產(chǎn)品中(zhōng)心
PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
勞(láo)斯伴隨(suí)病(bìng)毒PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)
| 產(chǎn)品名稱 | 英文名稱(chēng) | 貨(huò)號(hào) |
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勞斯(sī)伴隨病(bìng)毒PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé) |
Rous Associated Virus(RAV)RTPCR |
YS-P014694 |
分(fēn)類(lèi):PCR檢測(cè)試劑盒
儲存(cún)條件:-20℃避光(guāng)保存(cún),避(bì)免(miǎn)反復(fù)凍融(róng)。
運(yùn)輸(shū):低溫,避(bì)光。
有效期:一年
貨(huò)期:現貨PCR試(shì)劑盒的(dí)有(yǒu)效(xiào)期一(yī)般為(wéi)1年,這(zhè)是(shì)指在(zài)適(shì)當的(dí)儲(chǔ)存溫(wēn)度下(xià)。核酸(suān)擴(kuò)增部(bù)分(fēn)的試(shì)劑(jì)一(yī)般要(yào)貯存(cún)於-20℃下(xià),產物(wù)檢測(cè)部(bù)分(fēn)試劑(jì)則貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡量避(bì)免反復凍融(róng)。
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定:將閾值(zhí)綫設定在剛好(hǎo)超過正(zhèng)常(cháng)陰性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)擴增(zēng)曲綫的最高點。
2. 陽(yáng)性質(zhì)控品的檢測(cè)結果應為陽性,有明顯的指數(shù)擴增期,Ct值應(yīng)小於(yú)等(děng)於35;
3. 以上要求需(xū)在(zài)一次實驗中(zhōng)同時(shí)滿足(zú),否(fǒu)則該次(cì)實驗(yàn)視(shì)為無(wú)效。
2.可(kě)疑:有(yǒu)明顯的指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期,且38≤Ct<40,此(cǐ)時樣(yàng)本為(wéi)可疑(yí)樣本;對(duì)於可疑樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議復(fù)核一(yī)次,若復核結果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數(shù)擴(kuò)增期,則判定(dìng)為陽性,否(fǒu)則(zé)判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性(xìng);
3. 陰性:無(wú)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期,Ct=40或無Ct值均(jūn)判(pàn)定為陰(yīn)性(xìng)樣本。
【對(duì)檢驗結果的解釋(shì)】
1. 實驗室環境汙染,試(shì)劑汙染(rǎn),樣(yàng)品交(jiāo)叉(chā)汙染會出現假陽(yáng)性結(jié)果(guǒ);
2. 試(shì)劑(jì)運輸,保存(cún)不當或試(shì)劑(jì)配(pèi)製不(bù)準(zhǔn)確引起的試劑檢測(cè)效能(néng)下(xià)降,可(kě)能(néng)會導(dǎo)致(zhì)出現(xiàn)假陰(yīn)性(xìng)結(jié)果(guǒ)。
②鹼基配(pèi)對原則;
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合成反(fǎn)應的忠實性(xìng);
④靶基(jī)因的(dí)特異(yì)性與(yǔ)保守性。
勞斯(sī)伴(bàn)隨(suí)病毒PCR檢測試(shì)劑盒其中(zhōng)引物(wù)與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的正(zhèng)確結合(hé)是關(guān)鍵。引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板的(dí)結(jié)合(hé)及引物(wù)鏈(liàn)的(dí)延伸是(shì)遵(zūn)循鹼基(jī)配對原(yuán)則(zé)的。聚合酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應的忠實性及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐高溫性,使(shǐ)反應(yīng)中(zhōng)模板(bǎn)與引物的結合(復(fù)性(xìng))可(kě)以在(zài)較(jiào)高的溫度下(xià)進行,結合(hé)的特異(yì)性大大增(zēng)加,被擴增的靶(bǎ)基因片段也就能保持(chí)很高(gāo)的正確度(dù)。再(zài)通(tōng)過(guò)選擇特(tè)異性和(hé)保(bǎo)守性高的(dí)靶基(jī)因(yīn)區(qū),其特異(yì)性(xìng)程(chéng)度(dù)就更高。
(2) 靈敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產物的(dí)生(shēng)成(chéng)量是(shì)以指數方式增加的,能(néng)將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從100萬個(gè)細胞中檢(jiǎn)出一個靶細胞;在病毒(dú)的檢測中(zhōng),PCR的靈敏度(dù)可(kě)達3個(gè)RFU(空(kōng)斑形(xíng)成(chéng)單位);在細菌學(xué)中zui小檢(jiǎn)出率為(wéi)3個(gè)細菌。
(3) 簡便(biàn),快速
PCR反應(yīng)用(yòng)耐高溫的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶,一次性地將反(fǎn)應(yīng)液加(jiā)好後,即(jí)在DNA擴(kuò)增液(yè)和水浴鍋(guō)上(shàng)進行變性-退火-延伸(shēn)反(fǎn)應,一般(bān)在2~4 小(xiǎo)時完(wán)成擴增反(fǎn)應。擴(kuò)增(zēng)產物(wù)一般用電泳分(fēn)析(xī),不一(yī)定要用(yòng)同位素,無(wú)放射性(xìng)汙(wū)染,易推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純(chún)度要求低(dī)
不需(xū)要分離病(bìng)毒或(huò)細菌及培養(yǎng)細胞(bāo),DNA 粗製品及總(zǒng)RNA均可(kě)作為擴(kuò)增(zēng)模板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接用臨(lín)床標(biāo)本(běn)如血(xiě)液(yè),體腔液(yè),洗嗽液,毛(máo)發(fā),細胞(bāo),活PCR技術概論(lùn)。
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