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PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒
商品屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 英(yīng)文(wén)名稱 | 貨號 |
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孟氏尖旋綫蟲(chóng)PCR檢測試劑(jì)盒 |
Oxyspirura mansoniPCR |
YS-P014552 |
分類：PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)
儲存(cún)條件：-20℃避光保存，避免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
運輸(shū)：低(dī)溫，避(bì)光。
有效期(qī)：一年(nián)
貨(huò)期(qī)：現貨(huò)PCR試劑盒(hé)的(dí)有(yǒu)效(xiào)期一(yī)般為1年(nián)，這是指在適當的儲(chǔ)存溫(wēn)度下(xià)。核酸(suān)擴增(zēng)部分的(dí)試劑一般要貯存於(yú)-20℃下(xià)，產物檢測(cè)部分試劑(jì)則貯(zhù)存(cún)於(yú)2-8℃。盡量避免反(fǎn)復(fù)凍融。
【結(jié)果(guǒ)分(fēn)析(xī)條件設定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定：將閾值(zhí)綫設定在剛(gāng)好超(chāo)過(guò)正常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質控(kòng)品擴增曲綫的最高(gāo)點。
【質(zhì)控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)的檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果(guǒ)應為陽性(xìng)，有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct值應小(xiǎo)於等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上要求需在一次實(shí)驗中同時(shí)滿(mǎn)足，否則該次(cì)實驗視(shì)為無(wú)效。
【結(jié)果(guǒ)判(pàn)斷(duàn)】
2.可(kě)疑(yí)：有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期(qī)，且38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本為(wéi)可疑(yí)樣(yàng)本(běn)；對於可疑(yí)樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議復核(hé)一次，若(ruò)復核結果Ct<40且(qiě)有指數(shù)擴增期(qī)，則判定為陽(yáng)性(xìng)，否則(zé)判(pàn)定(dìng)為陰性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指(zhǐ)數擴增(zēng)期，Ct=40或無Ct值均判定為陰(yīn)性樣(yàng)本。
【對檢(jiǎn)驗結(jié)果(guǒ)的解釋】
1. 實驗(yàn)室(shì)環(huán)境汙染，試劑汙染，樣(yàng)品交(jiāo)叉汙(wū)染(rǎn)會出(chū)現假(jiǎ)陽性結(jié)果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸，保(bǎo)存不(bù)當或(huò)試劑(jì)配製(zhì)不準(zhǔn)確引起的試(shì)劑(jì)檢測效能(néng)下降，可能會(huì)導致(zhì)出(chū)現(xiàn)假陰(yīn)性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應(yīng)的特(tè)異性：
②鹼基(jī)配對原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合(hé)成反應的(dí)忠(zhōng)實性；
④靶基(jī)因(yīn)的(dí)特異性(xìng)與(yǔ)保守(shǒu)性。
孟氏尖(jiān)旋綫蟲PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物(wù)與模(mó)板(bǎn)的正(zhèng)確(què)結(jié)合(hé)是(shì)關鍵。引物(wù)與模板(bǎn)的(dí)結(jié)合及引物(wù)鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸(shēn)是(shì)遵循(xún)鹼基配(pèi)對(duì)原(yuán)則的。聚(jù)合酶合(hé)成反應的(dí)忠實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶耐高(gāo)溫(wēn)性(xìng)，使反(fǎn)應中(zhōng)模(mó)板與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的結合(hé)(復性)可以(yǐ)在(zài)較(jiào)高(gāo)的(dí)溫度(dù)下(xià)進行(háng)，結(jié)合(hé)的特異(yì)性大(dà)大增(zēng)加，被(bèi)擴增的靶基(jī)因(yīn)片(piàn)段也(yě)就能(néng)保持很高(gāo)的正確(què)度。再通(tōng)過選擇(zé)特異性和保守性高(gāo)的靶基因區，其特(tè)異(yì)性程(chéng)度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產物的生成(chéng)量是以(yǐ)指數(shù)方(fāng)式(shì)增加的，能將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始(shǐ)待測模(mó)板(bǎn)擴增(zēng)到微(wēi)克(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個細(xì)胞(bāo)中檢出(chū)一個靶細(xì)胞；在病(bìng)毒的(dí)檢測中(zhōng)，PCR的靈敏(mǐn)度(dù)可(kě)達(dá)3個RFU(空斑形成單(dān)位)；在(zài)細菌學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出率為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反(fǎn)應(yīng)用(yòng)耐高溫的(dí)Taq DNA聚合酶，一次(cì)性地將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液(yè)加(jiā)好(hǎo)後，即(jí)在DNA擴增(zēng)液和水浴鍋(guō)上(shàng)進行(háng)變性(xìng)-退火(huǒ)-延(yán)伸反應，一(yī)般在2～4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴增(zēng)產物一(yī)般用電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析，不一定要(yào)用同(tóng)位(wèi)素，無放射(shè)性(xìng)汙染(rǎn)，易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本的(dí)純度要(yào)求低(dī)
不(bù)需(xū)要(yào)分(fēn)離(lí)病毒或細(xì)菌及(jí)培養細胞，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及總RNA均(jūn)可作為擴(kuò)增模板。可直(zhí)接用(yòng)臨(lín)床標(biāo)本(běn)如(rú)血液，體腔液，洗嗽液，毛發，細胞(bāo)，活PCR技術概(gài)論(lùn)。
