產品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé)
| 產品(pǐn)名(míng)稱 | 英(yīng)文(wén)名(míng)稱 | 貨號 |
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人(rén)分枝杆菌PCR檢測試劑盒 |
Mycobacterium hominisPCR |
YS-P014455 |
分類(lèi):PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)
儲(chǔ)存條件(jiàn):-20℃避光保(bǎo)存(cún),避免(miǎn)反復(fù)凍融。
運輸:低(dī)溫(wēn),避(bì)光。
有(yǒu)效期:一年(nián)
貨(huò)期:現貨PCR試劑盒的有(yǒu)效期(qī)一(yī)般(bān)為1年(nián),這是(shì)指(zhǐ)在(zài)適(shì)當(dāng)的儲存溫度(dù)下。核(hé)酸擴增部(bù)分(fēn)的試(shì)劑一般要(yào)貯存於-20℃下(xià),產物(wù)檢(jiǎn)測部(bù)分(fēn)試劑(jì)則貯存於(yú)2-8℃。盡量避免反復凍(dòng)融。
u 閾(yù)值(Threshold)設定:將閾值(zhí)綫設定在剛(gāng)好(hǎo)超過正常陰(yīn)性質(zhì)控品(pǐn)擴增(zēng)曲(qū)綫的最高(gāo)點。
2. 陽性質控(kòng)品的檢測結果(guǒ)應為陽(yáng)性(xìng),有明顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī),Ct值應小(xiǎo)於(yú)等(děng)於(yú)35;
3. 以上要(yào)求需在一次實(shí)驗中同(tóng)時(shí)滿足,否(fǒu)則該次實驗視為無(wú)效(xiào)。
2.可疑(yí):有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數擴增(zēng)期,且(qiě)38≤Ct<40,此時(shí)樣(yàng)本為可(kě)疑樣本;對(duì)於可疑樣本(běn)建議復(fù)核一(yī)次,若(ruò)復核(hé)結果Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期,則判定(dìng)為陽性(xìng),否則(zé)判定為陰(yīn)性;
3. 陰性(xìng):無(wú)指數擴增期(qī),Ct=40或無Ct值(zhí)均(jūn)判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性樣本。
【對檢驗結(jié)果的解釋】
1. 實(shí)驗室(shì)環(huán)境(jìng)汙染(rǎn),試劑(jì)汙染,樣品(pǐn)交(jiāo)叉汙染會(huì)出現假陽性結果;
2. 試(shì)劑(jì)運輸(shū),保存(cún)不(bù)當或(huò)試(shì)劑配製不準確(què)引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試劑檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能下降,可(kě)能(néng)會(huì)導致出(chū)現假陰(yīn)性結果(guǒ)。
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原(yuán)則(zé);
③Taq DNA聚合酶合(hé)成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性;
④靶基(jī)因的特(tè)異(yì)性(xìng)與保(bǎo)守性(xìng)。
人分枝杆菌PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé)其中(zhōng)引(yǐn)物與模板的(dí)正確(què)結合是(shì)關鍵。引物與(yǔ)模板的(dí)結合(hé)及(jí)引(yǐn)物(wù)鏈(liàn)的延(yán)伸(shēn)是(shì)遵(zūn)循鹼(jiǎn)基(jī)配對原則(zé)的(dí)。聚合(hé)酶合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實(shí)性及Taq DNA聚合(hé)酶耐(nài)高溫性,使反應中模板與(yǔ)引物(wù)的結合(hé)(復(fù)性(xìng))可(kě)以(yǐ)在較高的溫(wēn)度(dù)下進(jìn)行,結合(hé)的特(tè)異性大大增加,被擴增(zēng)的(dí)靶基因(yīn)片(piàn)段(duàn)也(yě)就能保持(chí)很高的(dí)正(zhèng)確度。再通過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特異(yì)性(xìng)和保守性(xìng)高的靶基(jī)因區(qū),其(qí)特異(yì)性(xìng)程度(dù)就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高(gāo)
PCR產物(wù)的生(shēng)成量(liáng)是以指(zhǐ)數方式(shì)增加(jiā)的,能將皮(pí)克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起(qǐ)始待測模板擴(kuò)增(zēng)到(dào)微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從(cóng)100萬個細胞中(zhōng)檢出一個靶(bǎ)細胞;在病(bìng)毒(dú)的(dí)檢測(cè)中,PCR的靈敏度(dù)可達3個(gè)RFU(空斑形成(chéng)單(dān)位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢(jiǎn)出率為3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便,快(kuài)速
PCR反應(yīng)用(yòng)耐高溫(wēn)的Taq DNA聚合酶,一次性(xìng)地(dì)將反應液加好(hǎo)後(hòu),即(jí)在(zài)DNA擴增液和(hé)水浴鍋上(shàng)進(jìn)行變性-退火-延伸反(fǎn)應(yīng),一般(bān)在2~4 小(xiǎo)時完成擴(kuò)增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳(yǒng)分(fēn)析,不(bù)一(yī)定要(yào)用(yòng)同(tóng)位(wèi)素,無(wú)放(fàng)射(shè)性汙染,易推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的純度(dù)要(yào)求低(dī)
不需要(yào)分離病(bìng)毒或(huò)細(xì)菌及(jí)培養細胞(bāo),DNA 粗製(zhì)品及總RNA均可作為(wéi)擴(kuò)增(zēng)模板。可(kě)直(zhí)接用臨床標本如血液(yè),體(tǐ)腔(qiāng)液(yè),洗嗽(sòu)液,毛發(fā),細胞(bāo),活(huó)PCR技術(shù)概論。
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