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PCR檢測試劑盒(hé)

鼻氣管(guǎn)炎鳥(niǎo)杆菌PCR檢測試劑盒(hé)

文(wén)字:[大][中(zhōng)][小(xiǎo)] 2024-3-15    瀏覽(lǎn)次數(shù):759    
商(shāng)品屬(shǔ)性(xìng)
產品(pǐn)名(míng)稱(chēng) 英(yīng)文(wén)名稱(chēng) 貨號
鼻(bí)氣管炎鳥(niǎo)杆菌PCR檢測(cè)試(shì)劑盒
Ornithobacterium rhinotracheale PCR
YS-P014535
規格(gé):50T
分(fēn)類:PCR檢測(cè)試劑盒
儲存(cún)條(tiáo)件:-20℃避(bì)光(guāng)保存,避免(miǎn)反復凍融。
運(yùn)輸(shū):低溫(wēn),避光(guāng)。
有(yǒu)效期:一年

貨(huò)期:現貨PCR試劑盒的(dí)有效(xiào)期一般為1年(nián),這是指在(zài)適當(dāng)的(dí)儲存溫(wēn)度(dù)下(xià)。核酸(suān)擴(kuò)增部分的試(shì)劑(jì)一(yī)般要(yào)貯存於(yú)-20℃下,產(chǎn)物(wù)檢測(cè)部分試劑(jì)則貯(zhù)存於2-8℃。盡量避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍融。

【結果分(fēn)析條(tiáo)件設定】
u 基(jī)綫(xiàn)(Baseline)設定(dìng):應(yīng)選(xuǎn)擇該次實(shí)驗(yàn)指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)前所有樣本(běn)熒光信(xìn)號比(bǐ)較穩(wěn)定(dìng)的(dí)一(yī)段(duàn)區(qū)域(所(suǒ)有樣本(běn)熒光(guāng)信號(hào)無較大波動),起始點(Start)應(yīng)避(bì)開熒光采集(jí)起(qǐ)始(shǐ)階(jiē)段的信(xìn)號波(bō)動(dòng),終(zhōng)止點(diǎn)(End)應比(bǐ)最(zuì)早出(chū)現指數擴增(zēng)的樣本Ct值減(jiǎn)少1~3個循環,建(jiàn)議(yì)基綫設(shè)為6~15。
u 閾(yù)值(Threshold)設定(dìng):將閾(yù)值綫設定(dìng)在剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過正(zhèng)常(cháng)陰性質控品擴增曲綫的最(zuì)高點(diǎn)。
【質控標(biāo)準】
1.   陰性(xìng)質(zhì)控品的(dí)檢測結(jié)果應為陰性,無(wú)指數(shù)擴增(zēng)期,Ct=40或無(wú)Ct;
2.   陽性(xìng)質(zhì)控(kòng)品的(dí)檢測(cè)結果應為(wéi)陽(yáng)性,有(yǒu)明顯的(dí)指數擴(kuò)增(zēng)期(qī),Ct值應小(xiǎo)於等(děng)於35;
3.   以上(shàng)要(yào)求需(xū)在(zài)一次(cì)實驗中同時滿足,否則該次(cì)實驗視(shì)為無效(xiào)。
【結果判(pàn)斷】
1.   陽性:有(yǒu)明(míng)顯的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增期,且Ct<38;
2.可(kě)疑(yí):有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴增(zēng)期,且38≤Ct<40,此(cǐ)時樣本為(wéi)可疑樣(yàng)本;對於可疑(yí)樣本建議(yì)復核一次,若復核結(jié)果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數擴增期,則判定為陽性,否(fǒu)則(zé)判定為陰性;
3.   陰(yīn)性(xìng):無(wú)指數擴增期,Ct=40或無Ct值均判定為(wéi)陰性樣(yàng)本。
【對檢驗結果的解(jiě)釋(shì)】
1.   實驗(yàn)室(shì)環(huán)境汙染(rǎn),試劑汙染,樣(yàng)品(pǐn)交(jiāo)叉(chā)汙染(rǎn)會出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性結果(guǒ);

2.   試(shì)劑(jì)運輸,保(bǎo)存(cún)不(bù)當或(huò)試劑(jì)配製不準(zhǔn)確引起(qǐ)的試劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效能(néng)下降(jiàng),可能(néng)會導(dǎo)致出現(xiàn)假陰性(xìng)結(jié)果(guǒ)。

PCR反(fǎn)應(yīng)的特(tè)異(yì)性(xìng):
   ①引物與(yǔ)模板DNA特(tè)異(yì)正確的結(jié)合;
   ②鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原則(zé);
   ③Taq DNA聚合(hé)酶合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實(shí)性;
   ④靶基(jī)因(yīn)的特異(yì)性與保守性(xìng)。
鼻氣管炎鳥(niǎo)杆菌(jūn)PCR檢測(cè)試劑盒其中引物與(yǔ)模(mó)板的正確(què)結合是關鍵(jiàn)。引(yǐn)物與(yǔ)模(mó)板的結合(hé)及(jí)引物(wù)鏈的延伸(shēn)是遵循鹼基(jī)配對(duì)原則的。聚(jù)合(hé)酶(méi)合(hé)成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐高溫(wēn)性(xìng),使反應中模板(bǎn)與(yǔ)引物的(dí)結合(復性)可(kě)以(yǐ)在較高的溫度下(xià)進行,結(jié)合(hé)的(dí)特異性大大增加(jiā),被擴(kuò)增(zēng)的靶基(jī)因片段也就能(néng)保持很高(gāo)的(dí)正(zhèng)確(què)度(dù)。再通過選(xuǎn)擇(zé)特異(yì)性和保守性高的靶(bǎ)基因區(qū),其特(tè)異(yì)性(xìng)程(chéng)度(dù)就(jiù)更高。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產物的(dí)生(shēng)成量(liáng)是(shì)以(yǐ)指數方(fāng)式(shì)增加的,能將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的起始待測(cè)模(mó)板擴增到微(wēi)克(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從100萬個(gè)細胞中檢出一個靶細胞(bāo);在(zài)病毒的檢測中,PCR的(dí)靈(líng)敏(mǐn)度可(kě)達3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形成單位);在(zài)細菌學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出(chū)率為(wéi)3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便,快速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐高(gāo)溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶(méi),一次(cì)性(xìng)地將反(fǎn)應液加(jiā)好(hǎo)後(hòu),即在(zài)DNA擴增液(yè)和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一(yī)般在2~4 小(xiǎo)時完成擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應。擴增產物一(yī)般(bān)用電(diàn)泳分析(xī),不(bù)一定要用同位素(sù),無放(fàng)射性汙染,易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對標本的(dí)純度要(yào)求(qiú)低(dī)
不需要(yào)分離病毒(dú)或細菌(jūn)及培養細(xì)胞,DNA 粗(cū)製品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可作(zuò)為擴增模板。可直接(jiē)用(yòng)臨床(chuáng)標本(běn)如血(xiě)液,體腔(qiāng)液,洗嗽液,毛發,細胞,活(huó)PCR技術(shù)概(gài)論。
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