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PCR檢測(cè)試劑(jì)盒
| 產品名(míng)稱 | 英(yīng)文(wén)名(míng)稱 | 貨(huò)號 |
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豬傳染性腹瀉病毒 |
Porcine Transmissible Gasteroenteritis Virus(TGEV) |
YS-P014628 |
分類:PCR檢測(cè)試劑(jì)盒
儲(chǔ)存條(tiáo)件:-20℃避(bì)光保(bǎo)存,避免(miǎn)反復凍融。
運輸(shū):低溫,避光。
有(yǒu)效期:一年
貨期:現貨PCR試劑(jì)盒(hé)的有(yǒu)效期(qī)一般為1年(nián),這(zhè)是指在適(shì)當(dāng)的(dí)儲(chǔ)存溫度(dù)下。核(hé)酸(suān)擴增部(bù)分的(dí)試劑一(yī)般(bān)要貯存(cún)於(yú)-20℃下,產物檢(jiǎn)測(cè)部(bù)分(fēn)試(shì)劑(jì)則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免反(fǎn)復凍融。
u 閾值(zhí)(Threshold)設定:將閾值(zhí)綫設定(dìng)在剛好(hǎo)超(chāo)過正常陰(yīn)性(xìng)質控品擴(kuò)增曲綫的最高(gāo)點。
2. 陽(yáng)性質控品的檢(jiǎn)測結果(guǒ)應為陽(yáng)性,有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī),Ct值應小於等於35;
3. 以(yǐ)上(shàng)要(yào)求(qiú)需在一(yī)次實驗中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足(zú),否則該次實驗視為無效。
2.可疑(yí):有明顯的指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期,且38≤Ct<40,此(cǐ)時樣本(běn)為可疑(yí)樣本;對於可疑樣(yàng)本建議復(fù)核一次,若(ruò)復(fù)核(hé)結(jié)果(guǒ)Ct<40且有指(zhǐ)數擴增期,則判定為陽性,否(fǒu)則判(pàn)定為陰性(xìng);
3. 陰性:無指數擴增(zēng)期(qī),Ct=40或無(wú)Ct值均判(pàn)定(dìng)為陰性樣本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結(jié)果(guǒ)的(dí)解釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室環境汙染(rǎn),試(shì)劑(jì)汙染(rǎn),樣品(pǐn)交叉(chā)汙染(rǎn)會(huì)出現假陽(yáng)性結果;
2. 試(shì)劑運(yùn)輸,保存(cún)不當(dāng)或(huò)試(shì)劑配製(zhì)不(bù)準(zhǔn)確引起的試劑(jì)檢(jiǎn)測效(xiào)能(néng)下降(jiàng),可能會導致出現(xiàn)假(jiǎ)陰性(xìng)結果。
②鹼基配對原(yuán)則;
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)合(hé)成反應的忠(zhōng)實(shí)性;
④靶(bǎ)基因的特異(yì)性(xìng)與(yǔ)保守(shǒu)性(xìng)。
豬(zhū)傳(chuán)染性腹(fù)瀉病毒(dú)其中(zhōng)引物(wù)與(yǔ)模板的正(zhèng)確結(jié)合(hé)是(shì)關鍵。引物(wù)與模(mó)板的結合(hé)及引物鏈(liàn)的延伸(shēn)是遵循(xún)鹼基(jī)配(pèi)對原(yuán)則的。聚合酶合成反應的忠(zhōng)實(shí)性及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶耐高(gāo)溫性(xìng),使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中模板與引(yǐn)物(wù)的結合(復性(xìng))可以在較(jiào)高的溫(wēn)度下(xià)進(jìn)行(háng),結(jié)合(hé)的特異(yì)性大大(dà)增加,被擴增(zēng)的靶基(jī)因片(piàn)段(duàn)也就能保(bǎo)持很(hěn)高的(dí)正確度(dù)。再(zài)通(tōng)過(guò)選擇(zé)特(tè)異性和(hé)保守(shǒu)性(xìng)高(gāo)的(dí)靶基因(yīn)區,其特異性程度就更高。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產(chǎn)物(wù)的生(shēng)成量是以指(zhǐ)數(shù)方(fāng)式(shì)增(zēng)加(jiā)的(dí),能(néng)將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量級的起始待(dài)測模板(bǎn)擴增(zēng)到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞(bāo)中(zhōng)檢出一(yī)個(gè)靶細胞;在(zài)病(bìng)毒(dú)的(dí)檢測中,PCR的靈(líng)敏度(dù)可(kě)達3個RFU(空斑形成(chéng)單位);在(zài)細(xì)菌學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出率為3個(gè)細菌。
(3) 簡便(biàn),快(kuài)速
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐(nài)高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶,一(yī)次性地將(jiāng)反(fǎn)應液加好(hǎo)後,即(jí)在DNA擴增(zēng)液和(hé)水(shuǐ)浴(yù)鍋上進(jìn)行(háng)變性(xìng)-退(tuì)火(huǒ)-延(yán)伸(shēn)反應(yīng),一般(bān)在(zài)2~4 小時完成擴增(zēng)反應。擴增產(chǎn)物一般(bān)用(yòng)電泳分(fēn)析,不一(yī)定要用(yòng)同位素,無放(fàng)射(shè)性汙(wū)染(rǎn),易推廣。
(4) 對標(biāo)本的(dí)純度(dù)要(yào)求(qiú)低
不(bù)需要分(fēn)離病(bìng)毒(dú)或細菌(jūn)及(jí)培養細胞(bāo),DNA 粗(cū)製品及(jí)總RNA均可作(zuò)為擴增模(mó)板。可(kě)直(zhí)接用臨床標(biāo)本(běn)如血液,體腔(qiāng)液(yè),洗嗽(sòu)液(yè),毛發,細(xì)胞,活PCR技(jì)術概論。
- 上(shàng)一(yī)條(tiáo):牙(yá)齦卟啉單胞(bāo)菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
- 下(xià)一條(tiáo):豬環(huán)曲病(bìng)毒PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
