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PCR檢測(cè)試劑(jì)盒
| 產品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 英文名(míng)稱(chēng) | 貨號(hào) |
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都(dū)柏林(lín)沙(shā)門氏(shì)菌PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒 |
Salmonella dublinPCR |
YS-P014703 |
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條(tiáo)件:-20℃避光(guāng)保存,避免(miǎn)反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫(wēn),避光(guāng)。
有效期:一(yī)年
貨(huò)期(qī):現(xiàn)貨(huò)PCR試劑盒(hé)的有效期一(yī)般為(wéi)1年(nián),這(zhè)是(shì)指在適(shì)當(dāng)的(dí)儲存(cún)溫度(dù)下。核(hé)酸(suān)擴(kuò)增部(bù)分的試劑一般要貯存於(yú)-20℃下(xià),產(chǎn)物檢測(cè)部分試(shì)劑則貯存於2-8℃。盡量(liáng)避免反復(fù)凍融(róng)。
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定:將閾值(zhí)綫(xiàn)設定(dìng)在(zài)剛好超過(guò)正(zhèng)常(cháng)陰性質控品擴增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)的最高(gāo)點(diǎn)。
2. 陽性(xìng)質控品的(dí)檢測結果(guǒ)應為(wéi)陽性(xìng),有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴增期,Ct值應小(xiǎo)於(yú)等(děng)於(yú)35;
3. 以上要(yào)求需(xū)在一次實(shí)驗中(zhōng)同時滿足,否則該次(cì)實驗(yàn)視為無效(xiào)。
2.可疑(yí):有明顯的(dí)指數(shù)擴增(zēng)期,且38≤Ct<40,此(cǐ)時樣本(běn)為可疑樣(yàng)本(běn);對(duì)於可(kě)疑(yí)樣本建議(yì)復核一次(cì),若復(fù)核結(jié)果Ct<40且(qiě)有指數擴增期(qī),則(zé)判(pàn)定為陽性,否則(zé)判(pàn)定為陰性(xìng);
3. 陰性:無(wú)指(zhǐ)數擴增期(qī),Ct=40或無Ct值均(jūn)判定(dìng)為陰性樣本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗(yàn)室(shì)環(huán)境汙染(rǎn),試劑汙(wū)染,樣品(pǐn)交叉汙染會出現(xiàn)假陽性(xìng)結果(guǒ);
2. 試劑(jì)運輸,保存不當(dāng)或試(shì)劑配製不準(zhǔn)確引(yǐn)起的(dí)試(shì)劑(jì)檢測(cè)效(xiào)能下(xià)降,可能會(huì)導(dǎo)致(zhì)出現(xiàn)假陰性結果(guǒ)。
②鹼基配對原則;
③Taq DNA聚合酶(méi)合(hé)成(chéng)反應的忠實性;
④靶基因(yīn)的特異性與保守性。
都(dū)柏林沙(shā)門氏菌PCR檢測試(shì)劑盒(hé)其(qí)中(zhōng)引物與(yǔ)模板(bǎn)的(dí)正確結合是關鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模板的(dí)結合(hé)及(jí)引(yǐn)物鏈的(dí)延伸是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼基配對原則(zé)的。聚(jù)合酶(méi)合(hé)成反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性及Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高溫性,使反應(yīng)中(zhōng)模(mó)板與引物的(dí)結合(復性)可(kě)以(yǐ)在(zài)較高(gāo)的(dí)溫度(dù)下(xià)進(jìn)行,結合的(dí)特異(yì)性大大增加,被擴(kuò)增(zēng)的靶基因片段也就(jiù)能保持很高的正確度。再(zài)通(tōng)過(guò)選擇特異(yì)性和保(bǎo)守性高的(dí)靶基(jī)因區,其特異性(xìng)程度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高
PCR產(chǎn)物(wù)的生成(chéng)量是以指數方式(shì)增(zēng)加的(dí),能(néng)將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的起始待(dài)測(cè)模板擴(kuò)增到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬個(gè)細胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出一個(gè)靶細胞(bāo);在(zài)病(bìng)毒(dú)的(dí)檢(jiǎn)測(cè)中(zhōng),PCR的(dí)靈(líng)敏度可達3個RFU(空(kōng)斑形成單(dān)位);在(zài)細菌學中zui小檢出率為(wéi)3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便,快速(sù)
PCR反應用耐(nài)高溫的(dí)Taq DNA聚合酶(méi),一次(cì)性(xìng)地將反應液加(jiā)好後(hòu),即(jí)在DNA擴增(zēng)液和水(shuǐ)浴(yù)鍋上進(jìn)行(háng)變(biàn)性-退火-延(yán)伸(shēn)反(fǎn)應(yīng),一(yī)般在2~4 小(xiǎo)時完(wán)成擴增反應。擴增(zēng)產物(wù)一(yī)般用(yòng)電泳分析(xī),不一定(dìng)要用同位素,無放射(shè)性汙(wū)染,易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標(biāo)本(běn)的(dí)純(chún)度要求(qiú)低
不需(xū)要分離(lí)病毒(dú)或(huò)細菌及培養細胞(bāo),DNA 粗(cū)製(zhì)品及總(zǒng)RNA均(jūn)可(kě)作為(wéi)擴(kuò)增模板。可直接(jiē)用臨床標(biāo)本如血液(yè),體(tǐ)腔液,洗(xǐ)嗽(sòu)液,毛發,細胞(bāo),活PCR技術(shù)概論(lùn)。
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