產品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢測(cè)試(shì)劑盒
商品(pǐn)屬性
| 產(chǎn)品名(míng)稱(chēng) | 英文名(míng)稱 | 貨號 |
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偶發分枝杆菌PCR檢測試劑(jì)盒(hé) |
Mycobacterium fortuitumPCR |
YS-P014454 |
分(fēn)類：PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)
儲(chǔ)存(cún)條件：-20℃避光保(bǎo)存，避免(miǎn)反復凍(dòng)融。
運輸(shū)：低(dī)溫(wēn)，避(bì)光。
有效(xiào)期：一年
貨期：現(xiàn)貨(huò)PCR試(shì)劑(jì)盒的有效期一般為(wéi)1年，這是(shì)指(zhǐ)在適當的儲存(cún)溫(wēn)度下。核酸擴(kuò)增部(bù)分(fēn)的(dí)試(shì)劑一般要(yào)貯存(cún)於-20℃下，產物檢(jiǎn)測(cè)部分試劑(jì)則貯存於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融。
【結果分析條(tiáo)件設定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設定：將閾值綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在剛好超(chāo)過(guò)正常陰性質控品擴增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最高(gāo)點(diǎn)。
【質(zhì)控標準(zhǔn)】
2. 陽性質控(kòng)品的檢測(cè)結果應為(wéi)陽(yáng)性，有明顯的指數擴增期(qī)，Ct值應小(xiǎo)於等(děng)於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求需在(zài)一(yī)次(cì)實(shí)驗(yàn)中同時(shí)滿足，否則該次實驗視(shì)為無效(xiào)。
【結果判斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有明顯的指數擴(kuò)增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本(běn)為(wéi)可疑樣(yàng)本(běn)；對於可疑樣(yàng)本建(jiàn)議復核一次(cì)，若(ruò)復核結(jié)果Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數(shù)擴增期，則(zé)判(pàn)定為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，否則(zé)判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指數擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或無Ct值(zhí)均判定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)樣本(běn)。
【對檢驗(yàn)結(jié)果的(dí)解釋(shì)】
1. 實(shí)驗室(shì)環(huán)境汙染，試劑汙(wū)染(rǎn)，樣(yàng)品(pǐn)交叉(chā)汙(wū)染會出(chū)現(xiàn)假陽性(xìng)結果(guǒ)；
2. 試劑運輸，保存不(bù)當或試劑配(pèi)製(zhì)不準(zhǔn)確引起的(dí)試(shì)劑檢測效(xiào)能(néng)下降，可能(néng)會(huì)導致(zhì)出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陰(yīn)性結果。
PCR反(fǎn)應的特異性(xìng)：
②鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反應的忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶基(jī)因的特異(yì)性(xìng)與(yǔ)保(bǎo)守性。
偶發分枝杆菌PCR檢(jiǎn)測試劑盒其(qí)中引(yǐn)物與(yǔ)模板的正確(què)結合是(shì)關(guān)鍵。引物(wù)與(yǔ)模板的(dí)結(jié)合及(jí)引物鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸(shēn)是遵(zūn)循鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原(yuán)則的。聚(jù)合酶合成反應的忠實性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高(gāo)溫(wēn)性，使反應中模板(bǎn)與引物的(dí)結(jié)合(復(fù)性)可以(yǐ)在較高的溫(wēn)度下(xià)進行(háng)，結合的特異(yì)性(xìng)大(dà)大增加(jiā)，被(bèi)擴(kuò)增的靶(bǎ)基因(yīn)片(piàn)段(duàn)也(yě)就能保持(chí)很高(gāo)的(dí)正確(què)度。再(zài)通過選(xuǎn)擇特異(yì)性(xìng)和保(bǎo)守性(xìng)高的靶(bǎ)基因(yīn)區(qū)，其(qí)特(tè)異(yì)性(xìng)程度就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生(shēng)成(chéng)量是以(yǐ)指數方(fāng)式增加的，能(néng)將皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬個細胞(bāo)中(zhōng)檢出一個(gè)靶細胞；在(zài)病毒的(dí)檢測中，PCR的靈(líng)敏度(dù)可(kě)達3個RFU(空(kōng)斑(bān)形成(chéng)單(dān)位(wèi))；在(zài)細菌(jūn)學中zui小檢(jiǎn)出率為3個(gè)細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快速
PCR反(fǎn)應用耐(nài)高溫的(dí)Taq DNA聚合酶，一(yī)次性(xìng)地將(jiāng)反(fǎn)應液(yè)加好(hǎo)後(hòu)，即在DNA擴增液(yè)和水(shuǐ)浴鍋(guō)上進行變(biàn)性(xìng)-退(tuì)火-延伸反應，一般(bān)在2～4 小時(shí)完(wán)成擴(kuò)增反(fǎn)應。擴增(zēng)產(chǎn)物(wù)一(yī)般用電泳分析，不一(yī)定要用(yòng)同位(wèi)素(sù)，無放射性汙染(rǎn)，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本(běn)的(dí)純(chún)度(dù)要(yào)求低(dī)
不需(xū)要(yào)分(fēn)離(lí)病毒或細菌及(jí)培養細胞，DNA 粗(cū)製品及總(zǒng)RNA均(jūn)可(kě)作(zuò)為(wéi)擴增模(mó)板。可(kě)直(zhí)接用臨床標本如血液(yè)，體(tǐ)腔液，洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè)，毛(máo)發(fā)，細(xì)胞(bāo)，活PCR技(jì)術(shù)概論。
