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PCR檢(jiǎn)測試劑盒
豬環(huán)曲病(bìng)毒(dú)PCR檢測試劑盒(hé)
| 產品(pǐn)名稱 | 英文名(míng)稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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豬(zhū)環曲病(bìng)毒PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒 |
Porcine Torovirus(PToV)RTPCR |
YS-P014627 |
分類:PCR檢測試(shì)劑盒
儲存條件:-20℃避光(guāng)保(bǎo)存(cún),避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融。
運(yùn)輸(shū):低(dī)溫,避(bì)光。
有效(xiào)期(qī):一(yī)年
貨期:現(xiàn)貨PCR試劑盒(hé)的有(yǒu)效期(qī)一(yī)般為1年,這是指在適(shì)當的儲存(cún)溫度下。核酸擴增部分(fēn)的(dí)試劑一(yī)般要貯存(cún)於(yú)-20℃下(xià),產物檢(jiǎn)測(cè)部(bù)分試劑則(zé)貯存於2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免反(fǎn)復凍(dòng)融。
u 閾值(Threshold)設(shè)定:將(jiāng)閾(yù)值(zhí)綫設定在剛好(hǎo)超(chāo)過(guò)正常陰性(xìng)質控(kòng)品擴增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)的最高(gāo)點(diǎn)。
2. 陽(yáng)性質控品的檢(jiǎn)測結(jié)果應(yīng)為陽(yáng)性(xìng),有明顯的(dí)指(zhǐ)數擴增期(qī),Ct值應小於等於35;
3. 以上要求需(xū)在一(yī)次(cì)實驗(yàn)中同(tóng)時滿足(zú),否則(zé)該次實驗視為無效(xiào)。
2.可(kě)疑:有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數(shù)擴增期,且38≤Ct<40,此時(shí)樣本(běn)為可疑(yí)樣本;對(duì)於(yú)可(kě)疑(yí)樣本(běn)建議復核(hé)一次,若復核結(jié)果Ct<40且(qiě)有指數(shù)擴增期(qī),則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陽(yáng)性,否則判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性(xìng);
3. 陰性:無(wú)指(zhǐ)數擴增期,Ct=40或無Ct值均判定為(wéi)陰性樣本(běn)。
【對(duì)檢驗(yàn)結果的解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室(shì)環境汙(wū)染,試劑汙染,樣(yàng)品(pǐn)交叉(chā)汙染(rǎn)會(huì)出現(xiàn)假(jiǎ)陽性(xìng)結(jié)果(guǒ);
2. 試劑運(yùn)輸,保存不(bù)當(dāng)或試劑配製(zhì)不(bù)準(zhǔn)確引起的(dí)試劑(jì)檢測效能下降(jiàng),可能(néng)會(huì)導致(zhì)出現假(jiǎ)陰性結(jié)果。
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對原(yuán)則(zé);
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的忠實性;
④靶(bǎ)基因(yīn)的(dí)特異性與保(bǎo)守(shǒu)性。
豬環曲病毒(dú)PCR檢測試(shì)劑盒其(qí)中引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的正(zhèng)確(què)結合(hé)是關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物與(yǔ)模(mó)板的(dí)結合及(jí)引(yǐn)物鏈的延(yán)伸是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼(jiǎn)基(jī)配對原(yuán)則的(dí)。聚合酶合成(chéng)反(fǎn)應的忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高溫(wēn)性(xìng),使反(fǎn)應(yīng)中模(mó)板與引(yǐn)物(wù)的(dí)結(jié)合(hé)(復(fù)性)可以在較(jiào)高的溫度下進行,結合的特(tè)異(yì)性大(dà)大增(zēng)加,被擴(kuò)增的靶基(jī)因(yīn)片段(duàn)也就能保持很(hěn)高的(dí)正(zhèng)確度。再通過(guò)選(xuǎn)擇特異性和保守性高的靶基因(yīn)區,其特(tè)異(yì)性程度就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度(dù)高
PCR產(chǎn)物的生成(chéng)量(liáng)是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方式增(zēng)加的,能(néng)將皮(pí)克(pg=10-12g)量級的起始(shǐ)待測模板(bǎn)擴增到微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從(cóng)100萬個細胞中檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個靶(bǎ)細(xì)胞;在病毒的(dí)檢(jiǎn)測中,PCR的(dí)靈(líng)敏度(dù)可達3個RFU(空(kōng)斑(bān)形成(chéng)單(dān)位(wèi));在細菌(jūn)學(xué)中zui小檢(jiǎn)出(chū)率為(wéi)3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn),快(kuài)速
PCR反(fǎn)應用耐(nài)高溫的Taq DNA聚(jù)合酶,一次性地將(jiāng)反(fǎn)應液加(jiā)好後,即在(zài)DNA擴增(zēng)液和(hé)水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進(jìn)行(háng)變性-退火-延(yán)伸(shēn)反應(yīng),一般在(zài)2~4 小時(shí)完成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反應。擴增(zēng)產物(wù)一般用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分析(xī),不一(yī)定(dìng)要用同(tóng)位(wèi)素,無(wú)放(fàng)射性(xìng)汙染,易推廣。
(4) 對標本(běn)的純度要(yào)求低
不需要(yào)分(fēn)離病(bìng)毒或細菌及(jí)培養細胞,DNA 粗製品及(jí)總RNA均(jūn)可(kě)作為擴(kuò)增(zēng)模板。可直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨床(chuáng)標(biāo)本如血(xiě)液,體(tǐ)腔(qiāng)液(yè),洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè),毛發,細胞(bāo),活PCR技(jì)術概(gài)論。
- 上(shàng)一條(tiáo):豬(zhū)傳染性腹(fù)瀉(xiè)病(bìng)毒(dú)
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