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PCR檢測(cè)試(shì)劑盒
商品(pǐn)屬(shǔ)性(xìng)
| 產品名稱 | 英(yīng)文名(míng)稱 | 貨號 |
|
核型多角體(tǐ)病毒PCR檢測試劑(jì)盒 |
Nuclear Polyhedrosis Virus(NPV)PCR |
YS-P014526 |
分(fēn)類：PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒
儲存條(tiáo)件：-20℃避光(guāng)保(bǎo)存，避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍融(róng)。
運(yùn)輸：低溫，避(bì)光(guāng)。
有(yǒu)效期：一(yī)年(nián)
貨期(qī)：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑盒的有(yǒu)效期一般(bān)為(wéi)1年(nián)，這是(shì)指在(zài)適(shì)當的儲(chǔ)存(cún)溫度(dù)下(xià)。核酸擴增部分(fēn)的(dí)試劑一(yī)般要貯(zhù)存於(yú)-20℃下，產物(wù)檢(jiǎn)測部分試(shì)劑則(zé)貯存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免反(fǎn)復凍融。
【結(jié)果分析條件設定】
u 閾值(Threshold)設定：將閾值綫(xiàn)設定在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超過正(zhèng)常(cháng)陰性質控(kòng)品擴(kuò)增曲綫(xiàn)的最高點。
【質(zhì)控標準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測結果應為(wéi)陽性(xìng)，有(yǒu)明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期(qī)，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於(yú)等(děng)於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要求需在(zài)一次實(shí)驗中同(tóng)時滿足(zú)，否(fǒu)則該次實(shí)驗視為(wéi)無效。
【結果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可(kě)疑：有明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本(běn)為可(kě)疑(yí)樣(yàng)本(běn)；對(duì)於可疑樣(yàng)本建(jiàn)議(yì)復核一(yī)次，若(ruò)復核(hé)結果Ct<40且有(yǒu)指數(shù)擴增(zēng)期，則(zé)判定為(wéi)陽性(xìng)，否(fǒu)則判(pàn)定為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰(yīn)性：無指數(shù)擴(kuò)增期，Ct=40或無(wú)Ct值均(jūn)判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性樣本。
【對檢驗(yàn)結果的(dí)解釋】
1. 實驗(yàn)室(shì)環境(jìng)汙染，試劑汙(wū)染，樣(yàng)品(pǐn)交叉(chā)汙(wū)染會出現假陽(yáng)性結果；
2. 試劑運(yùn)輸，保存(cún)不當或(huò)試劑配(pèi)製不準確引起(qǐ)的(dí)試劑檢(jiǎn)測效能下(xià)降，可能會導(dǎo)致(zhì)出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陰性(xìng)結(jié)果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的特(tè)異性：
②鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶(bǎ)基(jī)因(yīn)的(dí)特(tè)異性(xìng)與保守性(xìng)。
核型多(duō)角體病(bìng)毒(dú)PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模(mó)板的正確結(jié)合是關鍵(jiàn)。引物(wù)與模板的(dí)結(jié)合及(jí)引(yǐn)物鏈的(dí)延伸是(shì)遵循鹼基(jī)配對原(yuán)則(zé)的。聚(jù)合酶(méi)合成反(fǎn)應的(dí)忠實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)耐(nài)高溫性，使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中模(mó)板與引物的結合(hé)(復(fù)性)可以(yǐ)在(zài)較高的(dí)溫度(dù)下進行，結(jié)合的特異性(xìng)大大增加，被擴增(zēng)的靶基(jī)因片段也就(jiù)能(néng)保(bǎo)持很(hěn)高的(dí)正(zhèng)確度。再通過選(xuǎn)擇特異(yì)性和保(bǎo)守性(xìng)高的靶基(jī)因區(qū)，其特(tè)異性程(chéng)度(dù)就更高。
(2) 靈(líng)敏度高(gāo)
PCR產物的生成量(liáng)是以指數(shù)方式增加的(dí)，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級的起始(shǐ)待測(cè)模板(bǎn)擴增到微克(ug=10-6g)水平。能(néng)從100萬(wàn)個細胞中檢出(chū)一個靶細(xì)胞(bāo)；在病毒的(dí)檢測中，PCR的(dí)靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑(bān)形成單位(wèi))；在細菌(jūn)學(xué)中zui小檢(jiǎn)出率為3個細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快(kuài)速
PCR反應(yīng)用耐高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)，一次性地將(jiāng)反應(yīng)液加好後，即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增(zēng)液和(hé)水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進(jìn)行(háng)變性-退(tuì)火-延伸(shēn)反(fǎn)應，一般(bān)在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反(fǎn)應(yīng)。擴增(zēng)產(chǎn)物一(yī)般(bān)用(yòng)電泳分析，不一定要用同位素(sù)，無放射(shè)性(xìng)汙染(rǎn)，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本的純度(dù)要求(qiú)低
不(bù)需要(yào)分離(lí)病(bìng)毒(dú)或(huò)細菌及(jí)培養(yǎng)細胞，DNA 粗製品(pǐn)及總RNA均(jūn)可作(zuò)為擴增模(mó)板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接用臨(lín)床標本如血(xiě)液，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽液(yè)，毛(máo)發(fā)，細(xì)胞(bāo)，活PCR技(jì)術概(gài)論。
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