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產品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢測(cè)試劑(jì)盒
商(shāng)品屬性(xìng)
| 產品名稱 | 英文(wén)名(míng)稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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尼帕病毒PCR檢測試劑盒 |
Nipah Virus(NiV)RTPCR |
YS-P014512 |
分(fēn)類：PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒
儲存條件：-20℃避(bì)光(guāng)保(bǎo)存(cún)，避免反(fǎn)復凍融(róng)。
運(yùn)輸(shū)：低溫，避(bì)光。
有(yǒu)效期：一年
貨(huò)期：現貨(huò)PCR試劑(jì)盒的有(yǒu)效期一般為(wéi)1年，這是(shì)指在適當(dāng)的儲(chǔ)存(cún)溫(wēn)度下。核(hé)酸(suān)擴(kuò)增(zēng)部(bù)分(fēn)的試(shì)劑一般要(yào)貯(zhù)存於(yú)-20℃下，產(chǎn)物檢測部(bù)分(fēn)試(shì)劑則(zé)貯(zhù)存(cún)於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免反復凍(dòng)融(róng)。
【結果(guǒ)分析(xī)條件設定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定：將閾(yù)值綫(xiàn)設(shè)定在剛好超過正(zhèng)常陰(yīn)性質控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增曲綫的最(zuì)高點。
【質控(kòng)標準】
2. 陽(yáng)性質控(kòng)品(pǐn)的檢測結果(guǒ)應為(wéi)陽性(xìng)，有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，Ct值應小(xiǎo)於等於35；
3. 以上要求需(xū)在(zài)一次(cì)實驗中同時滿足，否則該次(cì)實(shí)驗視為(wéi)無(wú)效(xiào)。
【結果判斷】
2.可(kě)疑(yí)：有(yǒu)明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本(běn)為(wéi)可疑(yí)樣(yàng)本；對於(yú)可疑(yí)樣(yàng)本建議復核一次，若復核結果Ct<40且有(yǒu)指數(shù)擴增(zēng)期，則判(pàn)定為陽(yáng)性(xìng)，否則判定為陰(yīn)性；
3. 陰性(xìng)：無指數擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值均(jūn)判定(dìng)為陰(yīn)性樣本。
【對檢驗結果的(dí)解釋】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境(jìng)汙染，試劑(jì)汙染，樣(yàng)品交叉(chā)汙染會出(chū)現假陽性結果；
2. 試劑(jì)運(yùn)輸(shū)，保(bǎo)存(cún)不(bù)當或試劑配製不準確(què)引起(qǐ)的試(shì)劑檢測效能(néng)下降，可(kě)能(néng)會導致出(chū)現(xiàn)假陰性結果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的特(tè)異性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合成反應的(dí)忠(zhōng)實(shí)性；
④靶基因的(dí)特(tè)異性與(yǔ)保守性。
尼帕病毒(dú)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)其中(zhōng)引(yǐn)物與模(mó)板(bǎn)的正(zhèng)確結合(hé)是關(guān)鍵(jiàn)。引物與模板的結合(hé)及(jí)引物鏈(liàn)的延伸(shēn)是遵(zūn)循鹼基(jī)配對原(yuán)則的。聚合酶合(hé)成反(fǎn)應的忠(zhōng)實性及(jí)Taq DNA聚合酶(méi)耐(nài)高(gāo)溫性(xìng)，使反(fǎn)應(yīng)中模板(bǎn)與(yǔ)引物的(dí)結合(復(fù)性(xìng))可以在較高(gāo)的溫度下(xià)進行，結合的(dí)特(tè)異性(xìng)大(dà)大(dà)增加，被擴(kuò)增的靶基(jī)因片段(duàn)也(yě)就(jiù)能(néng)保持很高的正(zhèng)確度(dù)。再通過選(xuǎn)擇特異(yì)性和(hé)保守性高的靶(bǎ)基因區，其特異(yì)性(xìng)程度(dù)就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生(shēng)成(chéng)量(liáng)是以指(zhǐ)數方式(shì)增加的，能將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量級的(dí)起始待測(cè)模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬個(gè)細(xì)胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出一個靶(bǎ)細胞(bāo)；在(zài)病毒(dú)的檢(jiǎn)測(cè)中，PCR的(dí)靈(líng)敏度可(kě)達3個RFU(空斑(bān)形(xíng)成單位)；在(zài)細菌(jūn)學中zui小檢出率(shuài)為3個(gè)細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快速(sù)
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一次(cì)性地(dì)將反(fǎn)應(yīng)液加好(hǎo)後(hòu)，即在DNA擴增(zēng)液(yè)和(hé)水浴鍋上(shàng)進行變性-退(tuì)火-延伸反應，一般(bān)在(zài)2～4 小時完成(chéng)擴(kuò)增反應(yīng)。擴增(zēng)產(chǎn)物一(yī)般(bān)用電泳(yǒng)分(fēn)析，不一定要用同(tóng)位素，無放(fàng)射性(xìng)汙(wū)染，易推廣(guǎng)。
(4) 對標本的純度(dù)要求低
不需要分離病毒或(huò)細(xì)菌及培養細(xì)胞，DNA 粗製(zhì)品及(jí)總(zǒng)RNA均可作為(wéi)擴(kuò)增(zēng)模板。可直接用臨床標(biāo)本如(rú)血液(yè)，體(tǐ)腔液(yè)，洗嗽(sòu)液(yè)，毛(máo)發，細(xì)胞，活(huó)PCR技(jì)術(shù)概(gài)論(lùn)。
