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PCR檢測試劑盒
| 產(chǎn)品名(míng)稱(chēng) | 英文(wén)名(míng)稱 | 貨號(hào) |
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鮭腎(shèn)杆菌PCR檢(jiǎn)測試劑盒 |
Renibacterium salmoninarumPCR |
YS-P014672 |
分類:PCR檢(jiǎn)測試劑盒
儲存(cún)條件(jiàn):-20℃避光(guāng)保存,避免反(fǎn)復凍(dòng)融。
運輸:低溫,避(bì)光。
有效期(qī):一(yī)年(nián)
貨(huò)期:現貨(huò)PCR試劑盒的有(yǒu)效期一般為(wéi)1年(nián),這(zhè)是指(zhǐ)在適(shì)當(dāng)的(dí)儲(chǔ)存溫度下。核酸擴增部分(fēn)的試劑一(yī)般要(yào)貯(zhù)存於(yú)-20℃下,產(chǎn)物(wù)檢測(cè)部(bù)分試劑則貯存於(yú)2-8℃。盡量避(bì)免反復(fù)凍(dòng)融。
u 閾值(Threshold)設(shè)定(dìng):將閾值(zhí)綫(xiàn)設(shè)定在(zài)剛好(hǎo)超過(guò)正常(cháng)陰性質控(kòng)品(pǐn)擴增曲綫(xiàn)的最高點(diǎn)。
2. 陽(yáng)性質控品(pǐn)的(dí)檢測(cè)結(jié)果應為陽(yáng)性,有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數擴(kuò)增期,Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於等於(yú)35;
3. 以(yǐ)上(shàng)要(yào)求需在(zài)一次實驗中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿足,否則該次實驗(yàn)視為無效。
2.可(kě)疑:有明(míng)顯的(dí)指數擴(kuò)增期,且38≤Ct<40,此時樣(yàng)本為(wéi)可疑樣(yàng)本;對於可疑樣(yàng)本建議復(fù)核(hé)一次(cì),若(ruò)復核(hé)結(jié)果Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數擴增期(qī),則判(pàn)定為(wéi)陽性,否(fǒu)則判(pàn)定為陰(yīn)性;
3. 陰(yīn)性(xìng):無(wú)指數擴增(zēng)期,Ct=40或無(wú)Ct值均判(pàn)定為陰性樣本。
【對檢驗結(jié)果的解釋(shì)】
1. 實驗室環(huán)境汙染,試(shì)劑汙染(rǎn),樣品交叉汙染會出(chū)現假陽性(xìng)結(jié)果;
2. 試劑運(yùn)輸(shū),保存(cún)不當或試劑配製不準確(què)引起(qǐ)的試劑檢測(cè)效能(néng)下降,可(kě)能會導致(zhì)出(chū)現假陰性結(jié)果。
②鹼基(jī)配對原則(zé);
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實(shí)性(xìng);
④靶(bǎ)基因的特異性(xìng)與保(bǎo)守性(xìng)。
鮭(guī)腎杆菌PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒其(qí)中(zhōng)引物(wù)與模板的(dí)正(zhèng)確(què)結(jié)合是(shì)關(guān)鍵。引(yǐn)物與模板的結(jié)合(hé)及(jí)引物鏈的(dí)延(yán)伸(shēn)是(shì)遵(zūn)循鹼基配(pèi)對原則(zé)的(dí)。聚(jù)合(hé)酶合成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實性及Taq DNA聚合酶(méi)耐高(gāo)溫性,使反應中模板(bǎn)與(yǔ)引(yǐn)物的結合(hé)(復(fù)性)可(kě)以在(zài)較高(gāo)的(dí)溫(wēn)度下(xià)進行,結(jié)合的特異性大大增加(jiā),被(bèi)擴增的靶基(jī)因(yīn)片段(duàn)也(yě)就(jiù)能保持很(hěn)高(gāo)的(dí)正(zhèng)確(què)度。再通(tōng)過選(xuǎn)擇特(tè)異(yì)性(xìng)和保守性(xìng)高(gāo)的靶基(jī)因(yīn)區(qū),其特異性(xìng)程(chéng)度就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產(chǎn)物(wù)的(dí)生成量(liáng)是(shì)以指數(shù)方(fāng)式增加的(dí),能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級的(dí)起始(shǐ)待(dài)測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從100萬個(gè)細胞中檢(jiǎn)出一(yī)個靶細(xì)胞;在病毒(dú)的(dí)檢測中(zhōng),PCR的靈(líng)敏(mǐn)度可達3個(gè)RFU(空斑形成單(dān)位);在細(xì)菌學(xué)中zui小(xiǎo)檢出(chū)率為3個(gè)細菌。
(3) 簡便,快速(sù)
PCR反應(yīng)用耐高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶(méi),一(yī)次性地將反應液(yè)加(jiā)好(hǎo)後,即(jí)在DNA擴增(zēng)液和水浴(yù)鍋上進(jìn)行變性-退(tuì)火-延(yán)伸(shēn)反應,一(yī)般(bān)在(zài)2~4 小(xiǎo)時完成(chéng)擴增反(fǎn)應。擴增產(chǎn)物(wù)一(yī)般(bān)用電泳分析(xī),不一定(dìng)要用同位素(sù),無(wú)放射性汙(wū)染(rǎn),易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本的(dí)純度要(yào)求低(dī)
不需(xū)要分離病(bìng)毒或細菌及培(péi)養(yǎng)細胞,DNA 粗製品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可作為擴增(zēng)模板(bǎn)。可直接(jiē)用(yòng)臨床標本如(rú)血液,體腔液,洗嗽液,毛發(fā),細胞(bāo),活PCR技術(shù)概(gài)論。
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