產(chǎn)品中心(xīn)
PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)
商(shāng)品屬性
| 產(chǎn)品名(míng)稱 | 英文(wén)名稱(chēng) | 貨(huò)號(hào) |
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耶氏(shì)肺(fèi)孢(bāo)子蟲PCR檢測(cè)試劑盒(hé) |
Pneumocystis jirovecii PCR |
YS-P014602 |
分類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒
儲(chǔ)存(cún)條件：-20℃避光(guāng)保(bǎo)存(cún)，避免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸(shū)：低(dī)溫，避(bì)光(guāng)。
有效期(qī)：一年
貨期(qī)：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑盒(hé)的有(yǒu)效(xiào)期一般為1年，這(zhè)是指在適當的儲存(cún)溫度(dù)下(xià)。核酸擴增部分的(dí)試(shì)劑一般要貯(zhù)存(cún)於-20℃下(xià)，產物檢(jiǎn)測(cè)部分(fēn)試劑則貯存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避免(miǎn)反復凍融。
【結(jié)果(guǒ)分析(xī)條件(jiàn)設(shè)定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將(jiāng)閾(yù)值綫(xiàn)設(shè)定在剛好超(chāo)過正常(cháng)陰性(xìng)質控品(pǐn)擴增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)的最高點。
【質(zhì)控標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控品(pǐn)的(dí)檢測結果應為陽性(xìng)，有(yǒu)明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴增期，Ct值(zhí)應小於等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求需在(zài)一(yī)次(cì)實(shí)驗中同時滿(mǎn)足(zú)，否則該次(cì)實驗(yàn)視為無效(xiào)。
【結(jié)果判斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有明(míng)顯的指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣本(běn)為可(kě)疑(yí)樣(yàng)本(běn)；對(duì)於可疑樣(yàng)本(běn)建議復(fù)核一次，若(ruò)復核(hé)結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數(shù)擴增期(qī)，則判定為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，否(fǒu)則(zé)判(pàn)定(dìng)為陰性；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無(wú)指數擴增期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值均(jūn)判定為(wéi)陰性樣本。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實驗室環境汙染，試劑汙(wū)染，樣(yàng)品交叉汙染(rǎn)會出(chū)現假陽性結(jié)果；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸(shū)，保存不(bù)當或(huò)試劑配製(zhì)不(bù)準確引(yǐn)起的(dí)試(shì)劑檢(jiǎn)測效(xiào)能(néng)下降，可能會導致(zhì)出(chū)現假(jiǎ)陰性(xìng)結(jié)果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應(yīng)的(dí)特(tè)異性：
②鹼基配(pèi)對原則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合成反(fǎn)應(yīng)的忠實性；
④靶基因的特異性與(yǔ)保守性。
耶(yé)氏肺孢子蟲(chóng)PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)其中引物與模板的(dí)正確結合(hé)是關鍵(jiàn)。引物與模板的結合及(jí)引物(wù)鏈的(dí)延伸是(shì)遵循(xún)鹼基配對原則(zé)的(dí)。聚合酶合(hé)成反應(yīng)的忠(zhōng)實性及Taq DNA聚合酶(méi)耐(nài)高(gāo)溫性，使(shǐ)反應中(zhōng)模板與引(yǐn)物(wù)的(dí)結合(hé)(復性)可(kě)以(yǐ)在(zài)較高(gāo)的(dí)溫度(dù)下(xià)進(jìn)行(háng)，結合的特(tè)異性(xìng)大(dà)大增(zēng)加，被(bèi)擴(kuò)增的(dí)靶(bǎ)基(jī)因(yīn)片段也(yě)就能保持(chí)很高(gāo)的正(zhèng)確(què)度。再(zài)通過(guò)選擇特異(yì)性(xìng)和(hé)保守(shǒu)性高的(dí)靶(bǎ)基(jī)因(yīn)區，其(qí)特異性程度(dù)就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的(dí)生成(chéng)量是(shì)以指數方(fāng)式增(zēng)加(jiā)的(dí)，能(néng)將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級的(dí)起始(shǐ)待測模板(bǎn)擴(kuò)增到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬個(gè)細(xì)胞中(zhōng)檢(jiǎn)出一個(gè)靶細胞(bāo)；在(zài)病(bìng)毒(dú)的(dí)檢測中(zhōng)，PCR的靈敏(mǐn)度(dù)可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成(chéng)單位(wèi))；在(zài)細(xì)菌學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率(shuài)為(wéi)3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反應用(yòng)耐高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)，一次性(xìng)地(dì)將(jiāng)反應液(yè)加好(hǎo)後，即在(zài)DNA擴增(zēng)液(yè)和水浴鍋(guō)上(shàng)進行(háng)變性(xìng)-退(tuì)火-延伸反應，一(yī)般在(zài)2～4 小時完成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反應(yīng)。擴增產(chǎn)物(wù)一(yī)般(bān)用電(diàn)泳(yǒng)分析，不一(yī)定要用同(tóng)位(wèi)素(sù)，無(wú)放(fàng)射性汙染，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對標(biāo)本(běn)的純度(dù)要(yào)求(qiú)低
不(bù)需要(yào)分離病(bìng)毒(dú)或(huò)細菌及培養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品及(jí)總RNA均可(kě)作(zuò)為擴(kuò)增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可(kě)直接(jiē)用臨床標(biāo)本如血液(yè)，體腔(qiāng)液，洗嗽液(yè)，毛(máo)發，細胞，活(huó)PCR技(jì)術概(gài)論。
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