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PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
商(shāng)品屬性(xìng)
| 產品名稱 | 英文(wén)名(míng)稱(chēng) | 貨號(hào) |
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豬嵴(jǐ)病毒庫(kù)布(bù)病(bìng)毒PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé) |
Porcine kobuvirus（PKV）（）RTPCR |
YS-P014615 |
分類：PCR檢測(cè)試(shì)劑盒
儲存(cún)條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光保(bǎo)存(cún)，避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
運輸(shū)：低溫，避(bì)光。
有效期：一年(nián)
貨期(qī)：現貨(huò)PCR試(shì)劑盒的有(yǒu)效(xiào)期一(yī)般為1年，這是(shì)指(zhǐ)在適(shì)當(dāng)的儲(chǔ)存(cún)溫度下(xià)。核酸擴增(zēng)部分(fēn)的(dí)試(shì)劑一般要貯(zhù)存於-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢測(cè)部(bù)分試(shì)劑則貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡量避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融。
【結果(guǒ)分(fēn)析(xī)條(tiáo)件設定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將(jiāng)閾(yù)值(zhí)綫設(shè)定(dìng)在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超過正(zhèng)常(cháng)陰性(xìng)質控品擴增(zēng)曲綫的最高(gāo)點(diǎn)。
【質(zhì)控(kòng)標準】
2. 陽(yáng)性質控品的檢測(cè)結(jié)果(guǒ)應為(wéi)陽性，有(yǒu)明顯的指數擴增(zēng)期(qī)，Ct值應(yīng)小於等於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要(yào)求需在(zài)一次實(shí)驗(yàn)中同(tóng)時滿(mǎn)足，否則該次實驗(yàn)視(shì)為無效。
【結果判斷】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明顯的指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本(běn)為可疑樣(yàng)本(běn)；對於可疑(yí)樣(yàng)本(běn)建議復(fù)核一(yī)次(cì)，若復核結(jié)果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，則判定為陽性(xìng)，否(fǒu)則判定(dìng)為陰性；
3. 陰性(xìng)：無指數擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值均判定為陰(yīn)性樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結果(guǒ)的解釋】
1. 實驗(yàn)室(shì)環境汙(wū)染，試劑汙染(rǎn)，樣品交叉汙染(rǎn)會出現假(jiǎ)陽(yáng)性(xìng)結(jié)果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸，保(bǎo)存不當(dāng)或試劑配(pèi)製不準確引(yǐn)起的試(shì)劑檢測(cè)效能下降(jiàng)，可(kě)能(néng)會導(dǎo)致出現假陰性(xìng)結(jié)果。
PCR反(fǎn)應的(dí)特(tè)異性：
②鹼基配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成(chéng)反應的忠實性(xìng)；
④靶(bǎ)基(jī)因的(dí)特異(yì)性與(yǔ)保(bǎo)守性(xìng)。
豬嵴病(bìng)毒(dú)庫布病毒PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒其(qí)中引物(wù)與(yǔ)模(mó)板的(dí)正確(què)結(jié)合是(shì)關(guān)鍵。引物與(yǔ)模板的結合(hé)及(jí)引物鏈(liàn)的(dí)延伸(shēn)是(shì)遵(zūn)循鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則的(dí)。聚(jù)合酶合成(chéng)反應的忠實性及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高(gāo)溫性，使(shǐ)反應(yīng)中模板與(yǔ)引物的(dí)結合(hé)(復(fù)性)可(kě)以在較(jiào)高的(dí)溫(wēn)度下進(jìn)行(háng)，結(jié)合(hé)的(dí)特(tè)異(yì)性大(dà)大增加(jiā)，被擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶基因片段也就能保持很(hěn)高的正(zhèng)確(què)度(dù)。再通過(guò)選擇(zé)特(tè)異(yì)性和保(bǎo)守性高的(dí)靶(bǎ)基(jī)因區，其(qí)特異性程度(dù)就更高。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量(liáng)是以(yǐ)指數(shù)方式增加的，能(néng)將皮(pí)克(pg=10-12g)量級(jí)的起始(shǐ)待(dài)測(cè)模板擴增到(dào)微克(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬個細(xì)胞中檢出(chū)一(yī)個(gè)靶細胞；在(zài)病毒的(dí)檢測中(zhōng)，PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑(bān)形(xíng)成單位)；在(zài)細(xì)菌(jūn)學中zui小(xiǎo)檢出率為3個(gè)細菌。
(3) 簡便(biàn)，快速(sù)
PCR反(fǎn)應用耐(nài)高溫的(dí)Taq DNA聚合酶，一次性地(dì)將反(fǎn)應(yīng)液(yè)加好後，即在(zài)DNA擴增(zēng)液和水浴(yù)鍋上進行(háng)變性(xìng)-退火-延(yán)伸(shēn)反應，一般在2～4 小(xiǎo)時完成(chéng)擴增反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不(bù)一(yī)定要用同位素，無放射(shè)性汙(wū)染，易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標本的純(chún)度(dù)要求(qiú)低
不(bù)需要分離病(bìng)毒或細菌及培(péi)養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗(cū)製(zhì)品及(jí)總RNA均可(kě)作為擴增模板。可(kě)直接用(yòng)臨(lín)床標本如血(xiě)液，體腔液，洗嗽液，毛(máo)發(fā)，細胞，活PCR技術概論。
