產品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢測試劑盒(hé)
商品屬性
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱 | 英文(wén)名(míng)稱 | 貨號 |
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小(xiǎo)孢(bāo)子菌屬(shǔ)通用(yòng)PCR檢測試(shì)劑(jì)盒 |
Microsporum spp.PCR |
YS-P014419 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保(bǎo)存(cún)，避免反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸：低(dī)溫(wēn)，避光。
有效(xiào)期(qī)：一(yī)年(nián)
貨期(qī)：現貨PCR試劑(jì)盒的(dí)有效(xiào)期一(yī)般為1年(nián)，這是指(zhǐ)在適當(dāng)的儲(chǔ)存溫(wēn)度(dù)下(xià)。核酸擴增(zēng)部分(fēn)的(dí)試劑一般要(yào)貯(zhù)存(cún)於(yú)-20℃下(xià)，產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測部分(fēn)試(shì)劑(jì)則(zé)貯存(cún)於2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
【結(jié)果分(fēn)析條件設定】
u 閾值(Threshold)設定：將(jiāng)閾值(zhí)綫(xiàn)設定(dìng)在剛好超過正(zhèng)常陰性質(zhì)控品擴增曲綫的最(zuì)高(gāo)點。
【質控(kòng)標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質控品(pǐn)的檢(jiǎn)測結果(guǒ)應為陽(yáng)性(xìng)，有明顯(xiǎn)的指數擴增期，Ct值應小於等於35；
3. 以上要求需在一次實(shí)驗(yàn)中同(tóng)時(shí)滿足(zú)，否(fǒu)則該次實(shí)驗視為無(wú)效。
【結(jié)果判(pàn)斷】
2.可(kě)疑(yí)：有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本為(wéi)可(kě)疑樣(yàng)本；對(duì)於(yú)可(kě)疑(yí)樣(yàng)本建議復(fù)核一次，若復(fù)核結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指數擴增期(qī)，則(zé)判定為(wéi)陽性，否則判定(dìng)為陰性；
3. 陰(yīn)性：無指(zhǐ)數擴增期，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均(jūn)判定為陰性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢驗結果的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗(yàn)室環境汙染，試劑汙(wū)染，樣品交叉汙染(rǎn)會(huì)出現假(jiǎ)陽(yáng)性(xìng)結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑運輸，保存(cún)不當或(huò)試劑(jì)配製不準(zhǔn)確引(yǐn)起(qǐ)的試(shì)劑檢測效能(néng)下降，可能會導致(zhì)出現(xiàn)假陰(yīn)性結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應(yīng)的特(tè)異性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成(chéng)反(fǎn)應的忠(zhōng)實(shí)性；
④靶(bǎ)基(jī)因(yīn)的特(tè)異(yì)性與保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)。
小(xiǎo)孢(bāo)子菌屬通用PCR檢(jiǎn)測試劑盒其(qí)中引物與模(mó)板的正(zhèng)確結合(hé)是關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物與(yǔ)模板的結合(hé)及引物鏈的(dí)延伸是遵循鹼(jiǎn)基配對(duì)原(yuán)則(zé)的(dí)。聚合酶(méi)合(hé)成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性及Taq DNA聚(jù)合酶耐高(gāo)溫性，使(shǐ)反應(yīng)中(zhōng)模板(bǎn)與引物(wù)的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度(dù)下進行，結(jié)合的特異(yì)性(xìng)大大(dà)增加(jiā)，被(bèi)擴增的(dí)靶基(jī)因片段也就(jiù)能(néng)保持(chí)很(hěn)高的(dí)正(zhèng)確度。再通(tōng)過選擇特(tè)異性(xìng)和保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)高的靶基(jī)因區(qū)，其特(tè)異(yì)性(xìng)程(chéng)度就更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高
PCR產物的生成量是(shì)以指(zhǐ)數方(fāng)式增加的，能將皮(pí)克(pg=10-12g)量級的起始待(dài)測(cè)模(mó)板擴(kuò)增(zēng)到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從100萬個(gè)細(xì)胞(bāo)中(zhōng)檢出一個(gè)靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑(bān)形成單位(wèi))；在細菌學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率(shuài)為3個細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速
PCR反應(yīng)用耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚合酶(méi)，一次性(xìng)地將(jiāng)反應液加(jiā)好後，即在(zài)DNA擴增(zēng)液和(hé)水浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進(jìn)行(háng)變(biàn)性-退(tuì)火-延伸反應，一般(bān)在(zài)2～4 小(xiǎo)時(shí)完成擴增反(fǎn)應。擴增(zēng)產物一般(bān)用(yòng)電泳分(fēn)析，不(bù)一(yī)定要用(yòng)同(tóng)位素(sù)，無(wú)放射(shè)性(xìng)汙染，易推(tuī)廣。
(4) 對標(biāo)本(běn)的純(chún)度要(yào)求低
不(bù)需要分離病毒(dú)或細菌(jūn)及培(péi)養細(xì)胞，DNA 粗(cū)製(zhì)品(pǐn)及總RNA均可作為擴(kuò)增模板(bǎn)。可直接用臨(lín)床(chuáng)標本(běn)如(rú)血液(yè)，體(tǐ)腔液，洗嗽液(yè)，毛發(fā)，細胞(bāo)，活PCR技(jì)術(shù)概論。
