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PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒(hé)
商品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產品名(míng)稱 | 英文(wén)名稱 | 貨號(hào) |
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豬輪狀(zhuàng)病毒群PCR檢測(cè)試(shì)劑盒 |
Porcine rotavirus group AARTPCR |
YS-P014621 |
分類(lèi)：PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)
儲存(cún)條(tiáo)件：-20℃避(bì)光保存，避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍融(róng)。
運(yùn)輸：低(dī)溫，避光(guāng)。
有效期(qī)：一年
貨(huò)期(qī)：現貨(huò)PCR試劑(jì)盒的(dí)有效(xiào)期(qī)一般(bān)為(wéi)1年，這是(shì)指在適(shì)當(dāng)的儲(chǔ)存溫(wēn)度(dù)下。核(hé)酸擴增(zēng)部分的(dí)試劑一般要貯(zhù)存於-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢測部(bù)分試(shì)劑(jì)則(zé)貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量避(bì)免(miǎn)反復凍融(róng)。
【結果(guǒ)分(fēn)析(xī)條(tiáo)件設定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將閾值(zhí)綫設定在(zài)剛(gāng)好超(chāo)過正常(cháng)陰(yīn)性質控品擴(kuò)增曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最高點。
【質控標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽性質控(kòng)品(pǐn)的(dí)檢測結果(guǒ)應為(wéi)陽性，有明顯的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct值(zhí)應(yīng)小於(yú)等(děng)於(yú)35；
3. 以上要求需(xū)在(zài)一次(cì)實驗(yàn)中(zhōng)同(tóng)時滿足，否則該次(cì)實驗(yàn)視為無效(xiào)。
【結果(guǒ)判斷】
2.可疑：有(yǒu)明(míng)顯的指數(shù)擴(kuò)增期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本為(wéi)可疑(yí)樣本(běn)；對於(yú)可疑(yí)樣本建(jiàn)議(yì)復核一次(cì)，若復核(hé)結果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，則判(pàn)定(dìng)為陽(yáng)性(xìng)，否則(zé)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指(zhǐ)數擴增(zēng)期，Ct=40或無Ct值均判定(dìng)為(wéi)陰性樣(yàng)本(běn)。
【對檢驗(yàn)結果的(dí)解釋】
1. 實驗室環境汙(wū)染，試(shì)劑汙染(rǎn)，樣品交叉汙(wū)染(rǎn)會(huì)出現假(jiǎ)陽性結果；
2. 試劑運輸，保存不當或(huò)試劑配製不準(zhǔn)確(què)引起(qǐ)的試(shì)劑檢測效(xiào)能(néng)下(xià)降(jiàng)，可能會導(dǎo)致(zhì)出(chū)現假陰性結(jié)果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的特異性：
②鹼基配對(duì)原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合成反(fǎn)應的忠(zhōng)實(shí)性(xìng)；
④靶基因(yīn)的(dí)特異(yì)性(xìng)與(yǔ)保守(shǒu)性(xìng)。
豬(zhū)輪(lún)狀(zhuàng)病(bìng)毒群PCR檢測(cè)試劑盒(hé)其中引物與模板的(dí)正確(què)結(jié)合(hé)是(shì)關(guān)鍵。引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模(mó)板的(dí)結(jié)合及(jí)引(yǐn)物(wù)鏈的延(yán)伸是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼基配對(duì)原則的。聚合酶(méi)合成反應的忠實性及Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐高(gāo)溫(wēn)性，使反應(yīng)中(zhōng)模板與引(yǐn)物的(dí)結(jié)合(hé)(復性(xìng))可(kě)以在(zài)較高(gāo)的(dí)溫度下進行(háng)，結合(hé)的特(tè)異性(xìng)大大增(zēng)加(jiā)，被擴(kuò)增(zēng)的靶基因(yīn)片(piàn)段也就(jiù)能(néng)保持很高(gāo)的正確度。再通過(guò)選(xuǎn)擇特異性(xìng)和保守性高(gāo)的靶(bǎ)基因(yīn)區，其(qí)特異(yì)性程度(dù)就(jiù)更高。
(2) 靈敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產(chǎn)物(wù)的生成量是以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方(fāng)式增加的，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起(qǐ)始待(dài)測模板(bǎn)擴增(zēng)到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平。能(néng)從100萬(wàn)個(gè)細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個(gè)靶(bǎ)細胞(bāo)；在(zài)病(bìng)毒的檢測(cè)中(zhōng)，PCR的靈敏度(dù)可達3個RFU(空斑(bān)形成單(dān)位)；在(zài)細(xì)菌(jūn)學中(zhōng)zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速(sù)
PCR反應用耐高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶，一(yī)次(cì)性地將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液(yè)加(jiā)好後(hòu)，即(jí)在DNA擴(kuò)增液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴鍋上(shàng)進(jìn)行變性-退火-延(yán)伸反應，一(yī)般在(zài)2～4 小(xiǎo)時完(wán)成(chéng)擴增(zēng)反應(yīng)。擴增產(chǎn)物(wù)一(yī)般(bān)用電(diàn)泳(yǒng)分析，不一(yī)定要(yào)用(yòng)同位素，無(wú)放射(shè)性汙(wū)染(rǎn)，易推廣(guǎng)。
(4) 對標本的純(chún)度要(yào)求低(dī)
不需(xū)要分(fēn)離病毒或細(xì)菌(jūn)及培養(yǎng)細胞，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及(jí)總RNA均(jūn)可作為擴增模(mó)板。可(kě)直接用臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本如(rú)血液，體腔液，洗(xǐ)嗽液(yè)，毛發，細胞(bāo)，活PCR技術概論(lùn)。
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