產(chǎn)品中心
PCR檢測試劑盒(hé)
商品(pǐn)屬性
| 產品(pǐn)名稱 | 英文(wén)名(míng)稱 | 貨號(hào) |
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脊(jǐ)髓灰(huī)質炎病毒型(xíng)PCR檢測試劑盒 |
Poliovirus 3 (PV3)3RTPCR |
YS-P014604 |
分(fēn)類：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒
儲存(cún)條件(jiàn)：-20℃避(bì)光保(bǎo)存，避(bì)免反復(fù)凍(dòng)融。
運輸：低(dī)溫，避光。
有效(xiào)期(qī)：一年
貨期：現貨PCR試劑盒的(dí)有效(xiào)期一般(bān)為1年，這是(shì)指在(zài)適當的儲(chǔ)存(cún)溫度(dù)下(xià)。核酸擴增部分的試(shì)劑一(yī)般要(yào)貯存(cún)於(yú)-20℃下(xià)，產物(wù)檢測部分(fēn)試劑則貯存(cún)於2-8℃。盡量避免反(fǎn)復凍(dòng)融。
【結(jié)果(guǒ)分(fēn)析(xī)條(tiáo)件(jiàn)設(shè)定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設定：將(jiāng)閾值綫設(shè)定(dìng)在剛好超過正(zhèng)常(cháng)陰(yīn)性質(zhì)控品(pǐn)擴增曲(qū)綫的(dí)最(zuì)高(gāo)點。
【質(zhì)控標準(zhǔn)】
2. 陽性質(zhì)控品的(dí)檢(jiǎn)測結果應(yīng)為陽(yáng)性，有明顯(xiǎn)的指數(shù)擴增期，Ct值(zhí)應小(xiǎo)於(yú)等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上要求需在一次(cì)實(shí)驗中同時滿(mǎn)足，否(fǒu)則(zé)該(gāi)次(cì)實驗視(shì)為無(wú)效(xiào)。
【結果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可疑(yí)：有明顯(xiǎn)的(dí)指數擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為可疑(yí)樣(yàng)本(běn)；對於可疑(yí)樣(yàng)本建(jiàn)議復(fù)核一次，若復核結(jié)果Ct<40且有指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，則(zé)判定(dìng)為(wéi)陽性(xìng)，否則判(pàn)定為(wéi)陰性；
3. 陰性：無指數(shù)擴增(zēng)期，Ct=40或無Ct值均(jūn)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)樣本。
【對(duì)檢驗結果的解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室環境(jìng)汙染，試(shì)劑汙(wū)染(rǎn)，樣品(pǐn)交叉(chā)汙染會出現假陽性結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑運輸，保(bǎo)存(cún)不當或試劑(jì)配(pèi)製不準確引起的試(shì)劑檢測效(xiào)能下降，可能(néng)會導(dǎo)致出現(xiàn)假(jiǎ)陰(yīn)性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反應的(dí)特(tè)異(yì)性：
②鹼基配(pèi)對原(yuán)則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合成反(fǎn)應的忠實性；
④靶基因的(dí)特異(yì)性與保(bǎo)守性(xìng)。
脊(jǐ)髓灰質炎病(bìng)毒型PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒其中引物與模(mó)板的(dí)正(zhèng)確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模(mó)板(bǎn)的結合及引物(wù)鏈(liàn)的延伸是遵循鹼基(jī)配對原則的。聚(jù)合酶(méi)合(hé)成(chéng)反應的忠(zhōng)實(shí)性及Taq DNA聚合酶(méi)耐高溫性(xìng)，使(shǐ)反應(yīng)中(zhōng)模板與引物(wù)的(dí)結(jié)合(復性)可以(yǐ)在(zài)較高的溫度(dù)下(xià)進行(háng)，結合(hé)的特(tè)異性大(dà)大增(zēng)加(jiā)，被擴增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)片(piàn)段(duàn)也就能(néng)保持(chí)很高的(dí)正確度。再(zài)通(tōng)過選(xuǎn)擇(zé)特(tè)異(yì)性(xìng)和(hé)保守(shǒu)性高(gāo)的(dí)靶基因(yīn)區，其(qí)特(tè)異性(xìng)程(chéng)度(dù)就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產物的生(shēng)成(chéng)量(liáng)是以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方式增加的，能將皮(pí)克(pg=10-12g)量級的(dí)起始(shǐ)待測(cè)模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水平。能(néng)從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一(yī)個靶(bǎ)細胞(bāo)；在病(bìng)毒的檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏度可達3個RFU(空斑(bān)形成單(dān)位(wèi))；在細菌(jūn)學中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快(kuài)速(sù)
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐高溫的Taq DNA聚合(hé)酶，一次(cì)性地(dì)將(jiāng)反應(yīng)液(yè)加好(hǎo)後(hòu)，即(jí)在DNA擴(kuò)增液(yè)和水浴(yù)鍋上進(jìn)行變性(xìng)-退(tuì)火-延伸(shēn)反應，一般在(zài)2～4 小時完(wán)成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物(wù)一般(bān)用電泳(yǒng)分析，不(bù)一(yī)定(dìng)要(yào)用同(tóng)位(wèi)素(sù)，無(wú)放(fàng)射性(xìng)汙(wū)染，易推廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的純(chún)度要(yào)求(qiú)低
不(bù)需(xū)要分離病(bìng)毒(dú)或細菌及(jí)培(péi)養細胞(bāo)，DNA 粗製品及總RNA均可作為(wéi)擴(kuò)增(zēng)模(mó)板。可直(zhí)接用臨床(chuáng)標本(běn)如血液，體腔液(yè)，洗嗽液(yè)，毛發(fā)，細(xì)胞(bāo)，活PCR技(jì)術概論(lùn)。
