產(chǎn)品中心
PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
商(shāng)品屬(shǔ)性(xìng)
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文(wén)名(míng)稱 | 貨號 |
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肺孢(bāo)子蟲通用PCR檢測(cè)試(shì)劑盒 |
Pneumocystis spp.PCR |
YS-P014603 |
分類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒
儲存條件：-20℃避光保存(cún)，避免(miǎn)反復凍(dòng)融。
運(yùn)輸(shū)：低溫，避(bì)光。
有效(xiào)期：一(yī)年(nián)
貨期：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑(jì)盒的有效期(qī)一般為1年，這(zhè)是指(zhǐ)在(zài)適當的(dí)儲(chǔ)存溫(wēn)度下。核(hé)酸(suān)擴(kuò)增部分(fēn)的(dí)試劑(jì)一(yī)般要貯存於-20℃下(xià)，產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部(bù)分試(shì)劑則(zé)貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡量避免(miǎn)反復凍(dòng)融。
【結(jié)果(guǒ)分(fēn)析條件設(shè)定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將(jiāng)閾值綫設定在剛好超過正常陰(yīn)性質控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增曲綫的最高點。
【質控標(biāo)準】
2. 陽性質控品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測結(jié)果(guǒ)應為陽(yáng)性(xìng)，有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數擴(kuò)增期，Ct值應小於(yú)等(děng)於(yú)35；
3. 以上要求需在一(yī)次實驗中同時(shí)滿足(zú)，否則該次實驗(yàn)視為無(wú)效。
【結果(guǒ)判(pàn)斷(duàn)】
2.可疑：有(yǒu)明顯的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本為(wéi)可疑樣本；對於可疑樣(yàng)本建(jiàn)議(yì)復核(hé)一(yī)次，若復核結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指數擴增(zēng)期，則判(pàn)定為(wéi)陽性，否則判(pàn)定為(wéi)陰性；
3. 陰性(xìng)：無指數擴增期(qī)，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值(zhí)均判定(dìng)為陰性(xìng)樣本(běn)。
【對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室(shì)環境汙染，試(shì)劑(jì)汙(wū)染，樣(yàng)品交(jiāo)叉汙染會(huì)出(chū)現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑(jì)運輸，保(bǎo)存(cún)不當(dāng)或試劑配(pèi)製(zhì)不準(zhǔn)確引(yǐn)起的試(shì)劑檢(jiǎn)測(cè)效能下降，可能(néng)會導致出現假陰(yīn)性結果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的(dí)特異(yì)性：
②鹼基配(pèi)對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶(méi)合成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實性；
④靶(bǎ)基因的特(tè)異(yì)性與(yǔ)保(bǎo)守性。
肺(fèi)孢子(zǐ)蟲通(tōng)用PCR檢(jiǎn)測試劑盒其(qí)中(zhōng)引物與模板(bǎn)的正確(què)結(jié)合(hé)是(shì)關鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模板的結合(hé)及引(yǐn)物鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸是(shì)遵循鹼基配對(duì)原則(zé)的。聚合酶(méi)合成反應的(dí)忠(zhōng)實(shí)性及Taq DNA聚(jù)合酶耐高(gāo)溫(wēn)性，使(shǐ)反應(yīng)中(zhōng)模板與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的結合(復性)可以(yǐ)在(zài)較(jiào)高(gāo)的(dí)溫度(dù)下進行(háng)，結(jié)合(hé)的(dí)特異性(xìng)大大(dà)增加，被(bèi)擴(kuò)增的靶基因(yīn)片(piàn)段也就(jiù)能保持很(hěn)高的正(zhèng)確(què)度。再通過(guò)選(xuǎn)擇特異(yì)性(xìng)和保(bǎo)守性高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)區，其特異(yì)性(xìng)程度(dù)就更高(gāo)。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產(chǎn)物的生(shēng)成量(liáng)是以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方式增(zēng)加的(dí)，能將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的起(qǐ)始待測模(mó)板擴增(zēng)到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬個細(xì)胞(bāo)中檢出一個靶細胞；在(zài)病毒(dú)的檢測中(zhōng)，PCR的(dí)靈(líng)敏度可達3個(gè)RFU(空斑形成單位(wèi))；在細(xì)菌(jūn)學(xué)中zui小檢出(chū)率(shuài)為3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡便，快(kuài)速(sù)
PCR反應用(yòng)耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶，一次性(xìng)地將反(fǎn)應液加(jiā)好後，即在DNA擴增(zēng)液和水(shuǐ)浴鍋(guō)上進行變性(xìng)-退(tuì)火(huǒ)-延(yán)伸(shēn)反(fǎn)應，一般(bān)在(zài)2～4 小時(shí)完成(chéng)擴(kuò)增反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增產物一般用(yòng)電(diàn)泳分(fēn)析(xī)，不一(yī)定要用(yòng)同(tóng)位素(sù)，無放射性汙染，易推廣。
(4) 對標(biāo)本的(dí)純度(dù)要求低
不需要分(fēn)離(lí)病毒或(huò)細菌及培養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及總RNA均可作為擴(kuò)增模(mó)板(bǎn)。可直接(jiē)用臨床(chuáng)標本如血液，體腔液(yè)，洗嗽液(yè)，毛發(fā)，細(xì)胞，活PCR技術(shù)概論。
- 上(shàng)一條(tiáo)：脊(jǐ)髓灰(huī)質炎病毒型PCR檢測試劑(jì)盒
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