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PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒
商品(pǐn)屬性
| 產品名稱 | 英文(wén)名稱 | 貨號 |
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豬捷(jié)申病毒PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒 |
Porcine Teschovirus(PTV)RTPCR |
YS-P014626 |
分(fēn)類：PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒
儲存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避(bì)光保存，避(bì)免(miǎn)反復凍融。
運輸：低溫(wēn)，避光。
有效(xiào)期(qī)：一(yī)年(nián)
貨期(qī)：現(xiàn)貨PCR試劑盒的有(yǒu)效期一般為1年，這(zhè)是(shì)指(zhǐ)在適當的(dí)儲存溫度下。核(hé)酸擴(kuò)增(zēng)部分的試劑(jì)一(yī)般(bān)要貯(zhù)存(cún)於(yú)-20℃下(xià)，產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部分試劑(jì)則貯存於(yú)2-8℃。盡量避免反復凍融。
【結果分(fēn)析條(tiáo)件設定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將閾值綫設(shè)定在(zài)剛好(hǎo)超(chāo)過(guò)正常(cháng)陰性(xìng)質控(kòng)品擴增(zēng)曲(qū)綫的最高點(diǎn)。
【質控標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性質控品的(dí)檢測(cè)結(jié)果應(yīng)為(wéi)陽性，有(yǒu)明(míng)顯的(dí)指數擴(kuò)增期，Ct值應小(xiǎo)於等於(yú)35；
3. 以上(shàng)要求需(xū)在(zài)一(yī)次(cì)實(shí)驗(yàn)中(zhōng)同(tóng)時滿(mǎn)足(zú)，否則該次實(shí)驗(yàn)視為(wéi)無(wú)效(xiào)。
【結果判(pàn)斷(duàn)】
2.可疑：有明(míng)顯(xiǎn)的指數(shù)擴增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本為可疑樣(yàng)本；對於(yú)可疑樣本建議復核一次，若復(fù)核結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，則(zé)判(pàn)定(dìng)為陽(yáng)性(xìng)，否(fǒu)則(zé)判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性；
3. 陰性(xìng)：無指數擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或無Ct值均判(pàn)定為陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗結果的解(jiě)釋】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境汙染，試劑汙染，樣品交叉(chā)汙染(rǎn)會出現假(jiǎ)陽(yáng)性結(jié)果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運輸，保存不當(dāng)或試劑配製(zhì)不準確(què)引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試劑檢測效能(néng)下降，可(kě)能會導致出現假(jiǎ)陰性(xìng)結果。
PCR反(fǎn)應(yīng)的(dí)特異(yì)性(xìng)：
②鹼基(jī)配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合成(chéng)反應的(dí)忠實性；
④靶基因的特(tè)異性與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性。
豬(zhū)捷申(shēn)病毒(dú)PCR檢測試(shì)劑(jì)盒其中(zhōng)引(yǐn)物與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的(dí)正(zhèng)確(què)結(jié)合(hé)是關(guān)鍵(jiàn)。引物(wù)與模板(bǎn)的結合及引(yǐn)物鏈(liàn)的延(yán)伸是遵循鹼基配對原則的(dí)。聚合(hé)酶(méi)合成反應的(dí)忠(zhōng)實(shí)性及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐高(gāo)溫(wēn)性(xìng)，使反應中(zhōng)模板與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的結(jié)合(復(fù)性)可(kě)以在較高(gāo)的(dí)溫度(dù)下進行(háng)，結合的特異性大大增(zēng)加(jiā)，被擴增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)片段(duàn)也(yě)就(jiù)能保(bǎo)持很(hěn)高(gāo)的正確度。再通過選擇特異性(xìng)和(hé)保守性高的靶基因(yīn)區(qū)，其(qí)特(tè)異性(xìng)程度就更(gēng)高。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產物的生成(chéng)量是(shì)以(yǐ)指數(shù)方式(shì)增加的，能將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始待測(cè)模板(bǎn)擴(kuò)增到(dào)微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從100萬(wàn)個細(xì)胞(bāo)中檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個靶細胞(bāo)；在病(bìng)毒(dú)的檢測中(zhōng)，PCR的(dí)靈(líng)敏度可(kě)達3個RFU(空(kōng)斑形(xíng)成(chéng)單(dān)位(wèi))；在細(xì)菌學中zui小(xiǎo)檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速
PCR反應用耐(nài)高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚合酶(méi)，一(yī)次(cì)性(xìng)地(dì)將(jiāng)反應(yīng)液加好(hǎo)後(hòu)，即在(zài)DNA擴增(zēng)液和(hé)水(shuǐ)浴鍋(guō)上進(jìn)行(háng)變(biàn)性-退(tuì)火-延(yán)伸反(fǎn)應(yīng)，一(yī)般(bān)在(zài)2～4 小時(shí)完成擴增反應(yīng)。擴(kuò)增產物(wù)一(yī)般用(yòng)電泳分(fēn)析(xī)，不一定(dìng)要用同(tóng)位素(sù)，無(wú)放(fàng)射性(xìng)汙(wū)染，易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度(dù)要求(qiú)低
不(bù)需要分離(lí)病毒或(huò)細(xì)菌(jūn)及(jí)培養細胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品及(jí)總RNA均可(kě)作(zuò)為擴增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨床標本如血(xiě)液，體腔液，洗(xǐ)嗽液，毛發，細(xì)胞(bāo)，活(huó)PCR技(jì)術(shù)概(gài)論(lùn)。
