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PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒(hé)
商(shāng)品屬(shǔ)性(xìng)
| 產品(pǐn)名(míng)稱 | 英文名(míng)稱 | 貨號 |
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有輪瑞氏縧(tāo)蟲(chóng)PCR檢測試劑盒(hé) |
Raillietina cesticillusPCR |
YS-P014664 |
分類：PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
儲(chǔ)存條件(jiàn)：-20℃避(bì)光保存(cún)，避(bì)免反復(fù)凍融(róng)。
運輸(shū)：低溫，避光。
有效(xiào)期：一(yī)年
貨期(qī)：現貨(huò)PCR試劑盒的有效期一般為1年，這是(shì)指在適(shì)當(dāng)的(dí)儲存溫(wēn)度下(xià)。核(hé)酸擴增(zēng)部分(fēn)的試(shì)劑(jì)一(yī)般要貯存(cún)於-20℃下(xià)，產物(wù)檢測(cè)部分試劑則貯(zhù)存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免(miǎn)反復(fù)凍融(róng)。
【結果分析條件設定(dìng)】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將閾(yù)值綫(xiàn)設定在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超過正(zhèng)常陰性(xìng)質控品擴增(zēng)曲綫的最高(gāo)點。
【質控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測結(jié)果應為陽性，有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指數擴增(zēng)期(qī)，Ct值應小(xiǎo)於(yú)等於35；
3. 以上要求需(xū)在(zài)一次實驗(yàn)中(zhōng)同時滿(mǎn)足，否則該(gāi)次(cì)實驗(yàn)視(shì)為(wéi)無效。
【結果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本為(wéi)可疑樣本(běn)；對(duì)於(yú)可疑樣本建議復核(hé)一(yī)次，若(ruò)復核結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，則(zé)判(pàn)定為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，否則判(pàn)定為陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無(wú)指數擴增期(qī)，Ct=40或無Ct值(zhí)均(jūn)判定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)樣(yàng)本。
【對檢驗結(jié)果的(dí)解釋(shì)】
1. 實(shí)驗室環境(jìng)汙(wū)染(rǎn)，試劑(jì)汙染，樣(yàng)品交叉汙(wū)染(rǎn)會出現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性結果；
2. 試劑(jì)運輸(shū)，保(bǎo)存(cún)不(bù)當或試(shì)劑配(pèi)製(zhì)不(bù)準確引起的試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測效(xiào)能下降(jiàng)，可(kě)能會導(dǎo)致出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陰性(xìng)結果。
PCR反應的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)：
②鹼基配(pèi)對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚合酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實(shí)性(xìng)；
④靶(bǎ)基因(yīn)的特(tè)異(yì)性與保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)。
有輪(lún)瑞氏縧(tāo)蟲PCR檢測試劑(jì)盒(hé)其(qí)中(zhōng)引物與模板(bǎn)的正確(què)結合(hé)是(shì)關鍵。引(yǐn)物與(yǔ)模(mó)板的結合(hé)及引物(wù)鏈(liàn)的延(yán)伸是(shì)遵循(xún)鹼基(jī)配對原則的。聚合酶(méi)合成(chéng)反應的(dí)忠(zhōng)實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚合(hé)酶耐高(gāo)溫性，使(shǐ)反應(yīng)中模(mó)板(bǎn)與引物的(dí)結(jié)合(復性)可(kě)以在(zài)較高(gāo)的溫度下進行(háng)，結合的(dí)特(tè)異(yì)性大(dà)大(dà)增加，被擴增的(dí)靶基因片(piàn)段也(yě)就(jiù)能(néng)保(bǎo)持很高(gāo)的(dí)正(zhèng)確度。再通過選(xuǎn)擇特(tè)異(yì)性和保守(shǒu)性高(gāo)的靶(bǎ)基因區，其特(tè)異性程度(dù)就更高。
(2) 靈敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產物的生成(chéng)量(liáng)是以指(zhǐ)數(shù)方式增加(jiā)的，能將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測模板(bǎn)擴增(zēng)到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞；在病毒(dú)的檢測中，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可達3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形成單位)；在細(xì)菌(jūn)學中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出(chū)率(shuài)為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便，快速
PCR反(fǎn)應(yīng)用(yòng)耐高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶(méi)，一(yī)次(cì)性地將反應(yīng)液(yè)加(jiā)好(hǎo)後(hòu)，即在DNA擴(kuò)增(zēng)液和(hé)水浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進行變(biàn)性-退火-延(yán)伸反(fǎn)應，一般(bān)在(zài)2～4 小(xiǎo)時完成擴增(zēng)反應(yīng)。擴(kuò)增(zēng)產(chǎn)物一般用電(diàn)泳分析(xī)，不一(yī)定要用同(tóng)位素(sù)，無(wú)放射(shè)性汙(wū)染(rǎn)，易(yì)推廣。
(4) 對標(biāo)本(běn)的純度(dù)要求(qiú)低
不(bù)需(xū)要(yào)分離病毒或(huò)細(xì)菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗製品及總RNA均(jūn)可作為擴(kuò)增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可(kě)直接用臨床(chuáng)標(biāo)本如血(xiě)液，體腔液，洗嗽液(yè)，毛(máo)發(fā)，細胞，活PCR技(jì)術概論。
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