產品(pǐn)中心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
商品屬性
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 英文(wén)名稱 | 貨號 |
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豬輪狀病毒(dú)通(tōng)用(yòng)PCR檢測試劑(jì)盒(hé) |
Porcine rotavirus RTPCR |
YS-P014622 |
分類：PCR檢(jiǎn)測試劑盒
儲(chǔ)存條件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保存，避免反復凍融(róng)。
運輸(shū)：低溫(wēn)，避(bì)光。
有效期(qī)：一年
貨期(qī)：現貨(huò)PCR試(shì)劑盒(hé)的(dí)有效(xiào)期一(yī)般為(wéi)1年，這是指(zhǐ)在適當的儲存溫(wēn)度下(xià)。核酸擴增(zēng)部(bù)分(fēn)的試劑一般要貯存於(yú)-20℃下，產物檢(jiǎn)測部分試劑則(zé)貯存於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
【結果分析條件(jiàn)設(shè)定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將閾值綫(xiàn)設定(dìng)在(zài)剛好(hǎo)超(chāo)過正(zhèng)常陰性(xìng)質控(kòng)品擴增曲綫(xiàn)的最高點。
【質控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性質控(kòng)品(pǐn)的檢測(cè)結果(guǒ)應(yīng)為陽(yáng)性，有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增期(qī)，Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於(yú)等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要(yào)求(qiú)需在(zài)一次實(shí)驗(yàn)中同(tóng)時滿足，否(fǒu)則該(gāi)次實(shí)驗視為無效(xiào)。
【結果判斷】
2.可疑：有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣本為可疑樣(yàng)本；對於(yú)可疑樣本(běn)建(jiàn)議(yì)復(fù)核一次，若(ruò)復核結(jié)果(guǒ)Ct<40且有指數(shù)擴增(zēng)期，則(zé)判定為(wéi)陽(yáng)性，否則(zé)判定為陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指(zhǐ)數擴增(zēng)期，Ct=40或無Ct值均判定為陰性(xìng)樣(yàng)本。
【對檢驗結(jié)果(guǒ)的(dí)解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室環境(jìng)汙(wū)染，試劑汙染(rǎn)，樣品交叉(chā)汙染(rǎn)會(huì)出(chū)現(xiàn)假陽性(xìng)結果；
2. 試(shì)劑運輸，保(bǎo)存(cún)不當(dāng)或試劑(jì)配(pèi)製(zhì)不(bù)準(zhǔn)確引(yǐn)起(qǐ)的試(shì)劑檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能下(xià)降，可能會導(dǎo)致出現(xiàn)假陰性結果(guǒ)。
PCR反應的特異性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成反應(yīng)的忠實性；
④靶(bǎ)基因(yīn)的特異性與保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)。
豬輪狀病(bìng)毒通用PCR檢(jiǎn)測試劑盒其中引(yǐn)物(wù)與模(mó)板的(dí)正確結(jié)合是關鍵(jiàn)。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸(shēn)是遵循鹼基配對原(yuán)則的。聚合(hé)酶合(hé)成反(fǎn)應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐(nài)高溫性(xìng)，使反應中(zhōng)模(mó)板與(yǔ)引物(wù)的結合(hé)(復性)可以在較高(gāo)的(dí)溫(wēn)度下(xià)進行，結合的(dí)特(tè)異性大大增加，被擴增的靶基因(yīn)片(piàn)段(duàn)也就能保持很(hěn)高的(dí)正(zhèng)確(què)度(dù)。再通(tōng)過(guò)選擇特異(yì)性(xìng)和(hé)保守(shǒu)性高的靶基(jī)因區(qū)，其(qí)特異性(xìng)程度(dù)就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度高
PCR產物的(dí)生(shēng)成量(liáng)是以(yǐ)指(zhǐ)數方(fāng)式增加的，能將皮(pí)克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測模(mó)板(bǎn)擴增到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個細(xì)胞中(zhōng)檢出一個靶(bǎ)細(xì)胞；在病(bìng)毒(dú)的檢測中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度可(kě)達3個RFU(空(kōng)斑(bān)形成單位)；在細菌學中zui小(xiǎo)檢出率(shuài)為3個(gè)細菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應用耐高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚合酶，一(yī)次(cì)性(xìng)地(dì)將反應液加(jiā)好後，即(jí)在(zài)DNA擴增(zēng)液(yè)和水(shuǐ)浴(yù)鍋上(shàng)進行(háng)變性(xìng)-退(tuì)火(huǒ)-延(yán)伸反(fǎn)應(yīng)，一(yī)般在(zài)2～4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成擴(kuò)增(zēng)反應。擴(kuò)增產(chǎn)物一(yī)般用(yòng)電(diàn)泳分析，不(bù)一定要用(yòng)同位素，無(wú)放(fàng)射性(xìng)汙(wū)染(rǎn)，易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本(běn)的純度(dù)要(yào)求(qiú)低
不(bù)需要分離病毒(dú)或細(xì)菌及(jí)培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗製品及(jí)總(zǒng)RNA均可(kě)作為(wéi)擴(kuò)增模板(bǎn)。可直接用臨(lín)床(chuáng)標本(běn)如血液(yè)，體腔(qiāng)液，洗嗽液(yè)，毛發(fā)，細胞，活PCR技術概論(lùn)。
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