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PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
脫(tuō)氮副球菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒(hé)
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名(míng)稱 | 貨(huò)號 |
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脫氮(dàn)副球(qiú)菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé) |
Paracoccus denitrificansPCR |
YS-P014555 |
分(fēn)類:PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)
儲存(cún)條(tiáo)件:-20℃避光保存(cún),避免反復(fù)凍融(róng)。
運輸:低溫,避(bì)光。
有效(xiào)期:一(yī)年(nián)
貨期(qī):現(xiàn)貨(huò)PCR試劑盒的有效期一(yī)般為1年,這(zhè)是指在適(shì)當的(dí)儲存溫度下(xià)。核酸擴增(zēng)部分(fēn)的試劑一(yī)般要(yào)貯(zhù)存於(yú)-20℃下,產物檢測(cè)部分試(shì)劑則(zé)貯(zhù)存於2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免反復凍(dòng)融。
u 閾值(Threshold)設定(dìng):將(jiāng)閾(yù)值綫設定(dìng)在(zài)剛(gāng)好超過正常陰性質(zhì)控(kòng)品擴增曲(qū)綫的(dí)最高點。
2. 陽性質控(kòng)品(pǐn)的(dí)檢測結果應(yīng)為陽(yáng)性(xìng),有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期,Ct值應(yīng)小於(yú)等於(yú)35;
3. 以上要求需在(zài)一次實驗中同(tóng)時滿足,否(fǒu)則該(gāi)次實驗視(shì)為無(wú)效(xiào)。
2.可(kě)疑(yí):有明顯的指數(shù)擴增期,且38≤Ct<40,此(cǐ)時(shí)樣本為(wéi)可疑樣本(běn);對(duì)於(yú)可疑樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議(yì)復核一次(cì),若復核結(jié)果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴增期,則判定為陽性,否(fǒu)則(zé)判定為陰性;
3. 陰性:無指數(shù)擴增期(qī),Ct=40或無Ct值(zhí)均(jūn)判(pàn)定為陰(yīn)性樣本。
【對檢驗結果的解釋】
1. 實驗(yàn)室環境(jìng)汙染,試劑汙(wū)染(rǎn),樣(yàng)品(pǐn)交(jiāo)叉汙染會(huì)出(chū)現假陽性結(jié)果(guǒ);
2. 試(shì)劑運輸,保(bǎo)存不當或試(shì)劑配(pèi)製不準(zhǔn)確引(yǐn)起的(dí)試劑檢(jiǎn)測(cè)效能下降,可(kě)能(néng)會(huì)導(dǎo)致(zhì)出現假陰(yīn)性(xìng)結果。
②鹼基配(pèi)對原則;
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合成反應的(dí)忠(zhōng)實性(xìng);
④靶基因的特異性(xìng)與保守性。
脫(tuō)氮副(fù)球(qiú)菌(jūn)PCR檢測(cè)試(shì)劑盒其中引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的正(zhèng)確結合(hé)是(shì)關鍵(jiàn)。引(yǐn)物與模板(bǎn)的結合(hé)及引(yǐn)物鏈(liàn)的(dí)延伸(shēn)是遵循(xún)鹼基配(pèi)對(duì)原(yuán)則的。聚(jù)合酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應的忠(zhōng)實性及Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性,使反(fǎn)應(yīng)中模板與(yǔ)引(yǐn)物的(dí)結合(復(fù)性)可(kě)以在(zài)較高的溫度下進行(háng),結(jié)合(hé)的特異性(xìng)大大(dà)增加(jiā),被擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶基因片段(duàn)也就(jiù)能(néng)保持很(hěn)高(gāo)的(dí)正確度(dù)。再通過選擇(zé)特異性(xìng)和(hé)保守性(xìng)高(gāo)的靶基因區(qū),其特(tè)異性(xìng)程度就更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產物(wù)的(dí)生成量是以指數方式(shì)增加的(dí),能將皮克(kè)(pg=10-12g)量級的起始(shǐ)待(dài)測(cè)模板(bǎn)擴(kuò)增到(dào)微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從100萬(wàn)個(gè)細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出一個(gè)靶細胞(bāo);在病毒的(dí)檢測中(zhōng),PCR的靈敏度(dù)可達3個(gè)RFU(空斑(bān)形(xíng)成單(dān)位);在細菌(jūn)學中zui小檢(jiǎn)出(chū)率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn),快(kuài)速
PCR反(fǎn)應用耐(nài)高溫的(dí)Taq DNA聚合酶(méi),一(yī)次性地將(jiāng)反應液加(jiā)好後(hòu),即在DNA擴增液和水浴(yù)鍋上進(jìn)行變性-退(tuì)火(huǒ)-延(yán)伸反應,一(yī)般(bān)在(zài)2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應。擴增(zēng)產(chǎn)物(wù)一(yī)般用電(diàn)泳分(fēn)析(xī),不(bù)一定要(yào)用同位素,無放射性汙染,易推廣。
(4) 對標本(běn)的純度(dù)要求低
不(bù)需要分離病(bìng)毒或細菌(jūn)及培養細(xì)胞,DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可(kě)作為擴增模板(bǎn)。可直接(jiē)用臨床(chuáng)標(biāo)本(běn)如血(xiě)液(yè),體腔(qiāng)液(yè),洗嗽液,毛(máo)發,細胞,活PCR技術(shù)概論。
