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PCR檢測試劑(jì)盒(hé)
諾(nuò)如病毒(dú)型(xíng)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒
| 產品名稱 | 英文(wén)名(míng)稱(chēng) | 貨(huò)號(hào) |
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諾如病毒(dú)型(xíng)PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒 |
Norwalk Viruses G1 (NV1)G1RTPCR |
YS-P014521 |
分類:PCR檢測試(shì)劑盒(hé)
儲(chǔ)存條件:-20℃避光(guāng)保存(cún),避免(miǎn)反復凍融。
運輸:低溫,避(bì)光。
有(yǒu)效(xiào)期:一年
貨(huò)期(qī):現(xiàn)貨PCR試劑盒(hé)的有效期一(yī)般為1年(nián),這是(shì)指在適當(dāng)的儲(chǔ)存溫度下。核酸擴(kuò)增部(bù)分的(dí)試劑一般(bān)要(yào)貯存於-20℃下,產物(wù)檢測(cè)部(bù)分試(shì)劑則貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍融。
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設(shè)定(dìng):將閾值綫(xiàn)設定在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過(guò)正常(cháng)陰性質(zhì)控品擴增(zēng)曲綫的最高點。
2. 陽(yáng)性質(zhì)控品(pǐn)的檢測(cè)結果應(yīng)為陽性(xìng),有明顯(xiǎn)的指數擴(kuò)增(zēng)期(qī),Ct值應(yīng)小於等於35;
3. 以上(shàng)要(yào)求(qiú)需(xū)在一次(cì)實(shí)驗中同時(shí)滿(mǎn)足,否(fǒu)則該(gāi)次實驗(yàn)視(shì)為(wéi)無(wú)效(xiào)。
2.可(kě)疑:有明(míng)顯的(dí)指數(shù)擴(kuò)增期(qī),且38≤Ct<40,此時(shí)樣本(běn)為(wéi)可疑(yí)樣本(běn);對於可疑樣本建(jiàn)議復核(hé)一(yī)次,若(ruò)復核結(jié)果(guǒ)Ct<40且有指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期(qī),則(zé)判定為陽性,否則(zé)判定為(wéi)陰(yīn)性(xìng);
3. 陰性:無指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期,Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均判(pàn)定為(wéi)陰性樣(yàng)本(běn)。
【對檢驗結果的(dí)解釋】
1. 實驗室(shì)環境汙(wū)染(rǎn),試劑(jì)汙(wū)染,樣(yàng)品(pǐn)交叉(chā)汙(wū)染會出現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性結果(guǒ);
2. 試劑(jì)運輸,保存不(bù)當(dāng)或試劑配製不(bù)準(zhǔn)確引(yǐn)起的(dí)試劑(jì)檢(jiǎn)測效(xiào)能下降(jiàng),可(kě)能(néng)會(huì)導(dǎo)致(zhì)出現假陰(yīn)性結(jié)果。
②鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對(duì)原則(zé);
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實(shí)性(xìng);
④靶(bǎ)基(jī)因(yīn)的特異(yì)性與保(bǎo)守性。
諾(nuò)如病(bìng)毒型PCR檢測試(shì)劑盒其中引物與(yǔ)模板的正確(què)結合(hé)是(shì)關鍵。引(yǐn)物與(yǔ)模板(bǎn)的結合及引(yǐn)物(wù)鏈的(dí)延(yán)伸是遵循鹼基配(pèi)對(duì)原則的。聚合酶(méi)合(hé)成(chéng)反應的忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)耐高(gāo)溫性(xìng),使反應(yīng)中模板與引(yǐn)物(wù)的結合(復(fù)性)可以在(zài)較高(gāo)的(dí)溫(wēn)度(dù)下(xià)進行,結(jié)合(hé)的特異性(xìng)大大(dà)增加,被擴增(zēng)的靶(bǎ)基(jī)因(yīn)片(piàn)段也(yě)就(jiù)能保(bǎo)持(chí)很高(gāo)的正(zhèng)確度(dù)。再(zài)通過選(xuǎn)擇特(tè)異(yì)性和保守性高的靶基因(yīn)區(qū),其特異性(xìng)程(chéng)度就更高。
(2) 靈敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產(chǎn)物的生成量是(shì)以(yǐ)指數方式增加的(dí),能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的起(qǐ)始待(dài)測模板(bǎn)擴增(zēng)到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從(cóng)100萬個(gè)細胞(bāo)中檢出(chū)一個靶細胞(bāo);在(zài)病毒(dú)的(dí)檢測中,PCR的靈敏(mǐn)度可達3個RFU(空(kōng)斑(bān)形(xíng)成單(dān)位);在細菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出(chū)率為3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便,快(kuài)速
PCR反應用耐(nài)高(gāo)溫的Taq DNA聚合(hé)酶(méi),一次性地將反應液加(jiā)好後,即(jí)在DNA擴增(zēng)液和水浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進(jìn)行變性-退火(huǒ)-延(yán)伸反應(yīng),一般(bān)在(zài)2~4 小時(shí)完成(chéng)擴增反(fǎn)應。擴(kuò)增產(chǎn)物一(yī)般(bān)用(yòng)電(diàn)泳分析,不(bù)一定(dìng)要用同位(wèi)素,無放射(shè)性汙染(rǎn),易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對標本的純(chún)度要(yào)求(qiú)低(dī)
不(bù)需要(yào)分離病毒(dú)或細(xì)菌及培養細胞,DNA 粗(cū)製(zhì)品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可(kě)作(zuò)為(wéi)擴增模板(bǎn)。可直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨床(chuáng)標(biāo)本(běn)如血液,體(tǐ)腔液(yè),洗嗽(sòu)液(yè),毛發,細(xì)胞(bāo),活PCR技術概論。
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