產(chǎn)品(pǐn)中心
PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé)
商(shāng)品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產品名稱(chēng) | 英(yīng)文名(míng)稱(chēng) | 貨號(hào) |
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潰(kuì)瘍分枝(zhī)杆(gān)菌(jūn)PCR檢測試劑盒 |
Mycobacterium ulceransPCR |
YS-P014468 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒
儲(chǔ)存條件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保(bǎo)存(cún)，避(bì)免(miǎn)反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫(wēn)，避光(guāng)。
有效(xiào)期(qī)：一年
貨期：現貨(huò)PCR試劑盒(hé)的有效期一(yī)般(bān)為(wéi)1年，這(zhè)是指在適(shì)當的儲存溫度下。核(hé)酸(suān)擴增部分(fēn)的(dí)試劑一(yī)般(bān)要貯(zhù)存於(yú)-20℃下(xià)，產物(wù)檢(jiǎn)測部分(fēn)試劑則(zé)貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量避免反(fǎn)復凍融。
【結果(guǒ)分析(xī)條(tiáo)件設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設定：將(jiāng)閾(yù)值(zhí)綫設定在剛好超過(guò)正常(cháng)陰性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增曲綫(xiàn)的最高點。
【質控(kòng)標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽性質(zhì)控品的(dí)檢(jiǎn)測結果應為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，有明(míng)顯(xiǎn)的指數擴增(zēng)期，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於(yú)等於35；
3. 以上(shàng)要求需在(zài)一(yī)次實驗(yàn)中同時(shí)滿足，否則(zé)該次實驗視為(wéi)無效(xiào)。
【結(jié)果判(pàn)斷】
2.可(kě)疑：有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本為可疑樣本；對(duì)於可疑樣(yàng)本(běn)建議復核一次(cì)，若復核結(jié)果(guǒ)Ct<40且有指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，則(zé)判(pàn)定(dìng)為陽(yáng)性(xìng)，否則判定為陰性；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指(zhǐ)數擴增(zēng)期，Ct=40或(huò)無Ct值均(jūn)判定為陰(yīn)性樣(yàng)本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗結果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實驗室環境(jìng)汙染，試(shì)劑(jì)汙染，樣品交叉汙(wū)染會出現(xiàn)假(jiǎ)陽性結果(guǒ)；
2. 試劑運輸(shū)，保存(cún)不當(dāng)或試劑配(pèi)製(zhì)不準(zhǔn)確引起(qǐ)的(dí)試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測效能下降，可(kě)能(néng)會(huì)導(dǎo)致出(chū)現(xiàn)假陰性結果。
PCR反應(yīng)的特異性(xìng)：
②鹼基配對(duì)原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合(hé)成(chéng)反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與(yǔ)保守性(xìng)。
潰(kuì)瘍(yáng)分枝(zhī)杆(gān)菌(jūn)PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)其中(zhōng)引物與(yǔ)模板的(dí)正確結合是關(guān)鍵。引(yǐn)物(wù)與模(mó)板的結(jié)合及(jí)引(yǐn)物(wù)鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸是遵循鹼基配(pèi)對原(yuán)則(zé)的。聚合酶合(hé)成(chéng)反應的(dí)忠(zhōng)實性及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)耐高(gāo)溫性，使反應中(zhōng)模板(bǎn)與引物(wù)的(dí)結(jié)合(復(fù)性(xìng))可以(yǐ)在較高(gāo)的溫度下進(jìn)行(háng)，結(jié)合(hé)的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)大大增加(jiā)，被擴(kuò)增的(dí)靶基因片段(duàn)也就(jiù)能保持很高的正(zhèng)確(què)度。再通(tōng)過選擇(zé)特(tè)異(yì)性(xìng)和(hé)保守性(xìng)高(gāo)的靶基因區，其(qí)特(tè)異性程度(dù)就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產物的(dí)生(shēng)成(chéng)量是(shì)以(yǐ)指數方式增(zēng)加(jiā)的(dí)，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測模板(bǎn)擴增到(dào)微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中(zhōng)檢出(chū)一個靶細胞；在(zài)病毒(dú)的(dí)檢測中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可(kě)達3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成(chéng)單(dān)位(wèi))；在(zài)細(xì)菌學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出率(shuài)為3個(gè)細菌。
(3) 簡便，快(kuài)速(sù)
PCR反應用耐高(gāo)溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶(méi)，一次性地將反(fǎn)應液(yè)加好後，即在DNA擴增(zēng)液(yè)和水(shuǐ)浴鍋上進行變性-退火-延(yán)伸反應，一般在2～4 小時(shí)完成擴增反(fǎn)應。擴增產(chǎn)物(wù)一(yī)般用電(diàn)泳分(fēn)析，不(bù)一定要用同位(wèi)素(sù)，無放射性(xìng)汙染(rǎn)，易推廣。
(4) 對(duì)標本(běn)的純度(dù)要求低
不(bù)需要(yào)分離病(bìng)毒或(huò)細(xì)菌(jūn)及(jí)培養細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及(jí)總RNA均(jūn)可(kě)作為(wéi)擴增(zēng)模板。可(kě)直接(jiē)用臨(lín)床(chuáng)標本(běn)如血液(yè)，體(tǐ)腔(qiāng)液(yè)，洗嗽液(yè)，毛(máo)發，細胞(bāo)，活(huó)PCR技(jì)術概論。
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