產(chǎn)品(pǐn)中心
PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒
商(shāng)品屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文(wén)名稱(chēng) | 貨號 |
|
恙蟲病東(dōng)方(fāng)體PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé) |
Orientia tsutsugamushiPCR |
YS-P014534 |
分類(lèi)：PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)
儲存條件(jiàn)：-20℃避光保(bǎo)存(cún)，避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍融(róng)。
運(yùn)輸：低(dī)溫(wēn)，避光(guāng)。
有(yǒu)效(xiào)期(qī)：一年(nián)
貨(huò)期：現(xiàn)貨PCR試劑(jì)盒的(dí)有(yǒu)效期一(yī)般為1年，這是指(zhǐ)在適(shì)當(dāng)的儲存溫度(dù)下。核(hé)酸(suān)擴增(zēng)部分的試(shì)劑一般要貯(zhù)存於-20℃下，產物(wù)檢(jiǎn)測部(bù)分(fēn)試劑則(zé)貯存於2-8℃。盡量避(bì)免反復(fù)凍融(róng)。
【結(jié)果分析條(tiáo)件(jiàn)設定】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將(jiāng)閾(yù)值(zhí)綫(xiàn)設(shè)定在剛好超(chāo)過正常陰性質控品擴(kuò)增曲(qū)綫(xiàn)的最高(gāo)點(diǎn)。
【質控標(biāo)準】
2. 陽性(xìng)質控品(pǐn)的檢測結果應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性，有明顯(xiǎn)的指數擴(kuò)增期，Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於(yú)等於35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求(qiú)需在(zài)一次實(shí)驗中同(tóng)時(shí)滿足，否(fǒu)則(zé)該(gāi)次實驗(yàn)視為(wéi)無(wú)效。
【結果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有(yǒu)明顯的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本為可(kě)疑樣本(běn)；對於可(kě)疑(yí)樣本建議復核(hé)一次(cì)，若(ruò)復核結果Ct<40且(qiě)有指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，則(zé)判(pàn)定(dìng)為陽性(xìng)，否則(zé)判定為陰(yīn)性；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或無Ct值(zhí)均判定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結(jié)果(guǒ)的解(jiě)釋】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境汙(wū)染(rǎn)，試(shì)劑(jì)汙(wū)染(rǎn)，樣(yàng)品交(jiāo)叉汙染(rǎn)會(huì)出現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性(xìng)結(jié)果；
2. 試劑運(yùn)輸，保(bǎo)存不(bù)當或(huò)試(shì)劑配(pèi)製(zhì)不準(zhǔn)確(què)引起(qǐ)的試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效能(néng)下降(jiàng)，可(kě)能(néng)會(huì)導致出現假陰性結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應(yīng)的特異性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性；
④靶基(jī)因的(dí)特異性(xìng)與保守性。
恙蟲病東方(fāng)體PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé)其中引物與模(mó)板(bǎn)的正確(què)結合(hé)是關鍵。引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的結合及引(yǐn)物鏈(liàn)的延(yán)伸(shēn)是遵(zūn)循(xún)鹼基(jī)配(pèi)對原則的。聚合酶合(hé)成反應的忠(zhōng)實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶耐(nài)高溫性(xìng)，使(shǐ)反應(yīng)中模板(bǎn)與引(yǐn)物的(dí)結(jié)合(復(fù)性(xìng))可(kě)以(yǐ)在較(jiào)高的溫度下進行，結(jié)合(hé)的特(tè)異(yì)性大大增加，被擴增的靶基因(yīn)片段也就(jiù)能保持很高的正(zhèng)確度。再(zài)通(tōng)過(guò)選(xuǎn)擇特異性和(hé)保守(shǒu)性高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基因區，其(qí)特異性程(chéng)度就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產物的生(shēng)成量是以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方(fāng)式(shì)增加的，能將皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起(qǐ)始待(dài)測(cè)模(mó)板擴增到微克(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一個靶(bǎ)細胞(bāo)；在病毒的檢(jiǎn)測(cè)中，PCR的靈敏(mǐn)度可達3個RFU(空(kōng)斑(bān)形成(chéng)單(dān)位)；在細菌學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出率(shuài)為(wéi)3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐高溫的Taq DNA聚合(hé)酶，一次性地(dì)將反應(yīng)液(yè)加(jiā)好後，即(jí)在(zài)DNA擴增(zēng)液(yè)和(hé)水浴(yù)鍋上進(jìn)行變(biàn)性(xìng)-退火(huǒ)-延(yán)伸(shēn)反(fǎn)應，一般在(zài)2～4 小(xiǎo)時完成(chéng)擴(kuò)增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般(bān)用(yòng)電泳(yǒng)分(fēn)析，不(bù)一定要用同(tóng)位素，無(wú)放(fàng)射性汙染，易推(tuī)廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要(yào)求(qiú)低
不(bù)需(xū)要(yào)分(fēn)離(lí)病毒(dú)或(huò)細菌(jūn)及培養(yǎng)細胞，DNA 粗製(zhì)品及(jí)總RNA均可作(zuò)為(wéi)擴增(zēng)模板。可(kě)直(zhí)接用臨床標(biāo)本(běn)如血液(yè)，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗嗽(sòu)液，毛(máo)發(fā)，細(xì)胞，活PCR技(jì)術(shù)概(gài)論。
- 上(shàng)一(yī)條：鼻氣管炎(yán)鳥(niǎo)杆(gān)菌(jūn)PCR檢測試劑盒(hé)
- 下(xià)一條(tiáo)：羊(yáng)口瘡病毒PCR檢測(cè)試劑盒
