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產(chǎn)品(pǐn)中心(xīn)
PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé)
商(shāng)品屬性
| 產(chǎn)品名(míng)稱(chēng) | 英文名稱 | 貨(huò)號(hào) |
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奧(ào)利華斯(sī)病(bìng)毒PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé) |
Oliveros virus(OLVV)RTPCR |
YS-P014529 |
分(fēn)類：PCR檢測試劑(jì)盒(hé)
儲(chǔ)存(cún)條件：-20℃避光保存，避免反(fǎn)復(fù)凍融。
運輸(shū)：低(dī)溫，避光(guāng)。
有效期(qī)：一(yī)年
貨(huò)期(qī)：現貨PCR試劑盒的(dí)有(yǒu)效期(qī)一(yī)般為(wéi)1年，這是指(zhǐ)在適當(dāng)的儲(chǔ)存溫度(dù)下。核(hé)酸(suān)擴增部(bù)分的試(shì)劑一(yī)般要(yào)貯存(cún)於-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢測部分試劑則貯存於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免反復(fù)凍融。
【結(jié)果分析條件設定】
u 閾值(Threshold)設定：將(jiāng)閾(yù)值綫(xiàn)設(shè)定在剛好超過(guò)正常陰性(xìng)質(zhì)控(kòng)品擴(kuò)增曲綫的最(zuì)高點。
【質(zhì)控標(biāo)準】
2. 陽性質(zhì)控(kòng)品的檢(jiǎn)測結果(guǒ)應為陽(yáng)性(xìng)，有明(míng)顯的(dí)指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於等於35；
3. 以上要求(qiú)需在(zài)一(yī)次實驗(yàn)中同(tóng)時滿足，否(fǒu)則(zé)該(gāi)次實驗視為(wéi)無效(xiào)。
【結果判斷】
2.可疑(yí)：有明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為可(kě)疑樣本(běn)；對(duì)於可疑(yí)樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議(yì)復(fù)核(hé)一(yī)次(cì)，若(ruò)復(fù)核結果Ct<40且有(yǒu)指數擴(kuò)增期，則判(pàn)定(dìng)為陽性(xìng)，否則判(pàn)定為陰性；
3. 陰性：無(wú)指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值均判定(dìng)為(wéi)陰性樣(yàng)本。
【對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的解釋】
1. 實驗室(shì)環(huán)境汙(wū)染，試(shì)劑(jì)汙(wū)染，樣品交(jiāo)叉汙染(rǎn)會(huì)出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性結果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸(shū)，保(bǎo)存不當(dāng)或試劑配製(zhì)不準確引(yǐn)起的(dí)試劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能(néng)下降，可能會導致(zhì)出(chū)現假陰性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反應的(dí)特異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶合成反(fǎn)應的(dí)忠實性(xìng)；
④靶(bǎ)基(jī)因的(dí)特異(yì)性與保守性。
奧利華(huá)斯病(bìng)毒(dú)PCR檢測試劑(jì)盒其(qí)中引物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的正確結合(hé)是(shì)關(guān)鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模板(bǎn)的結(jié)合及引物(wù)鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸是遵循(xún)鹼(jiǎn)基配(pèi)對原(yuán)則(zé)的。聚合酶合成(chéng)反應(yīng)的忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高溫性(xìng)，使(shǐ)反(fǎn)應中(zhōng)模(mó)板與(yǔ)引物的結(jié)合(hé)(復性)可(kě)以(yǐ)在(zài)較高的溫度下進(jìn)行(háng)，結(jié)合(hé)的(dí)特(tè)異(yì)性大(dà)大增加(jiā)，被擴(kuò)增(zēng)的靶基因片(piàn)段(duàn)也(yě)就能(néng)保持(chí)很高(gāo)的正確度。再通過(guò)選擇(zé)特異性和保守性高的靶基(jī)因區(qū)，其特(tè)異(yì)性程度(dù)就(jiù)更高。
(2) 靈敏度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物的生(shēng)成(chéng)量是(shì)以(yǐ)指數方式增(zēng)加的(dí)，能將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待測模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從100萬個(gè)細胞中(zhōng)檢出(chū)一(yī)個靶細胞；在病毒(dú)的檢測(cè)中(zhōng)，PCR的(dí)靈(líng)敏(mǐn)度可達3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形成單(dān)位(wèi))；在細菌學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出率(shuài)為3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡便，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合(hé)酶，一次性地將(jiāng)反(fǎn)應液(yè)加好(hǎo)後(hòu)，即在DNA擴增液(yè)和(hé)水浴(yù)鍋上(shàng)進(jìn)行(háng)變性-退(tuì)火-延伸反應(yīng)，一般(bān)在(zài)2～4 小時(shí)完(wán)成擴增(zēng)反應(yīng)。擴增產(chǎn)物(wù)一(yī)般(bān)用(yòng)電(diàn)泳分(fēn)析，不(bù)一定要(yào)用(yòng)同位(wèi)素(sù)，無放射性汙染，易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本(běn)的(dí)純度(dù)要求低(dī)
不(bù)需(xū)要(yào)分離病(bìng)毒(dú)或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗(cū)製(zhì)品及總RNA均可作為擴(kuò)增模(mó)板(bǎn)。可直接(jiē)用臨床(chuáng)標(biāo)本(běn)如血液，體腔(qiāng)液，洗嗽(sòu)液，毛發，細(xì)胞(bāo)，活PCR技(jì)術(shù)概論。
