產品中心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒
商(shāng)品(pǐn)屬(shǔ)性(xìng)
| 產品名(míng)稱(chēng) | 英(yīng)文名稱 | 貨號 |
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隱襲腐黴(méi)PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé) |
Pythium insidiosumPCR |
YS-P014655 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒
儲存(cún)條件：-20℃避光保存(cún)，避免反(fǎn)復凍融。
運(yùn)輸(shū)：低(dī)溫(wēn)，避光(guāng)。
有(yǒu)效期(qī)：一年
貨期(qī)：現貨(huò)PCR試(shì)劑(jì)盒的(dí)有效(xiào)期(qī)一(yī)般為1年，這(zhè)是指(zhǐ)在適當的儲(chǔ)存(cún)溫度下(xià)。核酸擴增部分的試劑一般要(yào)貯存(cún)於(yú)-20℃下(xià)，產物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部(bù)分試劑(jì)則貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量避免反(fǎn)復凍融。
【結果分(fēn)析條(tiáo)件設定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將(jiāng)閾值綫(xiàn)設(shè)定在剛好(hǎo)超過(guò)正常陰性質(zhì)控(kòng)品擴(kuò)增曲綫的最(zuì)高(gāo)點(diǎn)。
【質(zhì)控標準】
2. 陽性質控(kòng)品的檢測結果應為陽(yáng)性，有(yǒu)明(míng)顯的(dí)指數擴增期，Ct值應(yīng)小於(yú)等於35；
3. 以(yǐ)上要求需在一次實驗(yàn)中(zhōng)同時滿足(zú)，否(fǒu)則該次實驗視為(wéi)無(wú)效。
【結(jié)果(guǒ)判斷】
2.可(kě)疑：有明顯的指數擴增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本為(wéi)可(kě)疑(yí)樣(yàng)本；對於可(kě)疑(yí)樣(yàng)本建議復(fù)核(hé)一次(cì)，若復核結(jié)果Ct<40且有指數擴增期，則(zé)判定為(wéi)陽性，否(fǒu)則判(pàn)定為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰(yīn)性：無指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性樣本。
【對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗室(shì)環境(jìng)汙染，試劑(jì)汙染(rǎn)，樣品交(jiāo)叉(chā)汙染會(huì)出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性結果；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸(shū)，保存不當或(huò)試(shì)劑(jì)配製(zhì)不準確(què)引(yǐn)起的試劑(jì)檢(jiǎn)測效能下(xià)降，可能(néng)會(huì)導(dǎo)致出現假陰(yīn)性結果。
PCR反應的(dí)特異(yì)性：
②鹼基(jī)配對原則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合(hé)成反應的(dí)忠(zhōng)實(shí)性(xìng)；
④靶基因的(dí)特異(yì)性與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性。
隱襲(xí)腐黴(méi)PCR檢測試劑(jì)盒(hé)其中(zhōng)引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的正確結合是(shì)關鍵。引(yǐn)物與模板(bǎn)的(dí)結合(hé)及(jí)引物鏈的延(yán)伸是遵(zūn)循(xún)鹼基配對(duì)原(yuán)則(zé)的(dí)。聚合酶合(hé)成反(fǎn)應的(dí)忠實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚合酶耐高(gāo)溫性(xìng)，使(shǐ)反應(yīng)中模(mó)板與引物的結合(復性)可(kě)以在(zài)較高的溫度下(xià)進行，結合(hé)的(dí)特異性(xìng)大(dà)大增(zēng)加，被擴增(zēng)的靶基因(yīn)片(piàn)段也就能(néng)保持很高(gāo)的(dí)正確度(dù)。再(zài)通(tōng)過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特異性(xìng)和保(bǎo)守性高的(dí)靶基因區，其特(tè)異(yì)性(xìng)程(chéng)度就(jiù)更高。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產物(wù)的(dí)生成(chéng)量是以(yǐ)指數方式(shì)增(zēng)加(jiā)的(dí)，能將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的起(qǐ)始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬(wàn)個細(xì)胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出一(yī)個靶細胞(bāo)；在病毒(dú)的檢測中，PCR的靈敏度(dù)可達3個(gè)RFU(空斑形成(chéng)單位)；在細(xì)菌學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出率(shuài)為3個細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應(yīng)用(yòng)耐(nài)高溫的Taq DNA聚合酶(méi)，一(yī)次性地將反(fǎn)應液加好(hǎo)後，即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增液和(hé)水浴(yù)鍋上進行(háng)變性-退(tuì)火(huǒ)-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成(chéng)擴增反(fǎn)應。擴(kuò)增產(chǎn)物(wù)一般(bān)用電(diàn)泳分(fēn)析(xī)，不(bù)一定(dìng)要(yào)用同位素，無(wú)放射性(xìng)汙(wū)染(rǎn)，易推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本(běn)的純(chún)度要(yào)求低
不需(xū)要分(fēn)離病(bìng)毒(dú)或細(xì)菌(jūn)及(jí)培(péi)養(yǎng)細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製品及(jí)總(zǒng)RNA均可作為擴增模板(bǎn)。可(kě)直接用(yòng)臨(lín)床標(biāo)本如血液，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗嗽(sòu)液(yè)，毛發(fā)，細胞，活(huó)PCR技(jì)術(shù)概論(lùn)。
