產(chǎn)品中心(xīn)
PCR檢測試(shì)劑(jì)盒
綿(mián)羊(yáng)皰疹病(bìng)毒通用PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱 | 英(yīng)文名稱 | 貨號 |
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綿羊(yáng)皰疹(zhěn)病毒通用PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒 |
Ovine Herpesvirus(OHV)PCR |
YS-P014549 |
分類:PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
儲(chǔ)存(cún)條件:-20℃避(bì)光保存,避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
運輸:低溫,避光。
有效(xiào)期:一(yī)年
貨(huò)期(qī):現貨PCR試(shì)劑(jì)盒的有效期(qī)一般為(wéi)1年,這是指在(zài)適(shì)當的儲存(cún)溫(wēn)度下。核酸擴增部(bù)分的試(shì)劑一(yī)般(bān)要貯(zhù)存(cún)於(yú)-20℃下(xià),產(chǎn)物檢測部(bù)分試劑則(zé)貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量避免反復(fù)凍融。
u 閾(yù)值(Threshold)設定:將(jiāng)閾(yù)值綫(xiàn)設(shè)定在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超過正常(cháng)陰性質(zhì)控品(pǐn)擴增(zēng)曲綫(xiàn)的(dí)最高點。
2. 陽性(xìng)質(zhì)控品的(dí)檢測(cè)結果應(yīng)為(wéi)陽性(xìng),有明顯(xiǎn)的指數(shù)擴增期(qī),Ct值(zhí)應小於等於(yú)35;
3. 以(yǐ)上要(yào)求需在(zài)一次實(shí)驗中同(tóng)時滿足,否(fǒu)則該次(cì)實(shí)驗視(shì)為無(wú)效(xiào)。
2.可(kě)疑(yí):有明顯的指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī),且38≤Ct<40,此時(shí)樣(yàng)本(běn)為(wéi)可疑(yí)樣本;對於(yú)可疑(yí)樣本建議復核一(yī)次,若復(fù)核結果(guǒ)Ct<40且有指數(shù)擴增期(qī),則判(pàn)定(dìng)為陽(yáng)性(xìng),否則(zé)判(pàn)定為陰性(xìng);
3. 陰性:無指數擴增期(qī),Ct=40或無(wú)Ct值均判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本。
【對檢驗結果(guǒ)的(dí)解釋(shì)】
1. 實驗室環(huán)境(jìng)汙(wū)染,試劑(jì)汙染(rǎn),樣(yàng)品交叉汙(wū)染會(huì)出現假陽(yáng)性(xìng)結果(guǒ);
2. 試劑運輸(shū),保存(cún)不(bù)當或試(shì)劑(jì)配製(zhì)不準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起(qǐ)的試(shì)劑檢測(cè)效能(néng)下降,可能會(huì)導(dǎo)致(zhì)出(chū)現假陰(yīn)性結(jié)果。
②鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的(dí)忠實(shí)性;
④靶基(jī)因的(dí)特異(yì)性(xìng)與(yǔ)保(bǎo)守性(xìng)。
綿(mián)羊(yáng)皰疹病毒通(tōng)用PCR檢測試(shì)劑盒其中(zhōng)引物與(yǔ)模板(bǎn)的(dí)正(zhèng)確結(jié)合(hé)是關(guān)鍵。引物(wù)與模板(bǎn)的結合及引(yǐn)物鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸(shēn)是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對(duì)原(yuán)則的。聚合(hé)酶合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐(nài)高溫性(xìng),使(shǐ)反應中(zhōng)模板與(yǔ)引物的(dí)結合(復(fù)性(xìng))可(kě)以在較(jiào)高的(dí)溫度下進行(háng),結合的特異(yì)性(xìng)大大(dà)增(zēng)加(jiā),被擴增(zēng)的靶基(jī)因(yīn)片段也就能(néng)保持很(hěn)高的正確度(dù)。再(zài)通(tōng)過選(xuǎn)擇特(tè)異性(xìng)和(hé)保守性高的靶基因(yīn)區,其(qí)特異性(xìng)程度就更高。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產物的生(shēng)成量(liáng)是(shì)以指(zhǐ)數方式增加(jiā)的(dí),能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始待測模板擴增(zēng)到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從100萬個(gè)細(xì)胞(bāo)中檢(jiǎn)出一個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞(bāo);在(zài)病毒的檢測中(zhōng),PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可(kě)達(dá)3個RFU(空斑形成單位(wèi));在(zài)細菌學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出(chū)率(shuài)為(wéi)3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便,快速(sù)
PCR反應用(yòng)耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶,一次(cì)性(xìng)地將反應液加(jiā)好後,即在DNA擴增液和水浴鍋上進(jìn)行變(biàn)性-退火-延(yán)伸反應(yīng),一(yī)般在(zài)2~4 小(xiǎo)時完(wán)成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反應(yīng)。擴增產物一(yī)般(bān)用電泳(yǒng)分(fēn)析(xī),不(bù)一定要(yào)用同位素(sù),無(wú)放(fàng)射性汙(wū)染(rǎn),易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標本的(dí)純度要求低
不(bù)需(xū)要(yào)分(fēn)離(lí)病毒或細菌及培養(yǎng)細胞(bāo),DNA 粗製(zhì)品及(jí)總(zǒng)RNA均(jūn)可(kě)作為(wéi)擴增模板(bǎn)。可直接用臨(lín)床(chuáng)標本如血液,體腔液(yè),洗嗽(sòu)液(yè),毛發(fā),細胞,活(huó)PCR技術概論(lùn)。
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