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PCR檢測試劑盒
商(shāng)品屬性
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱 | 貨號(hào) |
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四(sì)輻射鳥圓綫(xiàn)蟲PCR檢測試劑盒(hé) |
Ornithostrongylus quadriradiatusPCR |
YS-P014536 |
分類(lèi)：PCR檢測(cè)試(shì)劑盒
儲(chǔ)存(cún)條件：-20℃避(bì)光(guāng)保存，避免反(fǎn)復凍融。
運輸：低溫，避光。
有(yǒu)效期(qī)：一(yī)年
貨期(qī)：現(xiàn)貨PCR試劑盒(hé)的有效期(qī)一般為1年，這是指在(zài)適當(dāng)的(dí)儲存溫(wēn)度下(xià)。核(hé)酸擴(kuò)增部(bù)分的(dí)試劑一般(bān)要(yào)貯存(cún)於-20℃下(xià)，產物檢測部分(fēn)試(shì)劑(jì)則(zé)貯存於2-8℃。盡量避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍融。
【結(jié)果(guǒ)分(fēn)析(xī)條件設定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將(jiāng)閾值綫設定在(zài)剛好超(chāo)過(guò)正常(cháng)陰性質(zhì)控(kòng)品擴增曲(qū)綫的(dí)最高(gāo)點。
【質控標(biāo)準】
2. 陽性質控品的(dí)檢測(cè)結(jié)果應(yīng)為陽性，有(yǒu)明(míng)顯的(dí)指數擴增(zēng)期(qī)，Ct值應(yīng)小於(yú)等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要求需在(zài)一次實驗中(zhōng)同(tóng)時滿足，否(fǒu)則該(gāi)次(cì)實驗視(shì)為(wéi)無(wú)效(xiào)。
【結果判(pàn)斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有(yǒu)明顯的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本(běn)為可(kě)疑樣本；對(duì)於可疑(yí)樣(yàng)本建議復(fù)核(hé)一次(cì)，若(ruò)復核結果Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數擴(kuò)增期，則判(pàn)定為陽性，否則判定為陰性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指數擴增期(qī)，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均判(pàn)定為陰性樣本。
【對檢驗(yàn)結果的解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗室環境汙(wū)染(rǎn)，試(shì)劑汙(wū)染，樣品交(jiāo)叉汙(wū)染會(huì)出現假陽性結果；
2. 試劑運輸，保存不(bù)當或試(shì)劑(jì)配製不(bù)準(zhǔn)確引(yǐn)起的(dí)試劑檢(jiǎn)測效能下(xià)降，可(kě)能會(huì)導致(zhì)出現(xiàn)假(jiǎ)陰(yīn)性結果。
PCR反應(yīng)的(dí)特(tè)異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶(méi)合成反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實(shí)性；
④靶基(jī)因的特異性(xìng)與保守性。
四(sì)輻(fú)射(shè)鳥(niǎo)圓綫蟲PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒其(qí)中引物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的(dí)正(zhèng)確結(jié)合是關鍵(jiàn)。引物(wù)與(yǔ)模板的(dí)結(jié)合(hé)及引(yǐn)物鏈的延伸(shēn)是遵循(xún)鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原則的。聚合(hé)酶合(hé)成反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實性及Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐高溫性，使反應中(zhōng)模(mó)板與引物的結合(復(fù)性)可(kě)以在(zài)較(jiào)高(gāo)的(dí)溫度下進行(háng)，結合的特(tè)異性(xìng)大大(dà)增(zēng)加，被擴(kuò)增的(dí)靶基因片(piàn)段(duàn)也就(jiù)能(néng)保(bǎo)持很高(gāo)的(dí)正確(què)度(dù)。再通過選(xuǎn)擇特異性(xìng)和保(bǎo)守性(xìng)高的靶基因區(qū)，其特異性(xìng)程度(dù)就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產物的生成量是以指數(shù)方式(shì)增加(jiā)的(dí)，能將皮克(kè)(pg=10-12g)量級的起始(shǐ)待測模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水平。能(néng)從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出(chū)一個靶(bǎ)細(xì)胞；在(zài)病(bìng)毒的檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的(dí)靈(líng)敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形(xíng)成單(dān)位(wèi))；在(zài)細菌(jūn)學(xué)中zui小檢(jiǎn)出率為(wéi)3個細菌。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速(sù)
PCR反應用耐高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶(méi)，一(yī)次性地將反(fǎn)應液(yè)加好後(hòu)，即(jí)在DNA擴(kuò)增液和水浴(yù)鍋上(shàng)進行變(biàn)性-退火-延伸反(fǎn)應，一(yī)般在(zài)2～4 小時(shí)完(wán)成擴(kuò)增(zēng)反應。擴增產(chǎn)物(wù)一般(bān)用電(diàn)泳分析，不一定(dìng)要用(yòng)同(tóng)位素，無放射性(xìng)汙(wū)染，易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的(dí)純(chún)度要求低(dī)
不需要分離病毒或細菌(jūn)及培養細(xì)胞，DNA 粗製品(pǐn)及總RNA均(jūn)可(kě)作(zuò)為(wéi)擴(kuò)增(zēng)模板。可直接用臨床(chuáng)標本如(rú)血液，體腔(qiāng)液(yè)，洗嗽液，毛(máo)發，細(xì)胞，活PCR技(jì)術概(gài)論(lùn)。
