產品中心
PCR檢測試劑(jì)盒
商(shāng)品屬性
| 產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
|
豬(zhū)副(fù)粘病毒PCR檢測試劑盒(hé) |
Porcine paramyxovirusRTPCR |
YS-P014616 |
分類：PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)
儲存條件：-20℃避(bì)光(guāng)保(bǎo)存，避免反(fǎn)復凍(dòng)融。
運(yùn)輸：低(dī)溫(wēn)，避(bì)光。
有效(xiào)期：一年
貨期：現貨PCR試(shì)劑(jì)盒的有效(xiào)期(qī)一般為(wéi)1年，這是指(zhǐ)在(zài)適當的儲存溫(wēn)度下(xià)。核酸擴增(zēng)部分(fēn)的試(shì)劑(jì)一般要(yào)貯存於-20℃下(xià)，產物檢(jiǎn)測部分(fēn)試劑(jì)則(zé)貯存於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
【結果(guǒ)分(fēn)析條件設(shè)定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定：將(jiāng)閾值(zhí)綫設定在(zài)剛(gāng)好超(chāo)過(guò)正(zhèng)常陰性質控品(pǐn)擴增曲綫的最高點(diǎn)。
【質(zhì)控標準(zhǔn)】
2. 陽性質控(kòng)品的檢測(cè)結果應為(wéi)陽(yáng)性，有明顯(xiǎn)的指數擴增(zēng)期，Ct值(zhí)應小於(yú)等於35；
3. 以上(shàng)要(yào)求需在(zài)一次實驗中同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足，否(fǒu)則該次(cì)實驗(yàn)視為(wéi)無(wú)效。
【結(jié)果判斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣本(běn)為可(kě)疑(yí)樣(yàng)本；對(duì)於(yú)可疑(yí)樣本建(jiàn)議(yì)復(fù)核一(yī)次，若(ruò)復核結果Ct<40且(qiě)有指數擴(kuò)增期，則判(pàn)定為(wéi)陽性，否(fǒu)則判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無(wú)指數擴增期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值均判(pàn)定為陰性樣本。
【對(duì)檢驗結果的(dí)解釋】
1. 實驗(yàn)室環境汙(wū)染，試(shì)劑汙染(rǎn)，樣(yàng)品交叉汙(wū)染(rǎn)會(huì)出現(xiàn)假(jiǎ)陽性結果；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸，保(bǎo)存(cún)不(bù)當或試(shì)劑配製不準確引(yǐn)起的試劑檢測效(xiào)能(néng)下降，可能(néng)會導(dǎo)致出(chū)現假陰(yīn)性結(jié)果。
PCR反應的特(tè)異(yì)性(xìng)：
②鹼基(jī)配對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚合酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應的忠(zhōng)實(shí)性；
④靶(bǎ)基因的(dí)特(tè)異性(xìng)與保守性。
豬副粘病毒(dú)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒其(qí)中引(yǐn)物與模(mó)板(bǎn)的(dí)正(zhèng)確結(jié)合是關鍵。引物與(yǔ)模板的(dí)結(jié)合(hé)及引物鏈(liàn)的延伸是遵循(xún)鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則(zé)的(dí)。聚(jù)合酶合成反(fǎn)應的(dí)忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶耐高溫性(xìng)，使反應中(zhōng)模(mó)板(bǎn)與引物(wù)的(dí)結(jié)合(復性)可以在(zài)較(jiào)高的溫(wēn)度(dù)下進(jìn)行，結合(hé)的(dí)特異(yì)性(xìng)大大增加，被擴增(zēng)的(dí)靶基(jī)因(yīn)片段(duàn)也(yě)就(jiù)能保持很(hěn)高的正確度(dù)。再(zài)通過選擇特異性和(hé)保(bǎo)守性(xìng)高的靶基(jī)因(yīn)區，其特(tè)異(yì)性程度就(jiù)更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成(chéng)量(liáng)是以(yǐ)指數方(fāng)式(shì)增加的(dí)，能將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的起(qǐ)始待測模(mó)板(bǎn)擴增到(dào)微克(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從100萬(wàn)個細胞(bāo)中檢(jiǎn)出一(yī)個(gè)靶細(xì)胞；在病(bìng)毒(dú)的(dí)檢測中(zhōng)，PCR的靈敏(mǐn)度可(kě)達3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形成單位(wèi))；在(zài)細菌學中zui小檢(jiǎn)出率為3個(gè)細菌。
(3) 簡便，快(kuài)速
PCR反應用耐(nài)高(gāo)溫的Taq DNA聚合(hé)酶，一(yī)次性地將反應液加好後(hòu)，即在DNA擴增液(yè)和水浴(yù)鍋上進(jìn)行變性(xìng)-退火-延(yán)伸反(fǎn)應(yīng)，一(yī)般(bān)在(zài)2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴增產物(wù)一般(bān)用電(diàn)泳分析，不一(yī)定要用(yòng)同位素(sù)，無放射性汙染，易推廣。
(4) 對標本的(dí)純(chún)度要(yào)求(qiú)低
不(bù)需(xū)要分(fēn)離(lí)病(bìng)毒(dú)或細(xì)菌(jūn)及培養細胞，DNA 粗製(zhì)品及總RNA均可作為(wéi)擴(kuò)增(zēng)模板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接用(yòng)臨床標(biāo)本(běn)如(rú)血(xiě)液(yè)，體(tǐ)腔液，洗(xǐ)嗽液，毛(máo)發，細胞，活PCR技(jì)術(shù)概(gài)論。
