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PCR檢(jiǎn)測試劑盒
呼(hū)吸道(dào)合(hé)胞(bāo)病毒(dú)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
商(shāng)品屬性(xìng)
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 英(yīng)文(wén)名稱 | 貨(huò)號 |
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呼吸道(dào)合(hé)胞病(bìng)毒PCR檢測(cè)試劑盒 |
Respiratory Syncytial Virus(RSV)RTPCR |
YS-P014673 |
分類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒
儲存條件(jiàn)：-20℃避(bì)光保存(cún)，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低(dī)溫(wēn)，避(bì)光(guāng)。
有效(xiào)期：一(yī)年(nián)
貨(huò)期：現貨(huò)PCR試(shì)劑(jì)盒的(dí)有效(xiào)期一(yī)般為1年，這是指在適當的(dí)儲(chǔ)存溫度下。核酸(suān)擴(kuò)增部(bù)分的試劑一般(bān)要貯存於(yú)-20℃下，產物檢測部(bù)分試劑則貯(zhù)存(cún)於(yú)2-8℃。盡量避免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
【結(jié)果(guǒ)分析條(tiáo)件(jiàn)設(shè)定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定：將(jiāng)閾值綫設定在剛好超(chāo)過正常(cháng)陰性質控品(pǐn)擴(kuò)增曲(qū)綫(xiàn)的最高(gāo)點(diǎn)。
【質控標準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果(guǒ)應(yīng)為陽性(xìng)，有明(míng)顯的(dí)指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，Ct值應(yīng)小於(yú)等(děng)於(yú)35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求需在一次(cì)實驗中(zhōng)同(tóng)時滿(mǎn)足，否(fǒu)則(zé)該(gāi)次實驗(yàn)視為(wéi)無(wú)效(xiào)。
【結果(guǒ)判(pàn)斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明(míng)顯的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣(yàng)本(běn)為(wéi)可疑(yí)樣本(běn)；對(duì)於可(kě)疑樣本(běn)建(jiàn)議(yì)復核一(yī)次，若復(fù)核結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，則(zé)判(pàn)定為(wéi)陽性(xìng)，否(fǒu)則(zé)判定(dìng)為(wéi)陰性；
3. 陰性：無(wú)指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均(jūn)判(pàn)定為陰性(xìng)樣(yàng)本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗(yàn)室(shì)環境汙染，試(shì)劑(jì)汙染，樣品交(jiāo)叉汙染(rǎn)會(huì)出現假(jiǎ)陽性結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑運輸(shū)，保存不當或(huò)試劑配製(zhì)不(bù)準確(què)引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試劑檢測(cè)效能下(xià)降(jiàng)，可(kě)能會(huì)導(dǎo)致出現假陰(yīn)性結(jié)果。
PCR反應(yīng)的(dí)特異(yì)性(xìng)：
②鹼基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反應的忠實性(xìng)；
④靶基(jī)因的特(tè)異(yì)性與保守性。
呼吸道合(hé)胞病毒(dú)PCR檢測試(shì)劑(jì)盒其(qí)中(zhōng)引物與(yǔ)模板的(dí)正確(què)結(jié)合是關(guān)鍵。引物與(yǔ)模板的結(jié)合(hé)及(jí)引物鏈的延伸是遵(zūn)循(xún)鹼(jiǎn)基(jī)配對原則(zé)的(dí)。聚(jù)合酶合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶(méi)耐(nài)高溫(wēn)性(xìng)，使(shǐ)反應中(zhōng)模板(bǎn)與(yǔ)引物的結合(復性)可以在較高(gāo)的溫度下(xià)進(jìn)行(háng)，結合(hé)的特異性大大(dà)增(zēng)加(jiā)，被擴(kuò)增的靶基因片(piàn)段也(yě)就(jiù)能(néng)保持(chí)很(hěn)高的正確度。再通過選(xuǎn)擇特(tè)異性和保(bǎo)守性(xìng)高的(dí)靶(bǎ)基(jī)因區(qū)，其特(tè)異性程度(dù)就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的(dí)生(shēng)成(chéng)量(liáng)是(shì)以指(zhǐ)數(shù)方式增加(jiā)的，能將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起(qǐ)始待(dài)測模(mó)板(bǎn)擴增到微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一(yī)個靶(bǎ)細胞；在病(bìng)毒的(dí)檢測中(zhōng)，PCR的(dí)靈(líng)敏度可(kě)達3個RFU(空斑形成單位(wèi))；在(zài)細菌學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出率為(wéi)3個細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次(cì)性(xìng)地將(jiāng)反應液加(jiā)好後(hòu)，即在(zài)DNA擴增(zēng)液和水(shuǐ)浴(yù)鍋上進(jìn)行變(biàn)性-退火-延伸反應(yīng)，一(yī)般在(zài)2～4 小時完(wán)成擴增(zēng)反(fǎn)應。擴增(zēng)產物一(yī)般(bān)用(yòng)電泳(yǒng)分析，不一定要用(yòng)同(tóng)位素，無放(fàng)射(shè)性汙染，易(yì)推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求(qiú)低
不需要分(fēn)離病(bìng)毒或細(xì)菌及(jí)培(péi)養(yǎng)細胞，DNA 粗製品(pǐn)及總RNA均可作(zuò)為擴(kuò)增(zēng)模(mó)板。可直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨床標本如(rú)血液，體(tǐ)腔液(yè)，洗嗽液，毛發，細(xì)胞，活PCR技術(shù)概論(lùn)。
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