)是關(guān)鍵。引物與(yǔ)模板的結(jié)合及引(yǐn)物鏈的(dí)延伸(shēn)是(shì)遵循鹼基(jī)配(pèi)對原則的。聚(jù)合(hé)酶(méi)合成反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實(shí)性及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶耐高溫性,使(shǐ)反應(yīng)中模(mó)板與引(yǐn)物的(dí)結(jié)合(hé)(復性)可(kě)以在較高的溫(wēn)度下進行,結(jié)合的特(tè)異性大(dà)大增加,被(bèi)擴增(zēng)的靶(bǎ)基因片段(duàn)也就能(néng)保持(chí)很(hěn)高的正確度(dù)。再通(tōng)過(guò)選(xuǎn)擇特(tè)異性(xìng)和保守性(xìng)高的(dí)靶基因區,其(qí)特異(yì)性程(chéng)度就更(gēng)高。
(2) 靈敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產物的生(shēng)成(chéng)量是以指(zhǐ)數(shù)方式增加的,能將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測模(mó)板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞(bāo)中(zhōng)檢出一個靶細胞;在病(bìng)毒的(dí)檢測中,PCR的(dí)靈敏度(dù)可達3個(gè)RFU(空斑形成單位(wèi));在細(xì)菌學(xué)中zui小檢(jiǎn)出率(shuài)為(wéi)3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn),快(kuài)速
PCR反應用耐高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚合酶,一(yī)次性(xìng)地(dì)將反(fǎn)應液(yè)加好(hǎo)後,即(jí)在DNA擴增(zēng)液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上進(jìn)行變性(xìng)-退火(huǒ)-延伸(shēn)反(fǎn)應,一般(bān)在(zài)2~4 小時完(wán)成擴增(zēng)反(fǎn)應。擴增(zēng)產(chǎn)物一般用電泳(yǒng)分析(xī),不一定(dìng)要(yào)用同位(wèi)素(sù),無(wú)放射性(xìng)汙染,易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本(běn)的純(chún)度(dù)要求低(dī)
不需(xū)要(yào)分(fēn)離病(bìng)毒或(huò)細(xì)菌及(jí)培養細胞(bāo),DNA 粗製品及總(zǒng)RNA均(jūn)可作為擴增模(mó)板。可直接(jiē)用臨床標本如血(xiě)液,體腔(qiāng)液(yè),洗(xǐ)嗽(sòu)液,毛發,細(xì)胞,活(huó)PCR技術(shù)概(gài)論。
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