產(chǎn)品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)
商(shāng)品屬(shǔ)性(xìng)
| 產(chǎn)品名(míng)稱 | 英文名稱(chēng) | 貨號 |
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南非諾(nuò)卡菌PCR檢測(cè)試(shì)劑盒 |
Nocardia transvalensisPCR |
YS-P014520 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測試劑盒(hé)
儲存條件：-20℃避(bì)光(guāng)保(bǎo)存，避免(miǎn)反復凍融。
運輸：低(dī)溫，避光(guāng)。
有(yǒu)效期(qī)：一(yī)年
貨期：現貨(huò)PCR試劑盒(hé)的有(yǒu)效期(qī)一(yī)般為(wéi)1年(nián)，這是指(zhǐ)在(zài)適(shì)當的儲存溫度下。核(hé)酸(suān)擴增(zēng)部分(fēn)的試劑一般要貯(zhù)存於(yú)-20℃下(xià)，產物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部分試(shì)劑則貯(zhù)存於2-8℃。盡量(liáng)避免反復凍(dòng)融。
【結果(guǒ)分析條(tiáo)件(jiàn)設定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定：將(jiāng)閾值(zhí)綫(xiàn)設定(dìng)在(zài)剛好超(chāo)過正常(cháng)陰性質控品擴增(zēng)曲綫(xiàn)的最高點(diǎn)。
【質(zhì)控標(biāo)準】
2. 陽性質(zhì)控品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結果應(yīng)為陽性，有(yǒu)明顯的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於(yú)等(děng)於35；
3. 以上(shàng)要(yào)求(qiú)需在(zài)一(yī)次實(shí)驗中同時滿足(zú)，否(fǒu)則該次(cì)實驗(yàn)視為無效。
【結(jié)果判(pàn)斷】
2.可(kě)疑：有明顯的指數(shù)擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為可疑樣本；對於可疑樣本(běn)建議復核一次(cì)，若(ruò)復核(hé)結(jié)果Ct<40且(qiě)有指數擴增期，則判定(dìng)為陽性(xìng)，否(fǒu)則(zé)判定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無指數擴(kuò)增期，Ct=40或無Ct值(zhí)均判定為(wéi)陰(yīn)性樣(yàng)本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗結果(guǒ)的(dí)解釋(shì)】
1. 實驗室環境汙染(rǎn)，試(shì)劑汙染，樣(yàng)品交(jiāo)叉汙(wū)染(rǎn)會出現假陽(yáng)性結果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運輸，保存不(bù)當或試(shì)劑配製(zhì)不(bù)準(zhǔn)確引起的試(shì)劑檢測效能下(xià)降，可能會導致(zhì)出現假陰(yīn)性(xìng)結果。
PCR反應的(dí)特異(yì)性(xìng)：
②鹼基(jī)配對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性；
④靶(bǎ)基因的(dí)特(tè)異性(xìng)與(yǔ)保(bǎo)守性(xìng)。
南(nán)非諾卡菌(jūn)PCR檢測(cè)試劑(jì)盒其中(zhōng)引物與(yǔ)模(mó)板的(dí)正確結合(hé)是關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物與(yǔ)模板的結(jié)合(hé)及(jí)引(yǐn)物鏈的(dí)延伸是(shì)遵(zūn)循鹼基配(pèi)對原(yuán)則的。聚合酶合成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐高溫性(xìng)，使反(fǎn)應(yīng)中模(mó)板(bǎn)與(yǔ)引物的結合(hé)(復性(xìng))可(kě)以(yǐ)在較(jiào)高的溫度(dù)下進(jìn)行，結合的(dí)特(tè)異性(xìng)大大(dà)增加，被擴增(zēng)的靶基(jī)因片段也就能保持很高的正確度(dù)。再通過(guò)選擇(zé)特異性和保守(shǒu)性高的靶基(jī)因區(qū)，其(qí)特異(yì)性(xìng)程度(dù)就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產(chǎn)物的生成量(liáng)是以(yǐ)指數方式增加(jiā)的(dí)，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起(qǐ)始待測(cè)模(mó)板擴增到微(wēi)克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個細胞中檢(jiǎn)出一個靶細胞(bāo)；在病(bìng)毒的(dí)檢測中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏度可達3個RFU(空(kōng)斑(bān)形(xíng)成(chéng)單(dān)位(wèi))；在細菌(jūn)學(xué)中zui小(xiǎo)檢出(chū)率為3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速
PCR反應用(yòng)耐高溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)，一次(cì)性地(dì)將反應液加(jiā)好(hǎo)後，即在(zài)DNA擴(kuò)增液和水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上進行變(biàn)性-退(tuì)火(huǒ)-延伸反(fǎn)應，一(yī)般(bān)在(zài)2～4 小時(shí)完成(chéng)擴增反應。擴(kuò)增(zēng)產物一般(bān)用(yòng)電(diàn)泳分析，不一(yī)定(dìng)要用同(tóng)位素(sù)，無(wú)放(fàng)射性(xìng)汙(wū)染，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本(běn)的純度(dù)要求低
不需要分離病毒(dú)或(huò)細菌(jūn)及培養細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製(zhì)品(pǐn)及(jí)總RNA均可作(zuò)為擴(kuò)增模板。可(kě)直(zhí)接用臨床標(biāo)本如(rú)血液，體(tǐ)腔液，洗嗽(sòu)液(yè)，毛(máo)發，細胞(bāo)，活(huó)PCR技術概論。
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