產品中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
商(shāng)品(pǐn)屬性
| 產品名(míng)稱(chēng) | 英文(wén)名(míng)稱(chēng) | 貨號 |
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蟾(chán)分枝(zhī)杆(gān)菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒 |
Mycobacterium xenopiPCR |
YS-P014469 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒
儲(chǔ)存(cún)條件(jiàn)：-20℃避(bì)光保存，避(bì)免(miǎn)反復凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸(shū)：低溫(wēn)，避光(guāng)。
有效(xiào)期(qī)：一(yī)年(nián)
貨(huò)期：現(xiàn)貨PCR試劑(jì)盒的有效期(qī)一(yī)般(bān)為1年，這是(shì)指(zhǐ)在適當(dāng)的儲存(cún)溫(wēn)度下。核酸(suān)擴(kuò)增(zēng)部分的試(shì)劑(jì)一(yī)般要貯存(cún)於(yú)-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢測部(bù)分試(shì)劑則貯存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免反(fǎn)復凍融。
【結果(guǒ)分析條(tiáo)件(jiàn)設(shè)定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將閾(yù)值綫(xiàn)設(shè)定在剛好超過正(zhèng)常陰性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)擴增曲綫(xiàn)的最(zuì)高點(diǎn)。
【質控(kòng)標準】
2. 陽(yáng)性質控品的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結果(guǒ)應為陽(yáng)性，有明顯(xiǎn)的指數擴增期，Ct值應小於等於(yú)35；
3. 以上要求(qiú)需(xū)在一次實(shí)驗中同時滿足(zú)，否則(zé)該(gāi)次實驗視為無效。
【結(jié)果判(pàn)斷】
2.可(kě)疑：有(yǒu)明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本為可疑樣本(běn)；對於(yú)可疑樣(yàng)本建議復(fù)核一次(cì)，若復核結果Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，則判定(dìng)為陽(yáng)性，否(fǒu)則判定為(wéi)陰性；
3. 陰性：無(wú)指數擴增期(qī)，Ct=40或無Ct值均判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)樣本(běn)。
【對(duì)檢驗結果的解釋】
1. 實驗室環境(jìng)汙染，試(shì)劑(jì)汙(wū)染(rǎn)，樣品(pǐn)交叉(chā)汙染會出(chū)現假陽性(xìng)結果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運輸，保存(cún)不當(dāng)或試(shì)劑配(pèi)製不(bù)準(zhǔn)確引起(qǐ)的試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效能(néng)下(xià)降(jiàng)，可能會導(dǎo)致(zhì)出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陰性結果。
PCR反(fǎn)應的特異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合(hé)成(chéng)反應的(dí)忠實性(xìng)；
④靶(bǎ)基(jī)因的特異性與保(bǎo)守(shǒu)性。
蟾分(fēn)枝杆(gān)菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé)其中引(yǐn)物與模(mó)板的(dí)正確(què)結合(hé)是(shì)關鍵。引物與模板的(dí)結合及引(yǐn)物(wù)鏈的延(yán)伸是遵(zūn)循(xún)鹼(jiǎn)基(jī)配對原則的(dí)。聚(jù)合(hé)酶合(hé)成反(fǎn)應的(dí)忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶耐(nài)高溫性，使反應(yīng)中模板(bǎn)與(yǔ)引物(wù)的結合(hé)(復性)可以(yǐ)在(zài)較高的溫度(dù)下進行，結合(hé)的特(tè)異性(xìng)大大(dà)增加，被(bèi)擴(kuò)增的靶基(jī)因片段(duàn)也就能(néng)保(bǎo)持很(hěn)高(gāo)的正(zhèng)確度。再(zài)通(tōng)過選擇(zé)特(tè)異性和(hé)保守性高的靶基因(yīn)區，其特異(yì)性程度就(jiù)更高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高
PCR產物(wù)的(dí)生成量是(shì)以指(zhǐ)數方式(shì)增加(jiā)的，能(néng)將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起始(shǐ)待測模板(bǎn)擴增(zēng)到微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從100萬(wàn)個(gè)細胞(bāo)中檢(jiǎn)出一個靶(bǎ)細(xì)胞；在病(bìng)毒的檢測中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏度可達3個(gè)RFU(空斑(bān)形成單位)；在(zài)細(xì)菌學中zui小(xiǎo)檢出(chū)率為(wéi)3個細菌。
(3) 簡便(biàn)，快速(sù)
PCR反應(yīng)用(yòng)耐(nài)高(gāo)溫的Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一(yī)次(cì)性(xìng)地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應液加(jiā)好(hǎo)後，即(jí)在DNA擴增(zēng)液(yè)和水浴鍋上(shàng)進(jìn)行變性-退(tuì)火(huǒ)-延(yán)伸反應(yīng)，一般(bān)在2～4 小時完(wán)成擴增反(fǎn)應。擴增產(chǎn)物一般(bān)用電泳(yǒng)分(fēn)析，不一定(dìng)要(yào)用(yòng)同位(wèi)素，無(wú)放射性汙染，易(yì)推廣。
(4) 對標本的(dí)純(chún)度要求低
不(bù)需要分(fēn)離病(bìng)毒(dú)或細菌及(jí)培養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品及(jí)總RNA均(jūn)可作為擴增模(mó)板。可直接用(yòng)臨床標(biāo)本如(rú)血(xiě)液(yè)，體腔液，洗嗽液，毛發(fā)，細胞，活PCR技術概論(lùn)。
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