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PCR檢測試劑盒
商(shāng)品屬性(xìng)
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱(chēng) | 英(yīng)文名稱 | 貨號 |
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同斑(bān)節對蝦杆(gān)狀(zhuàng)病(bìng)毒(dú)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒(hé) |
Penaeus Monodontype Baculovirus(MBV，WSSV)PCR |
YS-P014569 |
分類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)
儲存(cún)條件(jiàn)：-20℃避光保(bǎo)存(cún)，避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
運(yùn)輸：低溫，避(bì)光(guāng)。
有效期：一(yī)年
貨期：現(xiàn)貨PCR試劑盒的(dí)有效期一(yī)般為(wéi)1年，這(zhè)是(shì)指(zhǐ)在適當(dāng)的儲存溫(wēn)度下。核(hé)酸(suān)擴增部分(fēn)的(dí)試(shì)劑(jì)一(yī)般要貯(zhù)存於-20℃下(xià)，產物檢測部分(fēn)試劑則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量避免反復(fù)凍(dòng)融。
【結果分析條件(jiàn)設定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將閾值綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在剛(gāng)好超(chāo)過(guò)正(zhèng)常(cháng)陰(yīn)性質控(kòng)品擴增曲綫(xiàn)的(dí)最高點(diǎn)。
【質控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性質(zhì)控品的檢測(cè)結(jié)果應為(wéi)陽性，有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，Ct值(zhí)應小於(yú)等(děng)於35；
3. 以上(shàng)要(yào)求需(xū)在(zài)一(yī)次實(shí)驗中同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足(zú)，否則該次實驗視為無(wú)效。
【結果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可(kě)疑(yí)：有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增期，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本(běn)為(wéi)可(kě)疑(yí)樣(yàng)本(běn)；對於可疑樣本建(jiàn)議復(fù)核(hé)一次，若復核結果Ct<40且有(yǒu)指數(shù)擴增期(qī)，則(zé)判(pàn)定(dìng)為陽(yáng)性，否則判定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指(zhǐ)數擴增(zēng)期，Ct=40或無Ct值(zhí)均判(pàn)定為陰性(xìng)樣(yàng)本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果的解釋(shì)】
1. 實驗室環(huán)境汙染(rǎn)，試劑(jì)汙(wū)染，樣(yàng)品交(jiāo)叉汙(wū)染會(huì)出現假陽(yáng)性結(jié)果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸(shū)，保存不當或試劑(jì)配製不準確(què)引起的(dí)試(shì)劑檢測效能(néng)下降，可能會(huì)導致(zhì)出(chū)現假陰性(xìng)結果。
PCR反(fǎn)應(yīng)的特異(yì)性：
②鹼基配(pèi)對(duì)原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成反應(yīng)的(dí)忠實性；
④靶(bǎ)基因(yīn)的(dí)特異性與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性。
同斑(bān)節對蝦杆狀(zhuàng)病(bìng)毒(dú)PCR檢測試劑盒(hé)其中引物與(yǔ)模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的結合及(jí)引(yǐn)物(wù)鏈的延伸是遵(zūn)循(xún)鹼基(jī)配對原則的。聚合酶合成(chéng)反應的忠實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反(fǎn)應中模(mó)板與(yǔ)引物(wù)的(dí)結合(hé)(復性)可以(yǐ)在較(jiào)高的溫度下(xià)進(jìn)行(háng)，結(jié)合的特異(yì)性(xìng)大大(dà)增加(jiā)，被擴增的(dí)靶基因(yīn)片段也(yě)就能保持很(hěn)高的正(zhèng)確度。再通過(guò)選(xuǎn)擇特異性和(hé)保(bǎo)守性高(gāo)的靶基因區(qū)，其特(tè)異性(xìng)程(chéng)度(dù)就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產物的生成(chéng)量是(shì)以指(zhǐ)數(shù)方(fāng)式增(zēng)加的(dí)，能將皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的起始待(dài)測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從100萬(wàn)個細胞中檢出一個(gè)靶(bǎ)細胞；在病毒(dú)的檢測中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏度可達3個RFU(空(kōng)斑(bān)形成(chéng)單位)；在細菌學中zui小檢出率(shuài)為3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快(kuài)速
PCR反應用耐高(gāo)溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶(méi)，一次性(xìng)地(dì)將反應液(yè)加好後，即在(zài)DNA擴增(zēng)液和(hé)水(shuǐ)浴(yù)鍋上(shàng)進(jìn)行變(biàn)性(xìng)-退火-延伸反應，一般(bān)在(zài)2～4 小時完(wán)成(chéng)擴(kuò)增反應。擴增產物(wù)一般(bān)用電泳(yǒng)分析，不一(yī)定(dìng)要(yào)用(yòng)同位素，無放射性汙(wū)染(rǎn)，易推廣。
(4) 對標本的純度要求低(dī)
不需(xū)要(yào)分(fēn)離病毒或細菌及培(péi)養細胞，DNA 粗(cū)製(zhì)品及(jí)總RNA均(jūn)可(kě)作為擴增模(mó)板(bǎn)。可直接(jiē)用臨(lín)床標本(běn)如血液，體(tǐ)腔液，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛發(fā)，細胞，活(huó)PCR技術概論。
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