產品(pǐn)中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測試劑盒
商品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱 | 英文名稱(chēng) | 貨號 |
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瘰(luǒ)癧(lì)分支杆菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒 |
Mycobacterium scrofulaceumPCR |
YS-P014463 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測試(shì)劑盒(hé)
儲存條件：-20℃避(bì)光保存，避(bì)免反(fǎn)復凍融。
運輸(shū)：低(dī)溫，避光。
有效期(qī)：一(yī)年
貨期(qī)：現貨(huò)PCR試劑(jì)盒的(dí)有效(xiào)期一般(bān)為(wéi)1年，這(zhè)是(shì)指在(zài)適當的(dí)儲存溫度下。核酸(suān)擴增部分的試劑一般(bān)要貯存於(yú)-20℃下，產物(wù)檢測部(bù)分試劑則貯存於2-8℃。盡量避免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
【結(jié)果(guǒ)分析(xī)條件設(shè)定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將(jiāng)閾值綫設(shè)定(dìng)在(zài)剛好超(chāo)過正常陰(yīn)性(xìng)質(zhì)控品擴增曲綫的(dí)最(zuì)高點。
【質控標準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質控品的檢(jiǎn)測結果應(yīng)為陽性，有明顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴增期，Ct值(zhí)應小(xiǎo)於等(děng)於(yú)35；
3. 以上要(yào)求(qiú)需(xū)在一次實驗中(zhōng)同時(shí)滿足，否則(zé)該次(cì)實驗視(shì)為無效。
【結果判斷】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數(shù)擴增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣本為(wéi)可(kě)疑樣本；對(duì)於可(kě)疑樣(yàng)本建議復核(hé)一(yī)次(cì)，若復核(hé)結果(guǒ)Ct<40且有指數擴增期，則(zé)判(pàn)定為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，否則(zé)判定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性：無指數擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或無Ct值(zhí)均判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性樣本。
【對檢驗結(jié)果的(dí)解釋】
1. 實驗室環境汙(wū)染，試劑(jì)汙(wū)染，樣品(pǐn)交叉(chā)汙染會出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性結果；
2. 試劑運輸，保存不(bù)當(dāng)或試(shì)劑配製(zhì)不準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起的(dí)試(shì)劑檢測效能(néng)下(xià)降，可(kě)能(néng)會導致(zhì)出(chū)現假陰性(xìng)結果。
PCR反(fǎn)應(yīng)的特(tè)異(yì)性(xìng)：
②鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶(méi)合成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實(shí)性；
④靶基因的特異(yì)性(xìng)與保(bǎo)守性。
瘰(luǒ)癧分(fēn)支(zhī)杆(gān)菌PCR檢測(cè)試劑盒(hé)其中引(yǐn)物與(yǔ)模板的(dí)正確結合(hé)是關(guān)鍵(jiàn)。引物(wù)與(yǔ)模板的結合及引(yǐn)物鏈的延伸(shēn)是遵(zūn)循(xún)鹼基(jī)配對(duì)原則的(dí)。聚(jù)合(hé)酶合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的忠實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶耐高溫(wēn)性，使反(fǎn)應中(zhōng)模(mó)板與(yǔ)引物的結(jié)合(hé)(復(fù)性(xìng))可以(yǐ)在較高的(dí)溫(wēn)度(dù)下進(jìn)行(háng)，結合(hé)的(dí)特異(yì)性大(dà)大(dà)增加(jiā)，被(bèi)擴增(zēng)的靶(bǎ)基(jī)因片段也就能(néng)保(bǎo)持(chí)很高的(dí)正確(què)度。再(zài)通過選(xuǎn)擇特(tè)異性(xìng)和(hé)保守性高的靶(bǎ)基因(yīn)區，其(qí)特(tè)異性程度就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈敏度高
PCR產物(wù)的生成(chéng)量是(shì)以指數方(fāng)式增(zēng)加(jiā)的(dí)，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級的起始待測(cè)模(mó)板擴(kuò)增到(dào)微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬個細(xì)胞(bāo)中(zhōng)檢出一(yī)個(gè)靶(bǎ)細胞(bāo)；在病毒的檢測(cè)中，PCR的靈敏度(dù)可(kě)達(dá)3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成單位(wèi))；在細菌學(xué)中zui小檢(jiǎn)出率為(wéi)3個細菌。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速
PCR反應(yīng)用耐高溫(wēn)的Taq DNA聚合酶，一次性(xìng)地將反應(yīng)液加(jiā)好後，即(jí)在DNA擴增液和(hé)水(shuǐ)浴鍋上(shàng)進(jìn)行(háng)變性(xìng)-退(tuì)火-延伸(shēn)反應(yīng)，一般在2～4 小(xiǎo)時(shí)完成(chéng)擴(kuò)增反應(yīng)。擴增(zēng)產物(wù)一(yī)般用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分析，不(bù)一定(dìng)要(yào)用同(tóng)位(wèi)素，無放射(shè)性(xìng)汙染(rǎn)，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本(běn)的純(chún)度要求低(dī)
不需要分(fēn)離(lí)病(bìng)毒(dú)或細菌(jūn)及培養細(xì)胞，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及(jí)總(zǒng)RNA均可作為擴增模板。可直(zhí)接(jiē)用臨床標本(běn)如血液，體(tǐ)腔(qiāng)液(yè)，洗嗽(sòu)液(yè)，毛(máo)發(fā)，細胞，活(huó)PCR技術概論。
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